紫杉醇对人胆管癌QBC939细胞wnt/β-catenin信号通路基因和蛋白表达的影响

目的 探讨紫杉醇对人胆管癌QBC939细胞wnt/β-catenin信号通路中基因和蛋白表达的影响.方法常规培养QBC939细胞,Westernblot检测0.1、1、10 nmol/L紫杉醇组和对照组细胞中β-catenin蛋白的表达量,Q-PCR检测10 nmol/L紫杉醇组和对照组细胞中P53和C-jun基因表达,干预时间均为24 h.结果 与对照组比较,紫杉醇各组β-catenin蛋白含量均有下降,当紫杉醇浓度达到10 nmol/L时,β-catenin蛋白表达明显降低(P<0.05).与对照组比较,经10 nmol/L的紫杉醇干预24 h后,P53基因表达上升(P<0.05),而C-jun基因表达下降(P<0.05).结论 紫杉醇通过抑制QBC939细胞内β-catenin蛋白表达,阻断Wnt信号通路,诱导抑癌基因P53的表达,降低癌基因C-jun的表达.     

miR-373在人肝细胞癌中的表达及其作用

目的探讨miR-373在肝细胞癌的表达及其作用。方法 qRT-PCR法检测80例肝癌及癌旁灶中miR-373的表达;qRT-PCR法检测人肝细胞癌细胞株BEL7402、HepG2、Hep3b、Huh7、SMMC7721中miR-373的表达情况,选择高表达miR-373的细胞株为后续研究对象;干扰miR-373表达后,Transwell检测细胞株体外迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞内MMP2、MMP9蛋白的表达变化。结果人肝细胞癌细胞株BEL7402、HepG2、Hep3b、Huh7、SMMC7721中,HepG2细胞中miR-373的表达最高。用miR-373 inhibitor转染HepG2细胞后,细胞内miR-373表达水平明显下调(P<0.05)。转染miR-373 inhibitor后,细胞迁移和侵袭细胞数目均少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-373inhibitor后,HepG2细胞内MMP2、MMP9表达下调,(P<0.05)。结论 miR-373上调MMP2、MMP9表达促进了肝细胞癌的转移,miR-373可能为... 更多     

FOXP2抑制人肝细胞癌增殖及其机制

目的探讨FOXP2在肝细胞癌增殖中的作用及其机制。方法 qRT-PCR法检测人肝细胞癌细胞株BEL7402、HepG2、Hep3b、Huh7、SMMC7721中FOXP2的表达情况,选择低表达FOXP2的细胞株为后续研究对象;CCK-8和克隆形成实验检测细胞株体外增殖能力;Western blot检测细胞内cyclinB1/CDK1、AKT、p-AKT蛋白的表达变化。结果人肝细胞癌细胞株BEL7402、HepG2、Hep3b、Huh7、SMMC7721中,HepG2细胞中FOXP2的表达最低(P<0.05)。继而用FOXP2质粒转染HepG2细胞后,细胞内FOXP2表达水平明显上调(P<0.05)。与未转染前相比,细胞转染FOXP2质粒后增殖能力显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。转染FOXP2质粒后,细胞内cyclinB1/CDK1表达下调(P<0.05),AKT信号通路活化减少(P<0.05)。当用AKT信号通路抑制剂处理细胞后,cyclinB1/CDK1表达降低(P<0.05)。结论 FOXP2通过调控AKT信号通路抑制了肝细胞癌增殖,... 更多     

miR-142-5p通过CCND1调控胆囊癌细胞的增殖和转移

目的 研究miR-142-5p调控CCND1对胆囊癌细胞增殖和转移的作用,并阐明其具体作用机制。方法 采用RT-qPCR鉴定miR-142-5p在人胆囊上皮细胞和人胆囊细胞系中的表达差异。双荧光素酶报告基因实验用于验证miR-142-5p与CCND1的靶向关系。CCK-8用于检测人胆囊细胞增殖。Transwell和划痕实验检测胆囊细胞迁移。Western blot检测上皮间充质转化标志蛋白的表达水平。结果 miR-142-5p在胆囊癌细胞系中显著低表达,且在GBC-SD细胞中表达最低。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-142-5p能够抑制野生型CCND1的荧光素酶活性。结论 功能试验表明,过表达miR-142-5p抑制GBC-SD细胞的增殖和转移,同时过表达miR-142-5p和CCDN1能够部分逆转过表达CCDN1对GBC-SD细胞增殖和转移的影响。证实miR-142-5p通过抑制CCND1表达,进而抑制胆囊癌细胞的增殖和转移。     

miR-125b-5p调控HK2抑制胆囊癌细胞增殖和糖酵解

目的 研究miR-125b-5p通过HK2调控人胆囊癌细胞增殖和糖酵解的作用机制。方法 分别在人胆囊癌细胞GBC-SD中转染NC mimic、miR-125b-5p mimic、miR-125b-5p mimic+pcDNA-NC、miR-125b-5p mimic+pcDNA-HK2。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real Time Quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR）检测miR-125b-5p和HK2 mRNA的表达,Western blot检测HK2和LDHA、PDK1的蛋白表达。细胞计数试剂盒-8(cell countingKit-8,CCK-8)检测细胞增殖活力,糖酵解相关试剂盒检测乳酸生成、葡萄糖消耗以及ATP生成。双荧光素酶报告基因实验对miR-125b-5p和HK2的靶向关系进行验证。结果 miR-125b-5p在胆囊癌细胞系GBC-SD和NOZ(P <0.001)以及组织（P <0.01）中表达降低,且在GBC-SD细胞中低于NOZ细胞中。过表达miR-125b-5p可显著抑制GBC-SD细胞的增殖（...     

Cyclin D1和Survivin在乳腺癌及乳腺纤维腺瘤组织中的表达及临床意义

目的检测细胞周期蛋白Cyclin D1和凋亡抑制因子Survivin在乳腺癌中的表达,探讨其与乳腺癌的关系。方法采用免疫组化法检测40例乳腺癌组织、40例乳腺纤维腺瘤组织以及20例正常乳腺组织中Cyclin D1和Survivin的表达,并分析其临床病理意义。结果Cyclin D1和Survivin在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为72.5%(29/40)和65.0%(26/40),在乳腺纤维腺瘤中的阳性表达率分别为27.5%(11/40)和25.0%(10/40),而在正常乳腺组织中无表达,在乳腺癌中的表达明显高于乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织(P0.01);Cyclin D1和Survivin的阳性表达与乳腺癌的病期、有无淋巴结转移密切相关(P0.05),而与肿瘤大小无关(P0.05);Cyclin D1的阳性表达和Survivin的阳性表达呈正相关。结论Cyclin D1和Survivin在乳腺良、恶性肿瘤及乳腺正常组织中的表达有明显的差异;其表达与乳腺癌的病期及淋巴结转移有关;Cyclin D1和Survivin的表达有相关性。     

紫草素体外对人结肠癌生长抑制的作用

目的研究紫草素对体外培养的人结肠癌细胞HCT116增殖的影响,并初步探讨其潜在的调节作用机制。方法体外正常培养的HCT116细胞分别给予不同浓度的紫草素刺激,MTT法检测HCT116细胞的增殖情况,AnnexinV-FITC/PI双染后,流式检测HCT116细胞凋亡,q RT-PCR检测细胞中Bcl-2、Bax的m RNA表达,Western blot检测HCT116细胞中Akt蛋白磷酸化水平。结果 10～80μg/m L浓度的紫草素对HCT116细胞增殖均有明显的抑制作用,并能促进凋亡;随紫草素浓度增加,HCT116细胞Bcl-2的m RNA表达逐渐下降(P<0.05),Bax的m RNA表达水平逐渐升高(P<0.05),p-Akt蛋白表达逐渐减少(P<0.05)。结论紫草素可以诱导体外培养的人结肠癌细胞HCT116发生凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的激活,进一步降低Bcl-2mRNA表达,增加Bax的m RNA表达有关。     

3种血清标志物在胰腺癌诊断中的价值

[摘霎]目的 探讨经典肿瘤标志物糖类抗原CA19-9、潜在血清标志物白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)和转谷氨酰胺酶2 (TG2)单项及联合检测在胰腺癌诊断中的价值.方法 检测了胰腺癌患者、胰腺良性病患者及健康体检者血清中CA19-9、SLPI及TG2 3种肿瘤标志物的水平,并对结果进行分析.结果 胰腺癌组血清中CA19-9(135.7±18.5) U/mL、SLPI (90.7±16.1) μg/L与TG2 (53.7±18.1) mU/mL、SLPI与TG2含量高于胰腺良性病患者及健康体检者组,差异有统计学意义(P＜0.05).单项检测时CA19-9、SLPI及TG2的敏感度分别为82.7％、61.5％和57.8％,特异性分别为92.7％、89.1％和87.3％;联合检测时敏感度为92.3％,特异性为96.4％.结论 CA19-9、SLPI及TG2联合检测敏感度和特异性均高于单项检测,联合检测较单项血清标志物检测能提高胰腺癌的诊断率.