乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes对血管内皮细胞EGFR表达的影响

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes介导表皮生长因子受体(EGFR)对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)EGFR表达影响,探讨肿瘤组织血管内皮细胞异常表达EGFR的机制。方法超速离心及密度梯度离心法提取MDA-MB-231细胞源exosomes;免疫细胞化学法检测MDA-MB-231细胞EGFR的表达;Western blot法检测MDA-MB-231细胞、exosomes及HUVECs EGFR蛋白表达;免疫细胞化学法检测HUVECs与exosomes共培养24h后EGFR的表达;RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞与实验组HUVECs细胞EGFR mRNA的表达。结果 EGFR在MDA-MB-231细胞中呈高表达,MDA-MB-231细胞及exosomes可见相对分子质量为170×103的EGFR蛋白呈阳性反应带,HUVECs呈阴性反应带;HUVECs与exosomes共培养24h后,镜下可见实验组部分HUVECs细胞质有淡黄色或棕黄色颗粒,EGFR阳性表达率为(21.4±3.1)%,与对照组(无EGFR蛋白表达)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。MDA-MB-231细胞EGFR mRNA表达阳性,而实验组HU-VECs EGFR mRNA表达阴性。结论 MDA-MB-231细胞源exosomes携带癌基因EGFR,并能介导其向周围血管内皮细胞转移,这可能是肿瘤内皮细胞异常表达EGFR的一种方式。     

乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的作用

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分别检测50、100、200、400μg/ml Exosomes对HUVECs促增殖作用的影响,流式细胞仪测定200μg/ml Exosomes对HUVECs细胞周期的影响,Western blotting检测200μg/ml Exosomes诱导下HUVECs细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes可促进HUVECs细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性。200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24h后,S期细胞比例(27.8%±3.37%)较对照组(15.34%±0.71%)增加(P<0.05),G1/S期细胞比例(2.22%±0.37%)与对照组(4.67%±0.47%)比较下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24、48、72h后,磷酸化ERK表达(0.3378±0.0415,0.4967±0.0511,0.9205±0.0462)与磷酸化Akt蛋白表达(0.4091±0.0361,0.5484±0.0382,0.7496±0.0481)与对照组(磷酸化ERK 0.1836±0.0324,磷酸化Akt 0.2582±0.0215)相比有所增加(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes能促进HUVECs的增殖,其机制可能与细胞周期改变,以及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化有关。     

MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF自分泌及体外成管作用的影响

 目的 研究人乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)自分泌及体外成管作用的影响,探讨肿瘤细胞源exosome在肿瘤微环境中对血管内皮细胞血管生成的调控作用。方法 低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF的变化水平;Western blot技术检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF、VEGFR2及p VEGFR2的蛋白表达情况;RT PCR法检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达情况;观察HUVEC与exosome共培养24 h后的体外成管能力。 结果 HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF为(110.851±18.404)pg/mL,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);Western blot结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF和p VEGFR2的蛋白表达水平均增加(P＜0.05);RT PCR结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达水平增加(P＜0.05);体外成管实验显示,exosome显著提高了HUVEC的管腔形成能力(P<0.05)。结论 乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome促进了血管内皮细胞VEGF的表达及分泌,激活了血管内皮细胞VEGF/VEGFR2自分泌环并提高了血管内皮细胞的体外成管能力,对促肿瘤血管生成有一定的调控作用。     

宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究

目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclin E)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响.方法:采用RT-PCR、Western blot检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情况.结果:RT-PCR及Western blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞cyclin E mRNA表达水平无明显变化,cyclin E蛋白表达水平明显下降,FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞均明显增高.结论:宫颈癌Heb细胞中FBW7异常表达与MAPK信号通路激活密切相关.UO-126阻断MAPK信号通路可下调cyclin E表达,上调FBW7表达.     

一种新的细胞间的通讯方式：Exosomes

在多细胞生物中,细胞间的信息传递是由一系列信息分子参与完成的有序的级联反应,为维持机体的稳定状态,以适应各种生命活动是必不可少的。相对于已知的细胞通讯方式,目前一种起源于细胞内吞途径中的多泡体（Multivesicular bodv,MVB）的膜性小囊泡Exosomes在细胞信息传递中的作用日渐受到重视。     

重庆市城乡居民预防肿瘤健康教育近期效果评价

[目的]了解重庆市城乡居民肿瘤预防健康教育近期干预效果。[方法]采用整群抽样的方法,抽取重庆市城乡常住人口共1 211人,其中城市677人,占55.9%,农村534人,占44.1%。开展肿瘤预防健康知识演讲、知识竞赛、发放肿瘤预防宣传册和现场咨询等健康干预,并将讲座前、后问卷调查的结果进行比较。[结果]干预后城乡居民对肿瘤预防知识及恶性肿瘤早期症状的知晓率与干预前相比有显著提高,肿瘤预防知识知晓率由47.4%上升到61.2%(χ2=44.43,P﹤0.01),恶性肿瘤早期症状知晓率由40.5%上升到54.6%(χ2=47.53,P﹤0.01),干预后对肿瘤防治的态度与干预前相比有统计学差异。[结论]肿瘤健康教育可帮助城乡居民掌握基本的肿瘤预防知识,在近期内提高了居民肿瘤防治知识的水平,是预防肿瘤发生的一项投入小、收益大的重要措施。     

胶质瘤结构化病理报告系统的建立及临床应用

目的 建立具有自动生成联动规则与结构化数据存储功能的胶质瘤结构化病理报告系统并应用于临床。方法 依据WHO中枢神经系统肿瘤分类制定报告系统标准录入语言和自动生成规则，建立胶质瘤结构化病理报告系统并应用于临床病理诊断实践。系统应用1年后，通过比较叙述性与结构化报告关键病理指标报告率和数据完整性，评价结构化报告对病理报告质量的影响。结果 建立的胶质瘤结构化病理报告系统应用于临床病理诊断实践，实现了病理报告快速生成和数据结构化存储。与传统叙述性格式报告相比，该系统生成的结构化病理报告中WHO分级(96.8%vs 100.0%)、整合诊断报告率(87.6%vs 100.0%)以及包含5个关键指标的报告比例(87.6%vs 100.0%)显著提高，差异有统计学意义。结论 胶质瘤结构化病理报告系统可以实现病理报告智能辅助快速录入和结构化数据存储，有效提高报告录入效率和病理报告完整性、规范性。