单克隆抗体与血卟啉衍生物交联物的制备及其对胃癌靶细胞的杀伤作用

以碳二亚胺(EDCI)为连接剂,将血卟啉衍生物(HPD)与抗胃癌单克隆抗体18M(McAb18M)共价交联。经ELISA法测定及溶血试验表明,该交联物保留了McAb的反应特性及HPD的光故活性。体外试验表明,交联物对靶细胞的光动力杀伤效率提高了11.2倍,对非靶细胞的杀伤作用微弱,表明HPD—McAb具有特异杀伤作用。对游离HPD及交联HPD的吸收光谱,荧光激发光谱及发射光谱的分析比较表明,二者均有一定的差异。     

人胃粘膜活检标本测氨法诊断幽门螺杆菌感染

探讨人胃粘膜Ｈｐ感染的检测法。方法；以纳氏测氨法为基础建立了纳氏试剂快速显色检测人胃粘膜中幽门螺杆菌感染的方法，临床检测４８５例因上消化道症状而行胃镜检查的患者，并以细菌培养，粘膜涂片镜检及血清抗Ｈｐ－ＩｇＧＥＬＩＳＡ检测结果为对照组。     

v银染RNA AP-PCR差示法克隆人胃癌转移相关基因

目的：以改进的银染RNAAP-PCR法分析原发性及转移性胃癌标本,鉴定和克隆胃癌转移相关基因。方法：以原发性转移灶胃癌标本总RNA为研究对象,首先以T12MN“锚定”引物进行逆转录合成cDNA第一链,再以10核苷酸任意引物进行PCR扩增,5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物后银染显示并回收差异条带。经RNA点杂交验证,克隆测序后进入GenBank数据库检验同源性。结果：经银染RNAAP-PCR法分析,获得系列差异表达片段,对其中MGA1（662bp)和PGA1（589bp)两个片段进行验证和测序,结果显示,MGA1与胃癌转移相关,并与编码人巨噬细胞集落刺激因子受体（macrophage colony-stimulating factor receptor,CSF-1R)的原癌基因c-fms100%同源;而PGA1则属胃癌转移抑制基因,与编码肿瘤转移抑制基因KAI-1完全同源。结论：银染RNAAP-PCR法适用于分析和克隆差异表达基因,具有快速,直观,假阳性率低等优点。提示CSF-1R及KAI-1与胃癌转移表型相关,为进一步研究CSF-1R功能提供了新的线索。     

银染RNA AP-PCR差示法克隆人胃癌转移相关基因

目的:以改进的银染RNAAP-PCR法分析原发性及转移性胃癌标本,鉴定和克隆胃癌转移相关基因。方法:以原发及转移灶胃癌标本总RNA为研究对象,首先以T12MN“锚定”引物进行逆转录合成cDNA第一链,再以10核苷酸任意引物进行PCR扩增,5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物后银染显示并回收差异条带,经RNA点杂交验证、克隆测序后进入GenBank数据库检验同源性。结果:经银染RNAAP-PCR法分析,获得系列差异表达片段。对其中MGA1(662bp)和PGA1(589bp)两个片段进行验证和测序,结果显示,MGA1与胃癌转移相关,并与编码人巨噬细胞集落刺激因子受体(macrophagecolony-stimulatingfactorreceptor,CSF-1R)的原癌基因c-fms100%同源;而PGA1则属胃癌转移抑制基因,与编码肿瘤转移抑制基因KAI-1完全同源。结论:银染RNAAP-PCR法适用于分析和克隆差异表达基因,具有快速、直观、假阳性率低等优点;提示CSF-1R及KAI-1与胃癌转移表型相关,为进一步研究CSF-1R功能提供了新的线索。     

肿瘤转移检测标志基因研究进展

用聚合麦链反应方法检测肿瘤转移标志基因的研究报道逐年增多，ＰＣＲ法检测循环肿瘤细胞和微转移，不仅可确认癌转移，而且对检测治疗的效果，强度和持续时间有指导意义，对肿瘤转移规律的研究也将有深远的影响。     

姜黄素诱导人胃癌MGC80-3细胞凋亡研究

八十年代以来已陆续发现姜黄素具有抗炎、抗氧化、抗凝和降血脂作用,并发现姜黄素还具有显著的防癌和抑癌作用.近年有实验证据表明姜黄素能诱导多种癌细胞凋亡.但姜黄素作为一种可食用的食品添加剂,对胃癌细胞是否有诱导凋亡作用尚无报道.我们的前期工作曾发现姜黄素可显著抑制人胃腺癌细胞MGC 80-3生长,本文以该细胞株为对象,研究和探讨姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的效应及可能机制.以苔酚蓝拒染计数法、Giemsa染色法和Hoechst 33258染色法分别观察姜黄素对MGC80-3细胞存活及细胞形态的影响;DNA琼脂糖电泳法观察姜黄素诱导癌细胞DNA片断化作用;并以DNA-Hoechst 33258染色荧光测定法定量检测断裂及未断裂DNA含量;流式细胞仪检测术检测经姜黄素处理后的细胞周期变化.结果显示经5,10及20μmol/L终浓     

抗人肺癌单克隆抗体(3D3)的研制及其特性鉴定

本文用人肺腺癌组织免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,获得1株单克隆抗体(McAb 3D3)。Ig类测定为IgG_1型。杂交瘤培养上清液和腹水的效价分别为1∶10~3～10~4和1∶10~6。采用间接免疫荧光法(IFA)观察到McAb3D3主要与肺腺癌细胞株A549和L342反应,与其它组织肿瘤细胞株没有反应。ABC免疫酶染色试验显示McAb3D3主要与肺腺癌组织反应,与正常肺组织没有反应。     

光敏化姜黄素诱导人胃癌MGC80-3细胞调亡研究

姜黄素(curcumin)是从中药姜黄中提取的酚性化合物,广泛用于食品添加剂.近年来已发现姜黄素具有多种医疗作用以及显著的防癌和抑癌作用,并发现可诱导多种癌细胞凋亡.我们在研究姜黄素诱导人胃腺癌MGC 80-3细胞凋亡时,偶然发现姜黄索在光照下(光敏化姜黄素)也可诱导细胞凋亡.本文以MGC 80-3细胞为对象,研究光敏化姜黄素诱导细胞调亡的效应,以探讨姜黄素光敏化反应在光动力学治疗肿瘤上的应用前景.以台盼蓝拒染计数法、Giemsa染色法和Hoechst 33258染色法分别观察姜黄素 光照对MGC 80-3细胞存活及细胞形态的影响;DNA琼脂糖电泳法观察姜黄素 光照诱导癌细胞DNA片断化作用;并以DNA Hoechst33258染色荧光测定法定量检测断裂及未断裂DNA含量;流式细胞仪检测术检测经姜黄素 光照处理后的细胞周期变