在人二倍体细胞上分离和适应的甲型肝炎病毒株

应用人二倍体细胞ＫＭＢ＿（１７）株，从甲型肝炎患者粪便中直接分离到３株甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）。３株ＨＡＶ在ＫＭＢ＿（１７）细胞上已稳定地传代１０次，其抗原滴度可达５１２，感染滴度为７．０～７．７５１ｏｇＴＣＩＤ＿（５０）／ｍ１。用直接免疫荧光法在感染细胞胞浆内检测到特异性荧光着染颗粒，免疫电镜可见成堆２７～３０ｎｍ空心和实心混杂的病毒颗粒，中和试验结果表明抗－ＨＡＶ血清可完全中和这些病毒。证明分离的３株病毒均属ＨＡＶ，可作进一步研究应用。     

甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)的残余毒力及其返祖可能性的研究

甲型肝炎是我国广泛流行的急性传染病。我所与浙江省医科院合作,于1992年研制成功H2株甲肝减毒活疫苗,该疫苗是我国首创,国际领先。疫苗推广使用以来,全国甲肝发病率有了明显下降,取得了显著的社会效益及经济效益。疫苗病毒的毒力返祖可能性是活疫苗全面推广应用中极为关键的问题,本课题对此进行了深入研究,取得了富有理论及实用价值的结果。     

甲型肝炎减毒活疫苗免疫小鼠后的体液和细胞免疫应答

减毒活疫苗进入体内在增殖的过程中，可以刺激T淋巴细胞分化，产生细胞免疫；使用甲型肝炎减毒活疫苗后发现，诱发的抗体阳转率往往低于疫苗保护率，推测疫苗引起的抗体应答是疫苗保护机制的一部分，而另外重要的一部分应该是细胞免疫。本研究拟在检测抗体反应的同时，观察疫苗免疫后T淋巴细胞免疫应答，探讨接种甲型肝炎减毒活疫苗后产生免疫保护的机制。     

甲型肝炎灭活疫苗(L-8株)口服及腹腔注射Bal b/c小鼠的免疫反应评价

目的　比较评价甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗(L 8株)不同途径接种Balb/c小鼠所诱导产生的免疫效应。方法将32 0EU/0 5ml的实验疫苗1次口服及腹腔注射免疫实验动物,于2周、4周时收集血液样本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测抗体反应,同时动态检测免疫小鼠外周血T淋巴细胞亚群及肿瘤坏死因子(TNF) α、干扰素(IFN) γ。结果　不论是腹腔注射或是口服免疫均能诱导产生良好有效的体液免疫效应。腹腔免疫后CD+ 4 T细胞百分比轻微下降,而CD+ 8T细胞百分比上升趋势及幅度明显,CD+ 4 /CD+ 8比值明显下降;而口服免疫小鼠外周血CD+ 4 T细胞百分比持续上升,CD+ 8T细胞百分比亦同步升高,两者上升幅度基本一致,CD+ 4 /CD+ 8比值无明显改变。另外,两种途径免疫接种均可诱导产生高滴度的内源性IFN γ。结论　有必要对甲肝灭活疫苗口服免疫的机制及其开发利用作进一步的研究。     

甲型肝炎减毒活疫苗（H2株）的猴体保护试验

采用恒河猴进行甲型肝炎(简称甲肝)活病毒减毒株(H2株)即活疫苗株的保护试验．当疫苗组(5只猴)于接种5个月后已产生效价为1：10～1：20抗甲肝抗体时，与对照组(6只猴)同时接受甲肝病毒强毒株“合32”的攻击，结果发现对照组动物在1～7周均产生效价为1：20～1：1280的抗体。并出现丙氨酸转氨酶(全部动物)和乳酸脱氨酶同功酶(5／6动物)的异常升高；而疫苗组除抗体水平稿有上升外，并没有上述两种酶的异常升高。这说明活疫苗株(H2株)具有良好的免疫原性和弱毒性质，可保护猴体耐受甲肝病毒强毒株“合-32”的攻击，并且还髓明恒河猴可作为甲肝病毒动物模型的可靠性。     

2种口服甲型肝炎疫苗免疫应答效果评价

目的 研究甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫效果。方法 将甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫Balb／c小鼠，并检测免疫后抗甲型肝炎总抗体、IgA和sIgA，外周血淋巴细胞亚群，脾淋巴细胞增殖反应和细胞因子干扰素-γ（IFN-γ），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素2（IL-2）水平。结果 2种疫苗口服免疫后均能诱导体液、细胞和局部免疫应答；但含铝佐剂的甲型肝炎灭活疫苗口服免疫，诱导抗体水平较低，但可诱导较好的细胞免疫应答。结论 口服免疫可以作为甲型肝炎疫苗有效的免疫途径之一。     

昆明市儿童甲型肝炎抗体水平分析

甲型肝炎是病毒性肝炎中最常见的一种急性传染病,其感染率高,易引起流行,多发于儿童及青少年人群。甲型肝炎的发病与生活质量密切相关。近年来,随着经济的发展,国民卫生条件改善及生活习惯的改变,使城市和经济发达的地区发病率有所下降,免疫屏障也可能降低。因此,在新的环境条件下,了解儿童甲型肝炎抗体水平及其消长状况,以制定科学的免疫程序非常必要。本文对昆明市部分学龄前儿童甲型肝炎病毒抗体水平进行调查。现将结果报告如下。1对象与方法1·1材料(1)血清:采集无甲肝疫苗接种史的0~6岁健康儿童血样本432份。采血后分离血清,于-20℃保…     

甲肝灭活疫苗接种安全性及免疫效果观察

目的 观察甲型肝炎灭活疫苗的安全性及免疫效果。方法 挑选甲肝抗体阴性，丙氨酸转氨酶（ALT）正常的健康的恒河猴10只，随机分为5组，每组2只，每只接种1ml甲肝疫苗，分别接种甲肝灭活疫苗吕8株（Lu8)、H2株及史克疫苗，方案：0、4周接种，接种3天内，每天观察有无局部及全身反应，首次注射后每周采静脉血1次，加强1针后每2周采血1次检测抗HAV及ALT，14周后改为每4周采血1次直至46周，每周采粪便2次，连采4周，用KMB17细胞进行病毒分离，4、8周肝组织穿刺作病理学检查，结果 接种疫苗后3天内，所有猴子均无局部及全身反应，ALT正常，4、8周肝脏穿刺无特殊组织病理改变，首次注射后2周100%抗体阳转，4周效价为374.8mIU/ml-937.mIU/ml。加强1针后抗HAV效价有10倍以上升高，抗体最高达14992mIU/ml，到46周抗体水平持续在2998.4mIU/ml-7496mIU/ml之间，GMT为31.2-34.2。大便传代2次无排毒。结论 4批国产甲肝灭活疫苗接种恒河猴具有很好的安全性和可靠的免疫效果。     

甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价

目的评价佐剂吸附甲型肝炎成品疫苗有效免疫剂量。方法将4个厂家的4批甲型肝炎灭活疫苗进行解离吸附后，检测比较HAV抗原含量；通过小白鼠体内效力实验，计算半数有效稀释倍数，比较评价各组疫苗的免疫效力。结果体外吸附解离HAV抗原含量与体内免疫效力相偏离，传统概念上的半数有效剂量(ED50)不能用作比较评价指标。结论体内半数有效稀释倍数可用于甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价。