排序方式: 共有21条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
目的了解变异的胰岛素基因(insulin/furin)在HepG2细胞系中表达及活性胰岛素的产生情况。方法构建含有insulin/furin的表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin并转染HepG2细胞,RT-PCR和放射免疫分析法从mRNA和蛋白质水平观察转染后HepG2细胞中insulin/furin的表达和胰岛素的产生情况。结果HindⅢ和EcoR V双酶切验证质粒p(G1RE)3BP-11×furin,切下260bp和4700bp两个片段,回收260bp片段测序证实为insulin/furin;RT-PCR检测转染后的HepG2细胞有insulin/furin的表达,DNA测序证实为insulin/furin;培养基中可检测到胰岛素。结论含insulin/furin的真核表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin转染HepG2细胞,insulin/furin成功地在HepG2细胞中表达,并产生有生物活性的胰岛素。 相似文献
2.
Establishment and characterization of two cell lines derived from human transitional cell carcinoma. 总被引:1,自引:0,他引:1
Two continuous cell lines derived from the neoplastic urothelium had been maintained in culture for more than two years. The first cell line derived from the urothelium of a fusion papillocarcinoma on the left lateral wall of the bladder was designated as TBC-1 and grown in vitro for more than 150 generations. The second cell line derived from the urothelium of a papillocarcinoma in the left renal pelvis was designated as TPC-1 and grown in vitro for more than 100 generations. Characterization studies made on both cell lines showed that the cells had a rapid doubling time, exhibited mul-tilayering and produced tumors in sc of BALB / c. Tumor nodules that produced sc of BALB / c kept similar cellular and pathological features to those of the primary biopsy specimens under light and electron microscopes. TPC-1 cell line exhibited a three-dimensional structure of transitional epithelium on the nylon-mesh disk which was coated with a layer of rat tail collagen. Both TBC-1 and TPC-1 cell lines formed colonies 相似文献
4.
phIFN-α-2 B穿梭质粒在卡介苗中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的建立一种新型、具有分泌hIFN-α-2B功能的卡介苗(BCG),为膀胱癌的治疗提供更合理的方法。方法利用基因工程技术构建出穿梭质粒phIFN-α-2B,转导至BCG内形成重组hIFN-α-2B-BCG,采用PCR、测序方法进行鉴定,ELISA方法对其表达情况进行检测。结果穿梭质粒phIFN-α-2B所插入的序列完全正确,可以转导入BCG内形成重组hIFN-α-2B-BCG。细菌外hIFN-α-2B浓度可达997.2pg/ml。结论利用基因工程技术构建了phIFN-α-2B穿梭质粒并转导入BCG内,构建出rBCG-hIFN-α-2B。重组BCG可将hIFN-α-2B分泌性表达到细菌外,为其应用于膀胱肿瘤的治疗提供了实验依据。 相似文献
5.
支气管肺炎为小儿最常见的肺炎,在我国以细菌性肺炎常见,近几年支原体肺炎也逐渐增多。从2001年1月~2003年10月,在我院儿科应用阿奇霉素治疗支气管肺炎150例,疗效显著,现报道如下。 相似文献
6.
目的 探讨葡萄糖、胰岛素对(G1RE)3BP-1启动子活性的影响及意义.方法 采用脂质体转染法将含有(G1RE)3BP-1启动子的真核表达质粒p(G1RE)3BP-1Luc转染至人肝癌细胞系-HepG-2细胞中,6 h后分别加入不同浓度的葡萄糖、胰岛素,孵育48 h后,分别检测其报告基因荧虫素酶的活性.结果 荧虫素酶的活性随着培养基中葡萄糖的浓度增高而增加,随着培养基中胰岛素浓度的增多而减少.结论 (G1RE)3BP-1启动子在肝细胞中受葡萄糖的正调控、受胰岛素的负调控,若用于调控胰岛素基因的表达,将使糖尿病的基因治疗更安全更可行. 相似文献
7.
8.
急性肝炎引是由于感染肝炎病毒而引起的肝脏疾病,病程不超过6个月.在我国,最常见的急性肝炎是急性乙型肝炎,表现为现低热、全身疲乏无力、食欲减退,伴有恶心、呕吐、厌油腻、肝区不适及尿黄等.笔者静脉滴注吉他霉素致小儿急性肝炎1例,现报告如下. 相似文献
9.
目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达。方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLC-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒。应用脂质体方法转洒重组质粒进入包装细胞PA317,筛选长春新碱抗性克隆株,收集上清液感染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞2BS,筛选携带bGH基因的成纤维细胞的克隆株3T3/bGH和2BS/bGH。结果:RT-PCR分析表明基因转染组的3T3/bGH细胞和2BS/bGH细胞在相当于680bp处有一清晰的条带,而空质粒对照组无相应条带出现。RIA分析表明转染基因细胞的培养液及胞浆蛋白有bGH蛋白表达,而作为对照的3T3/mdr细胞和NIH/3T3细胞均无此蛋白表达。结论:应用逆转录病毒IRBS载体系统转染bGH基因进入成纤维细胞,该系统易筛选,转染效率较高。 相似文献
10.
c-Ha-ras癌基因反义RNA抑制膀胱癌细胞生长及粘附的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 研究降低c-Ha-ras癌基因表达对膀胱癌细胞生长和粘附的影响。方法 将反义c-Ha-ras基因导入膀胱癌细胞系TBC-1细胞株,筛选阳性细胞克隆。Southern杂交鉴定外源基因整合情况,荧光分光光度法检测c-Ha-ras表达,绘制生长曲线,体外检测细胞粘附率。结果 筛选出细胞克隆TBC-neo和TBC-antiras,放射自显影显示只有TBC-antiras有外源性c-Ha-ras杂交带 相似文献