不同方法学检测急性髓系白血病 MPO阳性率的比较及意义

目的 比较免疫组化、细胞化学及流式细胞学3种方法检测急性髓系白血病(AML)胞内MPO阳性率的差异及临床意义。 方法 对90例AML患者同时进行骨髓活检组织免疫组织化学染色,细胞涂片细胞化学染色及骨髓流式细胞学分析,检测MPO表达情况。结果 3种方法联合检测,AML患者MPO总阳性率为95.5%,其中免疫组织化学、细胞化学及流式细胞学方法检测MPO阳性率分别为66.7%、93.3%及87.8%,以免疫组化方法检测MPO敏感度最低,明显低于细胞化学和流式细胞学检测方法(P均＜0.05),而细胞化学与流式细胞学法比较,MPO表达率差异无统计学意义(P＞0.05);AML患者中,除M7外,以M5患者MPO阳性率最低(88.9%),其中免疫组织化学法MPO的检出率最低(37.0%),明显低于细胞化学法(88.9％,P＜0.05),但与流式细胞学方法比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 细胞化学及流式细胞术检测AML患者MPO表达的阳性率优于活检组织的免疫组化法,三者结合比单独一种更有利于AML与急性淋巴细胞白血病的鉴别诊断。     

冠心病合并2型糖尿病患者的小凹蛋白-1表达的变化及其意义

目的探讨小凹蛋白-1（Cav-1）在冠心病（CAD）合并2型糖尿病（T2DM）患者中的表达及其意义。方法选择148例经冠状动脉造影及临床证实的CAD患者,其中合并T2DM患者94例,单纯CAD54例,另选取无冠状动脉病变及糖尿病16例为对照组。用流式细胞技术检测各组外周血单核细胞Cav-1的表达水平,全自动生化分析仪测定高敏C反应蛋白（hs-CRP）及空腹血糖（FBG）。结果 CAD合并T2DM患者外周血单核细胞Cav-1表达水平显著低于对照组及单纯CAD组,差异有统计学意义（P〈0.01,〈0.05）;CAD合并T2DM组血清hs-CRP的水平显著高于单纯CAD组及对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。单核细胞Cav-1的表达水平与hs-CRP及空腹血糖呈负相关（r=-0.47、-0.31,均P〈0.01）。多元Logistic回归分析显示CAD合并T2DM与Cav-1及FBG密切相关（OR=0.97、3.44,均P〈0.05）。结论 Cav-1表达低下是发生CAD合并T2DM的一个危险因素,并在一定程度上可预测CAD合并T2DM的发生。     

出血热肾病综合征患者淋巴细胞亚群动态变化

目的探讨出血热肾病综合征(HFRS)患者淋巴细胞亚群百分比动态变化的意义。方法应用流式细胞仪检测42例HFRS患者的79份外周血标本淋巴细胞亚群百分比。结果在HFRS各病期中,T淋巴细胞(CD3+)、CD3+CD4+淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+比值在发热期开始减低,低血压少尿期降至最低(P<0.05);CD3+CD8+淋巴细胞、B淋巴细胞(CD3-CD19+)百分比在发热期开始升高(P<0.01)。结论HFRS患者各病期淋巴细胞亚群比例严重失衡,动态检测淋巴细胞亚群有助于疾病的分期、治疗和预后判断。     

急性淋巴细胞白血病流式细胞术免疫分型中抗原异常表达的意义

目的研究急性淋巴细胞白血病免疫分型中抗原的异常表达.方法用多参数流式细胞仪对76例初诊的急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者进行免疫分型.结果76例ALL中B系ALL70例占92.1%,T-ALL占6例.70例B系ALL中CD45-或CD45±表达占75.5%,显示该白血病细胞具有异质性;CD38弱表达占60%,CD10强表达占40%;B系ALL表达髓系抗原以CD33最高达25.7%,CD13次之达24.2%,CD15和CD11b较少见,分别占5.7%和1.4%.结论急性淋巴细胞白血病流式细胞术免疫分型中抗原异常表达,不但在初诊时有助于白血病克隆的识别、门的设定、白血病细胞数的定量,而且能在形态学缓解后作MRD检测,为白血病复发监测提供重要手段.     

原因不明复发性流产病理妊娠患者外周血CD4+CD25+Treg、Foxp3mRNA的表达

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)病理妊娠患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达。方法采用流式细胞术测外周血CD4+CD25+Treg,半定量、实时荧光定量PCR分析外周血单个核细胞Foxp3转录水平;检测70例原因不明复发性流产史妇女(URSA未孕组)、20例病理妊娠妇女(URSA病理妊娠组)、22例正常妊娠妇女组(正常妊娠组)、20例正常非孕妇女组(对照组)外周血中CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA的表达情况。采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-10(IL-10)水平。结果 URSA未孕组外周血CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA、IL-10比例明显低于正常非孕妇女组,两组比较,差异均有统计学意义(t分别=3.61、4.18、2.71,P均<0.05);URSA病理妊娠组外周血中CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA、IL-10低于正常妊娠妇女组,两组比较,差异均有统计学意义(t分别=3.79、12.56、4.42,P均<0.05)。结论外周血CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA和IL-10表达水平降低可能与URSA病理妊娠患者的发病有关。     

急性白血病流式细胞术免疫分型中系相关抗体的敏感性和特异性分析

为了评估急性白血病流式细胞术免疫分型中系相关抗体的敏感性和特异性，参考St Jude研究医院的急性白血病免疫分型方案对184例急性白血病患者进行流式细胞术免疫分型。结果表明：AML系相关抗体CD13和CD33的敏感性较高(95.5％和91．2％)，特异性不足(72．5％和62．2％)；MPO敏感性低(69．1％)，特异性高(100％)；CD117敏感性、特异性都高(88．2％和100％)。CD14、CD15敏感性低(18．4％和27．2％)，CD14对单核细胞特异性高。B细胞系ALL系相关抗体CD19具有高敏感性(100％)，而特异性(83．4％)差；CD79a、CD22(CyCD22)敏感性(96．4％和100％)和特异性(100％和100％)都高；CD10和CD20的敏感性(53．6％和70．4％)、特异性(82．5％和87．5％)均低。T—ALL系列相关抗体CD3(CyCD3)高特异性(97．5％)，而敏感性(80．0％)欠佳；CD7敏感性高(100％)，特异性低(77．9％)；CD5、CD2、CD1a敏感性、特异性均不理想。结论：184例急性白血病系相关抗体的敏感性和特异性分析与St Jude免疫分型方案基本一致，只是在确定AML时CD117似乎优于MPO；确定B细胞系ALL时CD22和CD79a具有相似的敏感性和特异性，所以可以任选一个。     

颈动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4＋CD28null淋巴细胞的表达及意义

目的探讨颈动脉粥样硬化（CA）性脑梗死患者外周血CD4＋CD28null淋巴细胞表达的意义。方法采用流式细胞仪检测66例CA性脑梗死,39例颈动脉正常脑梗死患者,32例健康人外周血CD4＋CD28null淋巴细胞数量。用B超检查以上人群颈动脉血管内壁粥样硬化情况。结果脑梗死患者CD4＋CD28null细胞明显高于对照组：脑梗死组中CA性脑梗死高于颈动脉正常脑梗死组;CA性脑梗死组中,颈动脉不稳定斑块组显著高于颈动脉稳定斑块组和颈动脉IMT增厚组。CA性脑梗死患者的CD4＋CD28null细胞表达CD57和CD158h,其中以颈动脉不稳定斑块组表达最高。CD4＋CD28null细胞随着脑梗死区体积增大表达增强。结论CA性脑梗死患者CD4＋CD28null细胞显著增加,可能与颈动脉粥样硬化斑块的形成及进展有关。     

头颈部鳞状细胞癌DNA含量与临床生物学行为的关系

目的：研究头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）DNA倍体的变化与临床生物学行为的关系。方法：选择40例未经治疗的HNSCC患术后新鲜肿瘤标本，采用流式细胞仪（FCM）测定DNA含量的3个主要参数，异倍体（aneuploid),DNA指数（DNA Index,DI)和S期细胞比例（S－phase fraction,SPF)，探索3个参数与肿瘤组织学分级，临床分期以及淋巴结转移之间的关系。结果：40例未经治疗的HNSCC中，异倍体检出率为62．5％（25／40）。DI与淋巴结转移无关，与肿瘤组织学分级和肿瘤临床分期有关（P＜0．01）。SPF与肿瘤组织分级无关，与临床分期及淋巴结转移有关（P＜0．01）。结论：DNA异倍体是HNSCC的重要特征之一；DI和SPF可作为预测头颈部鳞状细胞癌生物学特性的重要指标。     

抑制PI3K通路增强CAHB对Jurkat细胞的凋亡作用

目的 探讨CAHB单独使用及与LY294002联合应用对Jurkat细胞体外作用的影响.方法 分别用不同剂量的CAHB(0、5、10、20、40mmol/L)诱导Jurkat细胞,用MTS法检测Jurkat细胞的增殖抑制效应,流式细胞术分析Jurkat细胞凋亡情况;取40mmol/L浓度的CAHB加入PI₃K抑制剂LY294002,流式细胞术分析Jurkat细胞凋亡情况.结果 CAHB对Jurkat细胞生长有显著的抑制作用,并能显著诱导Jurkat细胞发生凋亡,其作用呈明显剂量、时间依赖性.PI₃K抑制剂LY294002能显著增强CAHB对Jurkat细胞的凋亡作用.结论 CAHB能抑制Jurkat细胞增殖,并诱导其凋亡.抑制PI₃K通路能增强CAHB对Jurkat细胞的凋亡作用.     

多参数流式细胞术鉴别诊断单核细胞相关性白血病的意义

目的：用多参数流式细胞术（FCM）鉴别诊断单核细胞相关性白血病（MLIL）。方法：采用CD45／SSC散点图设门多参数流式细胞术分析179例白血病细胞CD14及其它相关抗原的表达情况。结果：CD14在179例白血病中的表达，AML25．6％（30／117），CML5．9％（1／17）。CMML100％（3／3）；ALL、CLL、AUL、BAL CD14都阴性。117例AML中，AML-M4 CD14阳性占75．0％（15／20），AML-M5a 22．2％（2／9），AML-M5b 92．9％（13／14）。CD14在AML-M4／M5的阳性率无明显差异（P=0．486），而AML-M5a／M5b中有显著性差异（P〈0．001）。AML-M0、M1、M2、M6、M7中CD14全部阴性。在AML组中CD14的表达与CD117、CD34呈负相关。与CD64、HLA-DR、CD4、CD36、CD15、CD11b呈正相关。在CD45／SSC、CD71／CD33、CD15／CD11b散点图中M4／M5的粒细胞和单核细胞克隆位点明显不同。结论：CD14对单核细胞相关性白血病具有高特异性，敏感性不足；联合其它抗体不但可以区别单核细胞相关性白血病，而且可以鉴别AML-M4／M5亚型；CD45／SSC、CD71／CD33、CD15／CD11b三幅散点图有助于鉴别粒细胞和单核细胞克隆。