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目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应. 相似文献
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目的:通过对膝前交叉韧带损伤后不同时期不同手术方法的治疗结果对比,介绍镜下半腱肌肌腱膝前十字韧带重建的方法。方法:采用传统髂胫束重建前十字韧带,及镜下半腱肌腱前十字韧带重建,经对两手术方法的治疗结果进行随访、对比,以及骨-髌腱-骨(B-PT-B)术式较易出现的并发症,进行比较。结果:传统前十字韧带重建手术组,病人遗留后遗症者达5人,占38.5%,症状严重者占23.1%,而微创前十字韧带重建者因时间尚短,随访最长4年,目前尚未有明显后遗症,但二者在术后并发症和手术创伤方面有明显的差异。结论:以多股半腱肌肌腱进行前十字韧带损伤后重建,对预防由B-PT-B术式引起的并发症,恢复膝关节功能是一种可靠的方法。 相似文献
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阿尔茨海默病患者膳食微量营养素摄入量的调查 总被引:2,自引:0,他引:2
阿尔茨海默病是一种常见老年性退行性疾病,国外的病例-对照研究和前瞻性研究表明,营养素与脑认知功能之间有一定关系[1],但目前国内外针对阿尔茨海默病患者膳食质量评价少见报道。本研究于2007年3月采用72h膳食摄入回顾法,对病例组和对照组的膳食摄入现状进行调查,分析患者膳食营养素维生素C、维生素E、维生素A、硫胺素、核黄素、钙、锌、硒、镁、锰的摄入水平,采用营养学原理对阿尔茨海默病患者膳食营养素摄入量进行评估,并与健康老年人的相应指标进行对比,从而了解阿尔茨海默病患者实际摄入的膳食微量营养素是否适宜,以便在饮食上为老年… 相似文献
10.
目的建立检测Fenton反应产生羟自由基的新方法。方法羟自由基与灿烂绿发生氧化反应,使灿烂绿颜色发生变化,在624nm处用分光度计测定其△A624值的变化,可间接测定羟自由基的生成量。结果通过对测定条件的研究,得到最佳测定方案。同时发现甘露醇、抗坏血酸、硫脲清除羟自由基作用呈明显的量效关系。结论该方法稳定性好、操作简便、测定快速,可作为一种简便的筛选抗氧化荆的方法。 相似文献