案例教学法在普通外科实习医师教学中的应用

普通外科是所有外科实习科室中最重要的科室之一,如何在较短的实习时间内将普通外科常见病和多发病的诊疗知识掌握好,这是普通外科实习教学教师必须面对的问题.采用案例教学法与传统教学法进行教学效果比较研究,发现前者能明显提高普通外科实习质量.     

Apelin-13对肝细胞癌HepG2细胞增殖的影响

目的探讨Apelin-13对肝细胞癌HepG2细胞增殖的影响。方法将HepG2细胞按Apelin-13不同浓度分组:10%胎牛血清组(对照组)、0.000 1、0.001、0.01、0.1 μmol/L Apelin-13组,处理时间为24 h;按Apelin-13时效关系分组:0、6、12、18、24 h组,处理浓度为0.1 μmol/L。细胞增殖实验检测各组处理后细胞水平。蛋白质印迹法检测细胞增殖相关蛋白细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和细胞凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达水平。结果HepG2细胞增殖程度随Apelin-13浓度增加及作用时间延长而增强(P＜0.05)。CyclinD1蛋白表达水平随Apelin-13处理浓度的升高及处理时间延长而升高(P＜0.05);Caspase-3蛋白表达水平随Apelin-13处理浓度的升高及处理时间延长而降低(P＜0.05)。结论Apelin-13在一定范围内促进肝细胞癌HepG2细胞增殖,抑制Caspase-3蛋白的表达,抑制效果随着处理时间延长和浓度的升高而增强。     

RNA靶向干扰DcR3促进人肝癌HepG2细胞凋亡及机制研究

目的研究靶向干扰DcR3基因对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响并探讨其可能的分子机制。方法设计并合成DcR3基因的特异性DcR3 siRNA(实验组)和非特异性DcR3 siRNA(对照组),在脂质体介导下分别转染HepG2细胞株。Western blot检测两组DcR3 siRNA转染HepG2细胞24和48 h后DcR3蛋白表达水平;MTT法检测转染48 h细胞生长增殖;流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳检测转染24 h细胞凋亡;免疫组化法检测转染24 h细胞caspase3蛋白的表达。结果实验组细胞24和48 h DcR3蛋白相对表达水平分别为(0.532±0.051)和(0.417±0.044);对照组分别为(1.978±0.246)和(2.018±0.275);两组比较,相同时间点相对表达水平差异有显著性(P0.05);实验组24和48 h DcR3蛋白相对表达水平比较差异有显著性(P0.05),对照组差异无显著性(P0.05)。两组细胞转染48 h抑制率分别为(59.8±5.4)%和(0.8±0.1)%,两者比较差异有显著性(P0.05);两组细胞转染24 h凋亡率分别为(19.7±3.2)%和(6.9±0.8)%,两者比较差异有显著性(P0.05);转染24 h后两组caspase3蛋白阳性率分别为72.8%和38.9%,平均光密度值分别为(0.41±0.06)和(0.21±0.03),两者比较差异有显著性(P0.05)。结论特异性DcR3 siRNA有抑制人肝癌HepG2细胞DcR3蛋白表达、细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与上调caspase 3的表达有关。     

靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因siRNA表达载体裸鼠成瘤抑制作用

目的 探讨靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因siRNA表达载体对人肝癌细胞株裸鼠成瘤的抑制作用.方法 将设计并合成构建好的靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的psuper.retro.neo-VEGF-siRNA表达载体转入HepG2细胞,通过G418抗性筛选出稳定株(HepG2/psuper.retro.neo-VEGF-siRNA,实验组),同时设对照组(HepG2/psuper.retro.neo组)和空白组(HepG2组).分别移植BALA/c裸鼠成瘤,计算各组鼠成瘤潜伏期和接种20 d后瘤重,Western-blotting检测肿瘤组织中VEGF的表达变化,免疫组织化学SP法检测瘤组织内微血管密度(MVD).结果 实验组、对照组和空白组裸鼠成瘤潜伏期分别为(9.2±1.2)、(3.9±0.7)和(3.8±0.9)d;接种20 d后3组平均瘤重分别为(194±57)、(566±86)和(626±96)g;瘤组织VEGF蛋白表达水平分别为(0.075±0.012)、(0.198±0.009)和(0.205±0.008);MVD分别为(13.6±2.8)、(34.3±2.9)和(35.3±3.5),实验组与对照组和空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 合成和构建的靶向人肝癌HepG2VEGF基因干扰质粒具有抑制人肝癌细胞裸鼠成瘤和血管生成的作用.     

肠道血管瘤致肠梗阻二例

例1：患者男,61岁,因突发下腹疼痛就诊,以＂肠梗阻＂收入院.入院体查：腹部稍膨隆,腹肌稍紧,左下腹部压痛,无反跳痛,叩诊鼓音,移动性浊音阴性,肠鸣音亢进.肛门指检未见异常.辅助检查：血常规示WBC 3.59×10^9/L,N 83.2％,HB100 g/L;凝血功能、肝肾功能、电解质未见明显异常,肿瘤标记物未见明显异常,腹部立位X线片提示＂肠梗阻＂,CT（图1）示降结肠软组织团块影,考虑结肠肿瘤并梗阻.行剖腹探查,术中见肿块位于降结肠近脾曲,大小约8 cm×7 cm×6 cm,浸出浆膜,质地较韧,部分被大网膜包裹,部分与外侧壁腹膜相黏连,全空肠＋回肠极度扩张,内容大量液、气体,肠壁表面可见散在斑片状出血点,肠壁高度水肿.行左半结肠切除、横结肠造瘘术（图2）.术后病理报告：降结肠血管瘤并出血,炎症细胞浸润（图3）.