青藤碱对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞IL-8表达的影响

目的探讨青藤碱对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞表达IL-8的影响。方法用不同浓度的青藤碱(25、50、100μmol/L)预处理24 h后,再加入1μg/ml的脂多糖(LPS)处理人牙龈成纤维细胞。采用RT-PCR、ELISA法检测青藤碱对脂多糖诱导细胞表达IL-8的影响;用Western blot法检测青藤碱对NF-κB核转位及IκBα降解的影响。加入NF-κB抑制剂Bay11-7085 10μmol/L、TPCK 20μmol/L预处理细胞24 h后,再用LPS刺激细胞4 h,采用ELISA法检测NF-κB抑制剂对脂多糖诱导的IL-8表达的影响。结果青藤碱剂量依赖性地抑制脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞中IL-8 mRNA及蛋白表达(P<0.05);与脂多糖组比较,青藤碱基本上把NF-κB阻滞在细胞质中,而细胞经脂多糖处理1 h后,大部分NF-κB被转运到细胞核中,经100μmol/L青藤碱预处理细胞的细胞质中NF-κB含量为脂多糖组的2倍;脂多糖处理细胞1 h后,50%的IκBα降解,但经青藤碱预处理细胞后,呈浓度依赖性抑制脂多糖诱导IκBα的降解(P<0.05)。50μmol/L的青藤碱使脂多糖诱导IκBα的降解恢复到正常水平;脂多糖处理组IL-8表达量为对照组的2.4倍,但加入NF-κB抑制剂Bay11-7085(10μmol/L)、TPCK(20μmol/L)后IL-8蛋白的表达量分别下降为对照组的1.8倍和1.6倍。结论青滕碱可能通过阻断NF-κB的核转位以及IκBα的降解来抑制牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞IL-8的合成。