沈敏鹤复方附苓汤治疗卵巢癌经验研究

卵巢癌是发病率、病死率较高的女性生殖恶性肿瘤。中医药治疗卵巢癌,既可以扶正祛邪,起到抗肿瘤的作用,又可以降低现代医学治疗后的副作用。浙江省名中医沈敏鹤主任从事中医肿瘤临床30余年,积累了丰富的诊疗经验,逐渐形成自己独特的临证思辨特点与诊疗规律。复方附苓汤是沈敏鹤主任在长期临床实践中总结的治疗卵巢癌的有效方药,本文从组方源流、方义阐述、加减运用等方面进行阐述,并总结沈敏鹤主任在临证中强调的情志饮食调适、脾胃顾护等学术思想,同时摘录验案一则来阐述复方附苓汤的临床运用经验和体会。     

日本血吸虫副肌球蛋白合成肽的免疫学鉴定

目的 鉴定日本血吸虫副肌球蛋白合成肽Sj97-P22。 方法 27只雌性C57BL/6小鼠随机均分为合成肽Sj97-P22免疫组、无关肽免疫组和PBS免疫组,分别于尾基部皮下注射与完全福氏佐剂等体积充分混匀的合成肽Sj97-P22（100 μg）乳化物、无关肽（100 μg）乳化物和PBS乳化物,抗原免疫剂量为100 μg/（只·次）,共免疫2次,间隔1周。于免疫后7~10 d分离各组小鼠脾单个核细胞,运用流式细胞技术三色标记法检测其CD4^＋ T细胞胞内因子干扰素γ（IFN-γ）和白介素4（IL-4）。将Sj97-P22免疫小鼠或PBS免疫小鼠的脾单个核细胞分别与Sj97-P22、无关肽或PBS共培养,采用3H-TdR掺入法观察细胞增殖效果,并用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2、IFN-γ和IL-4的浓度。 结果 Sj97-P22免疫组小鼠脾脏CD4⁺ T细胞中胞内分泌IFN-γ的细胞百分率为（8.05±0.54）%,显著高于无关肽免疫组[（4.74±1.04）%]和PBS免疫组[（6.51±0.49）%] （P＜0.05）;而分泌IL-4的细胞百分率[（0.60±0.11）%]显著低于PBS免疫组[（1.31±0.27）%]（P＜0.05）,与无关肽免疫组[（0.84±0.08）%]间的差异则无统计学意义（P＞0.05）。Sj97-P22可明显刺激Sj97-P22免疫小鼠脾单个核细胞增殖,增殖指数达到3.12±1.59,细胞培养上清中IL-2和IFN-γ浓度分别为（9.13±1.54）和（39.75±9.69）pg/ml,与无关肽和PBS刺激相比显著升高（P＜0.05）,而IL-4浓度在3个刺激物间的差异无统计学意义（P＞0.05）。Sj97-P22不能刺激PBS免疫鼠脾单个核细胞增殖及培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-4浓度变化。 结论 Sj97-P22可能是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。     

蕲蛇蛇毒对胶原诱导性关节炎大鼠血管生成的影响

目的： 研究蕲蛇蛇毒对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠血管生成的影响及其机制。 方法： 采用牛Ⅱ型胶原（1 g·L^-1）诱导大鼠CIA模型。建模21 d后,实验分正常组、模型组、美洛昔康组（0.72 mg·kg^-1, ig）、蕲蛇蛇毒低、中、高剂量组（0.1, 0.33, 1 mg·kg^-1, ip）,每天1次,连续治疗21 d。采用HE染色对大鼠踝关节滑膜组织进行病理学评分,免疫组化法检测滑膜微血管密度和血管内皮细胞生长因子（VEGF）的蛋白表达,ELISA法检测血清中血管生成素1（Ang-1）的含量。 结果： 与正常组比较,模型组大鼠踝关节滑膜病理评分和微血管密度显著增加（P<0.01）,滑膜组织VEGF表达量及血清Ang-1含量亦显著增加（P<0.01）;与模型组比较,蕲蛇蛇毒中、高剂量能显著降低大鼠踝关节滑膜的病理评分（P<0.05,P<0.01）,蕲蛇蛇毒高剂量能明显降低滑膜微血管密度、VEGF表达和血清Ang-1含量（P<0.05或P<0.01）。 结论： 蛇毒能减轻CIA大鼠的关节病理损伤和血管新生,其机制可能与降低VEGF表达和减少Ang-1含量有关。     

日本血吸虫22.6kDa膜相关蛋白Th1型表位的免疫学鉴定

目的鉴定日本血吸虫22.6 kDa膜蛋白（Sj22.6）的Th1型表位,为构建短肽疫苗奠定基础。方法采用合成肽Sj22.6-P4、无关肽（对照）及PBS免疫C57BL/6小鼠2次（间隔7 d）,末次免疫后7～10 d取脾分离单个核细胞,用合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS刺激培养,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞的增殖效果,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其细胞培养上清中IFNγ-、IL-4及IL-2水平。运用流式细胞技术三色标记法检测经合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS免疫2次的C57BL/6小鼠脾淋巴细胞内的Th1、Th2细胞因子。结果合成肽Sj22.6-P4可刺激经该抗原肽免疫2次的C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖,与PBS组相比,增殖指数（SI）均〉2。与无关肽对照组相比,细胞培养上清中IL-2、IFN-γ分泌水平增高,其中IL-2分泌水平差异有统计学意义（P〈0.05）,IFN-γ差异无统计学意义（P〉0.05）,而IL-4分泌水平明显降低（P〈0.05）。合成肽Sj22.6-P4免疫组小鼠脾脏CD4＋T细胞中分泌IFN-γ细胞的百分比显著增高,分泌IL-4细胞的百分比显著降低（P均〈0.05）。结论合成肽Sj22.6-P4是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。     

传统文化在方剂学教学中的体现与运用

中医学根植于中国特定的历史文化背景中,其理论体系皆受到传统文化的影响.方剂学作为中医学的重要课程之一,强调方剂学授课教师应注重传统文化在教学体系和教学内容中的融合实践,例举周易、儒家、道家、兵家等传统文化在方剂名称及方剂学知识中的体现,以帮助学生对方剂知识的理解、串联和运用,并润物细无声地提升学生的人文素养.     

加减驻景方对大鼠脉络膜新生血管模型的干预研究

目的观察中药加减驻景方对实验性CNV的干预作用。方法通过659 nm氪激光诱导BN大鼠建立CNV动物模型。造模后大鼠被随机分为4组:模型组、中药组、西药组和联合组。模型组大鼠用生理盐水灌胃,中药组用加减驻景方灌胃治疗,西药组用玻璃体腔注射康柏西普治疗,联合组用玻璃体腔注射康柏西普和加减驻景方灌胃治疗。分别于光凝后7 d、14 d、21 d,进行FFA与ICGA检查。检查后每组处死6只大鼠制作病理学标本,通过HE染色观察CNV变化。结果 (1)CNV发生率:光凝后7 d、14 d、21 d,模型组与各治疗组CNV形成率均达70%以上,各组差异无统计学意义(P>0.05)。(2)FFA荧光素渗漏:模型组在光凝后14 d时最强,随后变化不明显,各治疗组FFA荧光素渗漏在光凝后7 d时最强,随后变化不明显,有荧光渗漏的光凝斑在ICGA呈充盈状态。光凝后7 d,中药组与模型组荧光素渗漏强度较高,西药组次之,联合组渗漏程度最轻,比较均有统计学意义(P<0.05)。14 d与21 d时,各治疗组荧光素渗漏强度均弱于模型组,治疗组中,中药组渗漏强度最强,西药组次之,联合组渗漏强度最弱,比较...     

白藜芦醇对鼠纤维肉瘤S180细胞周期影响及其机制研究

目的:研究白藜芦醇对鼠纤维肉瘤S180细胞的抗肿瘤作用,并探讨其分子机制.方法:用MTT法检测白藜芦醇对鼠纤维肉瘤细胞系S180增殖的影响;PI单标流式细胞术检测白藜芦醇对S180细胞周期分布的影响;Western blot方法检测白藜芦醇对S180细胞 cyclinD1,P21Cip1蛋白表达的影响.结果:白藜芦醇对S180细胞增殖呈双相作用:低浓度促进细胞增殖;高浓度抑制细胞增殖,其抑制作用呈时效和量效关系.白藜芦醇治疗组S180细胞周期发生变化,细胞周期被阻滞于 G0/G1期.白藜芦醇以时间依赖方式下调周期蛋白 cyclinD1 的表达.上调白藜芦醇P21Cip1蛋白表达.结论:白藜芦醇低浓度促进S180细胞增殖,高浓度抑制细胞增殖.白藜芦醇可通过凋节细胞周期蛋白 cyclinD1,p21Cip1的表达调控细胞周期进程,抑制细胞增殖.     

脱氢表雄酮对细胞免疫调节作用的研究进展

脱氢表雄酮及其硫化物作为性激素的前体,有着众多免疫学效应。近年来,越来越多的研究致力探讨脱氢表雄酮及其硫化物在免疫系统中的生理学作用,并进一步研究其效应的分子机制。相比于体液免疫应答,脱氢表雄酮及其硫化物对细胞免疫应答的调节作用更为关键。因此,本文重点综述脱氢表雄酮及其硫化物对细胞免疫调节作用的研究进展。     

正交试验设计优选杜虹花止血有效成分毛蕊花糖苷的提取工艺研究

目的:筛选杜虹花毛蕊花糖苷成分的最佳提取工艺条件。方法:采用正交试验设计,以乙醇浓度、料液比、提取次数和提取时间为考察因素,以毛蕊花糖苷含量为评价指标,确定其最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为:加60%乙醇,液料比为1∶25,加热回流提取1次,每次1 h,毛蕊花糖苷含量≥7.05 mg/g。结论:该工艺操作简便,稳定可行,重复性好,可为杜虹花止血有效成分毛蕊花糖苷的提取和开发提供参考。     

肝星状细胞活化的炎性调控机制及中药抗纤维化研究进展

肝纤维化是细胞外基质的过度沉积为主要特征的损伤后修复反应,包括炎症及其后的纤维生成。肝星状细胞（HSC）的激活是肝纤维化发生的中心环节,而肝脏中多种炎性细胞与炎症相关因子是调节HSC激活及其后的纤维化发生发展的关键因素,涉及的分子机制亦十分复杂。中医药抗纤维化的研究从20世纪70年代中期开始,随着细胞生物学与分子生物学技术的应用,中医药抗纤维化机制的阐明也越来越深入。