TWIST1基因敲低对DFOG抑制OVCAR3源性球细胞自我更新和FoxM1表达的影响

目的:探讨7-二氟甲氧基-5,4'-二-正辛烷氧基金雀异黄素通过下调Twist1/FoxM1表达抑制OVCAR3源性球细胞自我更新作用分子机制.方法:表达TWIST1 shRNA腺病毒感染OVCAR3源性球细胞敲低TWIST1基因表达.肿瘤球形成试验检查细胞自我更新能力.蛋白质印迹法检测细胞Twist1和FoxM1蛋白表达水平.结果:与OVCAR3细胞比较,OVCAR3源性球细胞具有更强自我更新能力以及高水平表达Twist1和FoxM1蛋白.TWIST1 shRNA有效抑制OVCAR3源性球细胞肿瘤球形成和下调Twist1和FoxM1蛋白表达.TWIST1 shRNA协作DFOG(5μM)抑制OVCAR3源性球细胞肿瘤球形成和Twist1和FoxM1蛋白表达.结论:DFOG可能通过调控Twist1表达抑制FoxM1表达,进而抑制OVCAR3源性球细胞自我更新.     

芹菜素对NCI-H446细胞系球细胞自我更新和uPAR表达的影响

目的：研究芹菜素对人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞自我更新的影响及机制。方法：采用干细胞条件培养基超低黏附板悬浮培养法从体外培养NCI-H446细胞系得到球细胞。测定球形成率用以评价0(0.1% DMSO对照组),5.0,10.0,20.0 μmol/L芹菜素对NCI-H446细胞系球细胞自我更新的抑制作用;Western印迹分析球细胞尿激酶型纤维蛋白酶原激活物受体(urokinase-type plasminogen activator receptor,uPAR)的表达。结果：0,5.0,10.0,20.0 μmol/L 芹菜素呈剂量依赖性抑制NCI-H446细胞系第2代球细胞的球形成率[球形成率分别为(18.2±1.9)%,(13.6±1.7)%,(10.6±1.6),(6.9±1.3)%],并呈浓度依赖性下调uPAR蛋白的表达(P<0.05)。结论：芹菜素抑制人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞自我更新作用,可能与下调uPAR表达相关。     

白介素-8对SKOV3细胞系卵巢癌干样细胞特性的影响

目的:研究白介素-8(IL-8)能否促成人卵巢癌SKOV3细胞系细胞肿瘤干细胞样细胞特性.方法:用添加或未添加重组人IL-8(rhIL-8:10.0 ng/mL)的干细胞条件培养基处理SKOV3细胞.肿瘤球形成和琼脂集落形成试验测定球形成率和集落形成率.蛋白质印迹分析肿瘤干细胞标志蛋白CD133和CD44表达水平.结果:rhIL-8(10.0 ng/mL)显著地增高SKOV3细胞肿瘤球形成率和琼脂集落形成率.此外,rhIL-8(10.0 ng/mL)上调SKOV3细胞CD133和CD44蛋白表达.结论:rhIL-8具有促进SKOV3细胞肿瘤干细胞样细胞特性作用.     

miR-519d/Twist1轴介导BrMC抑制SMMC-7721源性肝癌干样细胞体外致癌能力北大核心CSCD

目的探讨8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)是否通过上调miR-519d,下调Twist1表达,进而抑制SMMC-7721源性肝癌干样细胞(liver cancer stem cell-like cells,LCSLCs)体外致癌能力。方法用球培养法从SMMC-7721细胞系得到第2代球细胞,命名为LCSLCs。不同浓度BrMC(1.0、3.0、10.0μmol·L^(-1))处理LCSLCs,实时定量PCR检测miR-519d表达水平;球形成和琼脂集落形成实验评价体外致癌能力;荧光素酶报告基因实验和Western blot分析Twist1转录活性和蛋白表达;miR-519d模拟物或Twist1基因转导探讨BrMC作用的分子机制。结果与SMMC-7721细胞比较,LCSLCs的miR-519d低表达,而Twist1蛋白高表达。BrMC(1.0、3.0、10.0μmol·L^(-1))浓度依赖性降低LCSLCs球形成和琼脂集落形成率;并上调miR-519d表达、下调Twist1蛋白表达。荧光素酶报告基因实验证实,miR-519d可以直接靶向Twist1 mRNA 3'非翻译区,并调节蛋白表达。miR-519d模拟物增强BrMC(3.0μmol·L^(-1))的作用,然而,Twist1基因转导有效逆转BrMC(3.0μmol·L^(-1))的效应。结论 BrMC通过调节miR-519d/Twist1信号轴,抑制SMMC-7721源性LCSLCs体外致癌能力。     

经导管主动脉瓣置入术后新发左束支传导阻滞危险因素分析及对左心室功能的影响

目的:探讨经导管主动脉瓣置入术(TAVI)患者新发左束支传导阻滞(new-LBBB)的危险因素及其对左心室功能的影响。方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院2019年8月-2020年8月行TAVI的58例重度主动脉瓣狭窄患者资料。根据术后有无持续性new-LBBB,分为new-LBBB组(15例)和对照组(43例)。分析2组患者术前、术中临床资料及术前、术后超声心动图结果的差异。结果:new-LBBB组术前基础QRS波时限、术中置入人工瓣膜尺寸大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);术后1年new-LBBB组左心室射血分数(LVEF)低于对照组,左心室舒张末期直径(LVEDD)高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:基础QRS波时限、人工瓣膜尺寸是TAVI后new-LBBB的独立危险因素;TAVI后new-LBBB可能影响患者的LVEF和左心室结构。     

芹菜素对肝细胞癌SMMC-7721细胞系干样细胞自我更新及CK2α表达的影响

目的:研究芹菜素是否能下调CK2α表达和抑制SMMC-7721细胞系肝癌干样细胞自我更新.方法:干细胞培养基超低粘附培养板悬浮培养法扩增肝癌干样细胞;肿瘤球形成法检测肝癌干样细胞的自我更新能力;Western-blot检测细胞CK2α蛋白表达水平.结果:人肝细胞癌SMMC-7721细胞系第2代球细胞具有最强自我更新潜能,可用作肝癌干样细胞模型.芹菜素以浓度依赖方式降低肝癌干样细胞的肿瘤球形成率以及CK2α蛋白表达水平.结论:芹菜素抑制肝癌干样细胞自我更新作用与其下调CK2α表达相关.     

DFOG对卵巢癌OVCAR3源性球细胞迁移和Twist1/FoxM1表达的影响

目的 :检查金雀异黄素(genistein,GEN)及其新型合成类似物7-二氟甲氧基-5,4'-二-正辛烷氧基金雀异黄素(7-difluoromethoxyl-5,4'-di-n-octyl genistein,DFOG)对人卵巢癌OVCAR3源性球细胞迁移和Twist1/FoxM1蛋白表达的作用.方法 :Transwell小室细胞迁移试验检测细胞迁移率.蛋白质印迹分析细胞Twist1和FoxM1蛋白表达水平.结果 :与OVCAR3细胞相比,OVCAR3源性球细胞迁移率更高.GEN(40μM)或DFOG(5μM和10μM)抑制OVCAR3源性球细胞迁移.此外,GEN(40μM)或DFOG(5μM和10μM)平行地下调Twist1和FoxM1蛋白表达.结论 :GEN及其类似物DFOG抑制OVCAR3源性球细胞体外迁移与其抑制Twist1和FoxM1蛋白表达相关.