生育酚结合蛋白对氧化应激所致前列腺癌细胞凋亡的调控作用

目的 观察生育酚结合蛋白(TAP)对氧化应激所致前列腺癌细胞凋亡的调控作用.方法 脂质体法分别转染pEGFP-N3-TAP质粒及空载体质粒进入前列腺癌细胞PC-3.以过氧化氢(H2O2)刺激PC-3细胞构建氧化应激模型,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测TAP的表达,流式细胞技术检测各组细胞的凋亡.结果转染TAP后的PC-3细胞中TAP表达量明显升高.RT-PCR结果显示,H2O2单独或联合促氧化剂丁胱亚磺酰亚胺(BSO)刺激细胞后TAP的mRNA表达量分别为(2.457±0.113)、(3.643±0.162)较对照组(0.721±0.048)显著上升,差异有统计学意义(P<0.01);在无H2O2刺激的对照组PC-3、PC-3-vector、PC-3-TAP细胞的凋亡率分别为2.42%、3.69%、15.37%;在H2O2刺激下,各组凋亡率分别为7.56%、16.71%、43.93%;联合应用BSO与H2O2,各组凋亡分别为13.73%、26.36%、49.19%.结论 TAP基因可参与前列腺癌细胞对氧化应激的应答反应,并促进氧化应激所致的前列腺癌细胞凋亡.     

微小RNA-23a调节前列腺癌细胞骨架蛋白的分子机制

目的 探讨微小RNA-23a(miR-23a)影响前列腺癌细胞骨架迁移及侵袭行为的分子机制.方法 PC-3前列腺癌细胞转染siPAK6、miR-23a模拟物,48 h后以共聚焦显微镜观察细胞骨架的改变;Western blot法检测LIMK1、磷酸化LIMK1( p-LIMK1)、丝切蛋白(cofilin)和磷酸化丝切蛋白(p-eofilin)蛋白的表达.结果 转染siPAK6组及miRNA-23a组PC-3细胞骨架的应力纤维均明显减少,肌动蛋白形态皱缩.Western blot检测显示转染siPAK6组的p-LIMK1、p-cofilin的表达分别下降75％、80％(P＜0.01),而LIMK1、cofilin表达量无明显变化(P＞0.05);转染miRNA-23a组的p-LIMK1、p-cofilin的表达分别下降60％、70％ (P ＜0.01),LIMK1、cofilin的表达量无明显变化(P＞0.05).结论 miR-23a可通过p21活化激酶6(PAK6)-LIMKl-cofilin信号通路,影响前列腺癌细胞骨架的重构,抑制癌细胞迁移及侵袭能力.     

上尿路结石所致急性梗阻性肾功能不全的微创手术治疗

目的 探讨微创手术治疗上尿路结石致急性梗阻性肾功能不全、肾积脓感染的临床效果.方法 回顾性分析2009年5月至2012年9月收治的30例上尿路结石所致的急性上尿路梗阻性肾功能不全患者.30例均合并肾积脓感染,其中予以急诊行输尿管镜下逆行插管引流21例,经皮肾穿刺造瘘9例,配合全身应用三代头孢抗生素治疗.术前及术后记录生命体征及尿量变化,检查血像及肾功能等指标.结果 全部输尿管逆行插管引流术和经皮肾造瘘术均顺利完成,所有患者均成功解除了尿路梗阻,无邻近脏器损伤或大出血、败血症等严重并发症.术后生命体征改善,急诊解除梗阻后血尿素氮(BUN)由(23.2±3.8) mmol/L降至(5.6 ±2.2) mmol/L、血清肌酐(Scr)由(472.3± 142.5) μmol/L降至(54.8±22.3)μmol/L,尿量明显增加,肾功能改善,手术前后比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 上尿路结石引起肾功能不全合并肾感染积脓的处理原则是早期解除梗阻,联合全身抗感染治疗.输尿管插管引流术与经皮肾造瘘术均是有效的微创治疗方法.     

单孔腹腔镜下无功能肾切除术的应用体会

腹腔镜下肾切除手术已成为临床治疗无功能性萎缩肾的常用术式[1]。单孔腹腔镜手术(laparoendoscopic single-site surgery,LESS)是最近应用于临床的新术式,传统腹腔镜肾切除术需要3～5个戳口,但LESS通过自然腔道或仅需单一的体表切口进行操作,减少了患者的伤口数,皮肤美容效果较佳[2-3],受到部分有美容需求患者的欢迎和选择。本组近期应用LESS开展无功能     

评价新辅助化疗用于局部晚期宫颈癌手术治疗前的临床价值

目的 评价新辅助化疗用于局部晚期宫颈癌手术治疗前的临床价值.方法 网上检索MEDLINE、PUBMED、ELSEVIER ScienceDirect、CNKI等,获取全文.筛选文献,实验组是新辅助化疗联合手术,对照组是直接手术,提取用于评价的指标包括：淋巴结转移、脉管浸润、间质浸润、切缘阳性率、3年生存率（OS）、3年无瘤生存率（DFS）、5年生存率、5年无瘤生存率,并进行Meta分析.结果 新辅助化疗组与对照组相比,淋巴结转移的HR和95%CI分别为（0.54,0.33～0.86）,间质浸润的分别为（0.45,0.24～0.86）,脉管浸润的分别为（0.25,0.16～0.38）,差异均有统计学意义（P〈0.05）;切缘阳性率的HR和95%CI分别为（0.45,0.21～0.99）,3年OS分别为（1.24,0.59～2.63）,3年DFS分别为（1.34,0.65～2.78）,5年OS分别为（0.94,0.54～1.64）,5年DFS分别为（0.99,0.71～1.93）,差异均无统计学意义（P〉0.05）.结论 局部晚期宫颈癌,新辅助化疗能减少预后不良相关病理因素,但不能改善患者的生存率.     

细胞因子IL-2、INF-α、INF-γ对膀胱癌细胞株PD-L1表达的影响

目的 探讨细胞因子IL-2、INF-α、INF-γ对膀胱癌细胞株T24、5637、BIU-87中PDL1表达的影响.方法 采用免疫组化染色法检测膀胱癌细胞株T24、5637、BIU-87及永生化膀胱上皮细胞组SV-HUC-1中PD-L1的表达.采用半定量RT-PCR和Western blot法检测细胞因子IL-2、IFN-α和IFN-γ刺激下T24、5637、BIU-87及SV-HUC-1细胞PD-L1 mRNA和蛋白水平变化.结果 T24、5637、BIU-87细胞PD-L1表达阳性,SV-HUC-1细胞中PD-L1表达阴性;IFN-α、IL-2和IFN-γ均可上调T24、5637、BIU-87细胞PD-L1 mRNA和蛋白的表达,但对SV-HUC-1细胞作用不明显(P＜0.05).结论 细胞因子IL-2、IFN-α和IFN-γ可上调T24、5637、BIU-87细胞PD-L1 mRNA和蛋白的表达水平,但对SVHUC-1细胞作用不明显.     

美满霉素治疗非淋菌性尿道炎及前列腺炎的应用评价

目的探讨美满霉素治疗非淋菌性尿道炎与前列腺炎的临床疗效。方法尿道炎和前列腺炎患者各60例,各随机分配为研究组和对照组。其中研究组尿道炎30例,前列腺炎30例,以美满霉素胶囊口服治疗10d;对照组尿道炎30例,前列腺炎30例,以环丙沙星片剂口服治疗10d。停药2周后,复诊观察临床症状改变情况及检测病原体,并进行统计学分析。结果研究组的病原菌清除率为83.3%,明显高于对照组53.3%（P〈0.01）;研究组尿道炎和前列腺炎的总有效率分别为96.7%和90.0%,明显高于对照组的56.7%和53.3%（P〈0.01）。大部分患者无明显副作用。结论美满霉素胶囊治疗非淋菌性尿道炎及前列腺炎有较满意的疗效,副作用较小。     

微小RNA-23a-p21活化激酶6通路对前列腺癌细胞迁移与侵袭能力的影响

目的 探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与前列腺癌侵袭及迁移的关系.方法 生物信息学预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Western blot 法及实时定量逆转录-聚合酶链反应( Real-time PCR)检测PC-3细胞PAK6的表达,荧光素报告酶实验检测预测miRNA对PAK6的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 生物信息学预测miRNA-23a可能是调控PAK6的靶miRNA. Western blot检测转染miRNA-23a组PAK6表达量下降79％,而转染miRNA-23a抑制剂组PAK6表达量上升40％,差异均有统计学意义(P＜0.05).荧光素报告酶实验结果显示,转染miRNA-23a后野生型PAK6组荧光素酶活性下降32％,而突变组差异无统计学意义(P＞0.05).Real-time PCR检测3组PAK6 mRNA的表达,差异无统计学意义(P＞0.05).体外迁移及侵袭实验示,转染miRNA-23a组迁移细胞数减少57％,侵袭的细胞数减少91％.结论 微小RNA-23a通过下调靶蛋白PAK6的表达从而引起前列腺癌迁移及侵袭能力下降.     

前列腺癌miRNA表达谱及miR-96在氧化应激信号通路中的作用

【目的】 检测miRNA在前列腺癌与正常前列腺组织的表达差异,并探讨表达异常的miRNA在前列腺癌发病中的作用?【方法】 前列腺癌和正常前列腺组织样品(100 mg),Trizol法提取RNA,应用聚合酶链反应(PCR)芯片检测miRNA的表达;同时以250 μmol/L的过氧化氢(H2O2)刺激前列腺癌PC-3细胞4 h,继续正常培养12 h?检测不同时间点细胞内活性氧(ROS)水平,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-96在各组细胞中的表达?【结果】 与正常前列腺组织相比,前列腺癌组织中miR-144?miR-216a上调5.9倍,miR-96上调30.4倍,miR-488?miR-873下调到4.9%,差异有统计学意义(P < 0.05)?PC-3细胞内ROS为RWPE-1细胞的5.2倍(P < 0.05),miR-96在PC-3细胞中的表达为RWPE-1细胞的15.4倍(P < 0.05)?H2O2刺激PC-3细胞1?4 h后,胞内ROS为对照组的4.3?6.4倍(P均 < 0.05),miR-96表达水平为对照组的10.2?18.9倍(P均 < 0.05);10?16 h组胞内ROS为对照组的2.5倍?1.2倍,miR-96表达水平为对照组的2.7?1.9倍(P均 > 0.05)?【结论】 在前列腺癌组织中发现了若干有表达差异的miRNA;miR-96参与前列腺癌细胞的氧化应激信号途径,可能是防治前列腺癌的重要分子靶点?