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目的 构建人C-erbB2干扰载体pGenesil-erbB2,并稳定转染入CerbB-2高表达的人结肠癌细胞株HT-29细胞,观察其对人结肠癌HT-29细胞从转录后水平对Her-2蛋白表达的影响.方法 利用免疫组化方法筛选出CerbB-2高表达细胞株HT-29,以人C-erbB2cDNA基因为靶标设计RNA干扰片段和阴性对照片段,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-erbB,进行鉴定及测序.并稳定转染至HT-29细胞.结果 测序证明人C-erbB2 siRNA表达载体质粒pGenesil-erbB构建成功,pGenesil-erbB稳定转染入人结肠癌HT-29细胞,采用Western blot实验证明pGenesil-erbB可显著抑制Her-2蛋白的表达.结论 成功构建了人CerhB2干扰载体质粒pGenesil-erbB.稳定转染至结肠癌HT-29细胞株,并能抑制HT-29细胞的Her-2蛋向的表达,为靶向CerbB2的siRNA对结肠癌的放射增敏研究奠定了基础. 相似文献
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患女 ,1 4岁 ,汉族 ,学生。以左腋下皮肤红肿、破溃 ,发热 1月住院。 1月前发现左腋下有两个大枣大之包块。皮肤红肿有压痛 ,其中一个自行破溃 ,流出少许粉红色液体 ,随后伴有发热 ,体温在3 8~ 40℃ ,用各种抗生素治疗无效。检查 :T3 9℃ ,皮肤无黄染 ,全身浅表淋巴结无肿大 ,胸骨无压痛 ,心肺未见异常 ,腹软 ,肝不大 ,脾大、肋下 2 cm,神经系统正常。左腋下有 2 .0 cm× 2 .0 cm大之破溃伤口 ,深约 1 .5 cm,放有雷夫奴尔引流条 ,另一破溃伤口愈合 ,左下腹壁可触及一 3 cm× 2 cm×2 cm大之包块 ,边界清、质较硬、表面平滑、有压痛、皮肤… 相似文献
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目的:观察单纯放射及放射联合应用siRNA对细胞增殖、细胞周期、凋亡和放射增敏性的影响.方法:分别用X射线单纯放射和放射合并转染c-erbB-2-siRNA质粒的结肠癌细胞(分别分为3组pGenesil-erbB-2实验组、阴性质粒对照组和转染试剂对照组),MTT法、平板克隆形成实验检测细胞增殖和放射敏感性,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:6、8GyX射线照射组较0、2和4 Gy组的吸光度A值分别为0.314±0.035、0.117±0.009和0.721±0.044、0.608±0.018、0.584±0.041,6、8 Gy组显著低于0、2和4 Gy组,P=0.000 1;放射合并c-erbB-2-siRNA组在0、2、4、6和8 Gy照射组的吸光度A值分别为0.741±0.024、0.611±0.071、0.538±0.041、0.245±0.029和0.117±0.011,均显著低于其他两组,P=0.000 1.4、6、8组和0、2 Gy组G2/M期细胞数分别为12.19±0.41、15.02±0.38、18.56±0.94及6.50±0.43、5.26±0.71,前者显著高于后者,P=0.000 1;4 Gy X射线照射合并c-erbB-2-siRNA组、转染试剂对照组及阴性质粒对照组G0/G1期细胞数分别为79.93±0.79、69.34±1.17和69.40±0.84,实验组显著高于其他两组,P=0.000 1.0、2、4、6和8 GyX射线照射诱导HT-29细胞发生凋亡的无明显差别,P=0.065;4 Gy X射线照射合并c-erbB-2-siRNA组、阴性质粒对照组和转染试剂对照组的细胞凋亡率分别为19.21±3.54、6.82±0.74和7.56±0.35,实验组显著高于其他两组,P=0.000 1.放射合并c-erbB-2-siRNA组的放射增敏比为1.283和1.242,均>1.结论:放射联合应用c-erbB-2-siRNA对结肠癌HT-29细胞具有抑制细胞增殖、诱导凋亡和放射增敏作用. 相似文献
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临床病理教学的任务是为临床培养合格的临床病理医师,从而为临床诊疗提供精准的病理诊断。随着病理教学改革的不断深入,在临床病理教学中也涌现出越来越多的新教学模式,进而从不同层面提高了病理教学的效果,但病理教学与临床实践工作如何能够有机结合,如何提高病理医师的工作能力、执业水准和沟通技巧?文章通过笔者在日本静冈癌症中心所见所闻,提出了临床病理教学的关键在于学有师承,而多层次的培养制度是教学质量的根本保障,此外,建立临床病理思维,提高与临床沟通的技巧和能力是培养临床病理医师工作能力的重要环节。 相似文献
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