小鼠内淋巴囊原代上皮细胞L型钙离子通道定位表达

目的 探讨C57BL/6小鼠内淋巴囊原代上皮细胞中电压门控钙离子通道定位表达。 方法 选取2日龄C57BL/6(P2B6)小鼠60只,P2B6小鼠8只麻醉处死取得颞骨标本,体视显微镜下定位内淋巴囊位置,提取内淋巴囊原代细胞并在低血清状态下培养。P2B6小鼠52只处理同上,颞骨标本用4%甲醛固定后脱钙包埋,采用免疫组织荧光技术和免疫细胞荧光技术定性原代内淋巴囊上皮细胞并确定L型钙离子通道表达。 结果 内淋巴囊上皮细胞在P2B6小鼠内淋巴囊中排列紧密,可见细胞聚集呈嵴状突起,胞体较小,细胞呈椭圆状,以扁平上皮为主,细胞培养光镜观察为不规则铺路石样,细胞形态大小不一,胞浆丰富,核椭圆形且大。免疫荧光检测显示L型Ca²⁺通道在内淋巴囊上皮细胞膜上均呈均匀表达,细胞核上高表达。 结论 小鼠原代内淋巴囊上皮细胞中L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(CACNA1C)、L-型电压依赖钙离子通道α1S亚基(CACNA1S)、L-型电压依赖钙离子通道α1D亚基(Cav1.3/ CACNA1D)表达为阳性,为细胞功能学实验提供依据,有利于进一步研究内淋巴囊维持稳态的机制。