超滤技术去除重组MUC1-MBP融合蛋白中内毒素的效果评价

目的：评价超滤技术去除纯化后重组MUC1-MBP融合蛋白（MUC1-MBP）溶液中内毒素的效果,阐明超滤技术对去除内毒素的作用。方法：选取表达MUC1-MBP大肠杆菌基因工程菌,分别通过CM Sepharose FF离子交换层析(CM)(CM组)、CM联合Phenyl Sepharose 6 FF疏水层析（C6）(CM+C6组)、CM加超滤(CM+超滤组)以及CM联合C6加超滤(CM+C6组+超滤)进行纯化,并去除内毒素;采用SDS-PAGE 分析蛋白纯度;鲎试剂显色基质法检测内毒素表达水平。结果：SDS-PAGE分析,在预期相对分子质量62 000处呈现单一条带,Quantity One 分析纯度>96%;CM组与CM+C6组内毒素表达水平均较高,但2组比较差异无统计学意义（P>0.05）;与CM组比较,CM+超滤组内毒素表达水平明显降低（P<0.01）;与CM+C6组比较,CM+C6超滤组内毒素表达水平明显降低（P<0.01）;CM+超滤组与CM+C6＋超滤组内毒素表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：CM或CM联合C6均不能有效去除内毒素,其中C6对去除内毒素几乎无作用;CM加超滤可有效去除内毒素,超滤技术在去除内毒素中发挥重要作用。     

沉默S100A10基因对卵巢癌SKOV-3和A2780细胞周期的影响

目的探讨沉默S100钙结合蛋白A10(S100A10)对卵巢癌SKOV-3和A2780细胞周期的影响及其相关分子机制。方法将针对S100A10基因的shRNA转染至SKOV-3和A2780细胞中,获S100A10敲降稳转SKOV-3和A2780细胞系,采用CCK8方法检测细胞增殖能力,采用流式细胞技术检测细胞周期变化,并用Western blot技术检测细胞周期相关的因子CyclinD1、CDK2及CDK4蛋白表达水平的变化。结果S100A10基因敲降后,细胞增殖能力明显减弱(P<0.05),细胞周期阻滞在G₀/G₁期(P<0.05),细胞周期相关蛋白(CyclinD1、CDK2及CDK4)表达明显下调(P<0.05)。结论S100A10在卵巢癌中作为一个癌基因可以影响肿瘤细胞的增殖。     

康艾注射液体外对乳腺癌MCF7细胞凋亡的影响

目的 观察康艾注射液体外对乳腺癌MCF7细胞凋亡的影响。方法 分别用0 mM、20 mM、40 mM康艾注射液处理MCF7细胞，48 h后，采用Annexin-V/PI法检测康艾注射液体外对乳腺癌MCF7细胞凋亡的影响，采用Western Blot法检测康艾注射液体外作用乳腺癌MCF7细胞后Caspase 3和PARP表达水平的变化。结果 康艾注射液处理组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05),cl-Caspase 3和cl-PARP表达水平明显升高(P<0.05),且随康艾注射液的使用剂量增加而明显升高。结论 康艾注射液在体外有效促进乳腺癌MCF7细胞发生凋亡。