A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

膝前十字韧带损伤后的外科治疗

目的：通过对膝前交叉韧带损伤后不同时期不同手术方法的治疗结果对比，介绍镜下半腱肌肌腱膝前十字韧带重建的方法。方法：采用传统髂胫束重建前十字韧带，及镜下半腱肌腱前十字韧带重建，经对两手术方法的治疗结果进行随访、对比，以及骨－髌腱－骨（B－PT－B）术式较易出现的并发症，进行比较。结果：传统前十字韧带重建手术组，病人遗留后遗症者达5人，占38．5％，症状严重者占23．1％，而微创前十字韧带重建者因时间尚短，随访最长4年，目前尚未有明显后遗症，但二者在术后并发症和手术创伤方面有明显的差异。结论：以多股半腱肌肌腱进行前十字韧带损伤后重建，对预防由B－PT－B术式引起的并发症，恢复膝关节功能是一种可靠的方法。     

灿烂绿光度法检测Fenton反应产生的羟自由基

目的建立检测Fenton反应产生羟自由基的新方法。方法羟自由基与灿烂绿发生氧化反应，使灿烂绿颜色发生变化，在624nm处用分光度计测定其△A624值的变化，可间接测定羟自由基的生成量。结果通过对测定条件的研究，得到最佳测定方案。同时发现甘露醇、抗坏血酸、硫脲清除羟自由基作用呈明显的量效关系。结论该方法稳定性好、操作简便、测定快速，可作为一种简便的筛选抗氧化荆的方法。     

腰椎间盘突出症术后椎间隙感染的诊治

目的：探讨椎间盘术术后椎间隙急慢性感染的诊断和治疗方法。方法：椎间盘术后，通过临床查体，MRI检查，血常规，血沉，C反应蛋白等指标的检测，对椎间隙感染进行诊断，急性椎间盘感染的患者采用保守治疗，椎间隙引流等方法治疗：慢性椎间隙感染采用椎间隙病灶清除，植骨融合法手术治疗。结果：本组被诊断为椎间隙感染的患者主要表现为剧烈的腰痛，低热，血象升高，血沉加快，腰椎MRI出现特征性改变等表现。其中6例获得早期诊断，早期保守治疗效果良好。1例慢性感染合并腰椎不稳患者予以后路病灶，植骨内固定术，8例患者均症状改善，病愈出院。结论：椎间盘术后椎间隙感染应该早期渗断，并根据不同的类型采用相应的治疗。     

输液瓶网套污染调查及对策

<正> 输液瓶网套污染在医院感染控制中是一个最易被忽视的环节,但其污染状况尚不清楚。为此,我们对本院10个科室进行了污染程度调查,现报告如下。1 现状调查 (1)各科室输液的网套均为护士编织制做,材料为棉线绳,废弃一次性输液器、尼龙绳、塑料绳等。     

麻杏石甘汤加味治疗小儿喘憋性肺炎30例临床观察

小儿喘憋性肺炎多见于6个月至2岁的小儿,发病率较高,多为病毒感染所引起。本病起病急骤,喘喘重,易诱发心力衰竭,死亡率高,对婴幼儿的危害很大。笔者采用中药麻杏石甘汤加味治疗,收到满意效果,兹介绍如下: 1 临床资料 本组30例,男24例,女6例,年龄6个月～1岁5例,1～3岁25例。发病季节以冬春季多见。     

旋股外侧血管横支大转子骨瓣修复股骨头的应用解剖

在３２例经红色乳胶灌注过的成人下肢标本上，解剖测量了旋股外侧动横支的起始，走行位置和分支。观测了供应股骨大转子前外侧血供的来源，可切取大转子骨瓣３．５×２．０×４．０ｃｍ。从而设计了带旋股外侧血管横支的大转子骨瓣修复股骨头无菌性坏死。本文还对手术技术进行了讨论。