芪仙汤提取物抑制哮喘气道上皮间质转化的研究

目的以16 HBE人支气管上皮细胞株为研究对象,通过体外研究探讨芪仙汤提取物对哮喘气道上皮间质转化的影响。方法将16HBE细胞加入不同浓度的H_2O_2及芪仙汤提取物干预不同时间。观察细胞形态改变; CCK-8检测H_2O_2对16HBE细胞活力的影响; RT-PCR检测E-cadherin、α-SMA基因表达水平; Western blot检测E-cadherin、α-SMA蛋白表达水平;免疫荧光检测E-cadherin,α-SMA蛋白表达水平及蛋白定位。结果 H_2O_2作用后细胞形态呈EMT改变,而芪仙汤提取物可逆转细胞EMT改变;CCK-8结果显示,H_2O_2作用后气道上皮细胞存活率随浓度增加而降低(P0.01),芪仙汤提取物可以减少H_2O_2诱导的气道上皮细胞损伤(P0.01)。RT-PCR检测结果示,H_2O_2刺激后气道上皮细胞E-cadherin mRNA水平显著降低(P0.01),α-SMA mRNA水平增高(P0.05),芪仙汤提取物作用后可以逆转H_2O_2诱导的E-cadherin转录水平降低(P0.05),抑制H_2O_2诱导的α-SMA mRNA表达水平增加(P0.05)。Western blot及免疫荧光检测结果示E-cadherin、α-SMA蛋白表达水平与基因表达水平相一致(P0.05)。结论芪仙汤提取物可以减少氧化应激诱导的气道上皮细胞损伤及气道上皮间质转化。     

芪仙汤对支气管哮喘小鼠肺组织FIZZ1 mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察芪仙汤对哮喘小鼠肺组织中FIZZ1基因及蛋白表达水平的影响,探讨芪仙汤治疗哮喘的作用机制。方法:选用30只健康雌性BALB/c小鼠,采用随机数字表分为正常对照组(对照组)、支气管哮喘模型组(模型组)、芪仙汤治疗组(治疗组)。除对照组外均采用卵白蛋白(OVA)建立支气管哮喘小鼠模型。各组分别相应干预灌胃2周。从小鼠的一般情况、肺组织病理形态学(HE染色病理切片)指标评价支气管哮喘小鼠模型;采用RT-PCR检测肺组织FIZZ1基因mRNA表达水平,Western blot和免疫组化法检测肺组织FIZZ1蛋白表达水平。结果:HE染色结果显示,模型组小鼠肺组织较正常组嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润明显,气道壁及支气管平滑肌增厚明显;治疗组哮喘病理改变明显改善。RT-PCR、Western blotting、免疫组化结果均显示模型组FIZZ1表达水平显著高于对照组,治疗组小鼠肺组织中FIZZ1表达水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:芪仙汤可能是通过下调小鼠肺组织FIZZ1表达起到治疗支气管哮喘的作用。     

PTEN基因在哮喘患者中的表达及地塞米松对其调节作用的研究

目的探讨支气管哮喘患者气道黏膜组织PTEN基因的表达情况及地塞米松对其调节作用。方法 选择5例支气管哮喘患者及6例非哮喘患者作为对照,气道黏膜组织取自支气管纤维镜黏膜活检。人气道上皮细胞A549用来研究地塞米松对PTEN的调节作用。采用荧光定量PCR检测PTEN基因的表达变化。结果 PTEN基因在哮喘患者中的表达低于非哮喘患者(下降3.784倍),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。细胞实验证明地塞米松能上调人气道上皮细胞A549中PTEN的表达,呈时间和剂量依赖性(P<0.01)。结论 PTEN参与人哮喘的发病机制,地塞米松对PTEN的上调作用可能是地塞米松治疗哮喘的新途径。     

小青龙汤对支气管哮喘小鼠磷酸酶基因和基质金属蛋白酶-9的作用

目的检测小青龙汤对支气管哮喘小鼠磷酸酶基因(PTEN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨小青龙汤治疗支气管哮喘的机制。方法健康雌性BALB/c小鼠随机分成正常对照组、哮喘组、地塞米松组和小青龙汤组。以卵蛋白致敏法建立支气管哮喘小鼠模型,造模成功观察2周后,处死小鼠取肺组织,苏木精-伊红(H-E)染色观察病理组织变化,免疫组织化学法检测MMP-9和PTEN蛋白表达情况。结果哮喘组小鼠肺组织PTEN的表达量显著低于正常对照组(P<0.01),小青龙汤组和地塞米松组治疗后小鼠肺组织PTEN的表达量显著高于哮喘组(P值均<0.01)。哮喘组小鼠肺组织MMP-9的表达量显著高于正常对照组(P<0.01),小青龙汤组和地塞米松组治疗后小鼠肺组织MMP-9的表达量显著低于哮喘组(P值均<0.01)。结论小青龙汤能显著改善气道炎症。小青龙汤选择性上调PTEN、下调MMP-9表达,可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

PDCA循环式护理干预对晚期癌症患者化疗相关性便秘的影响

目的探讨PDCA循环式护理干预对晚期癌症患者化疗相关性便秘的影响。方法将154例晚期癌症化疗患者随机分为观察组和对照组,各77例。对照组给予肿瘤内科常规护理,观察组在对照组护理方法的基础上实施PDCA循环式护理干预,2组均连续干预2月。比较2组欧洲癌症研究与治疗组织(EORTC)生活质量核心30问卷调查(QLQ-C30)评分及临床疗效。结果护理干预后观察组角色功能、躯体功能、认知功能评分均显著升高,恶心呕吐、疼痛、疲倦、便秘、失眠、食欲减退评分均显著降低,对照组疲倦、便秘、呼吸困难评分均显著降低,与同组干预前比较差异均有统计学意义(P0.05),且观察组角色功能、躯体功能、认知功能及恶心呕吐、疼痛、疲倦、便秘、失眠、食欲减退评分改善程度均优于对照组(P0.05);观察组总有效率为89.61%,对照组为75.33%,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 PDCA循环式护理干预对晚期癌症患者化疗相关性便秘的临床效果显著,值得临床推广应用。     

过表达CLPTM1L降低95-D肺癌细胞对吉西他滨的敏感性

目的 研究CLPTM1L基因与肺癌细胞对吉西他滨敏感性的关系,并探讨其潜在的作用机制。方法 构建针对CLPTM1L基因的过表达慢病毒,并感染肺癌95-D细胞,将细胞分为CLPTM1L过表达组和对照组;采用CCK-8法检测吉西他滨处理后过表达组和对照组细胞增殖的变化;采用荧光定量PCR、Western blot和免疫化学发光法检测CLPTM1L基因和蛋白变化;采用生物荧光法检测Caspase-3/7和Caspase-9活性的变化;采用Western blot检测p-4E-BP1蛋白变化。结果 CLPTM1L过表达慢病毒感染95-D细胞后,CLPTM1L过表达组的CLPTM1L基因水平(P=0.036)和蛋白表达(P＜0.01)均高于对照组;与对照组相比,吉西他滨处理后CLPTM1L过表达组细胞增殖显著上升(P＜0.01);Caspase活性检测显示,CLPTM1L过表达组Caspase-3/7和Caspase-9活性较对照组明显下降(P＜0.01);Western blot检测显示,CLPTM1L过表达组4E-BP1的磷酸化水平与对照组比较显著增高(P＜0.01)。结论 CLPTM1L过表达可降低肺癌细胞对吉西他滨的敏感性,其机制可能是增加了4E-BP1的磷酸化水平。     

PTEN基因在哮喘患者中的表达及地塞米松对其调节作用的研究

目的探讨支气管哮喘患者气道黏膜组织PTEN基因的表达情况及地塞米松对其调节作用。方法 选择5例支气管哮喘患者及6例非哮喘患者作为对照,气道黏膜组织取自支气管纤维镜黏膜活检。人气道上皮细胞A549用来研究地塞米松对PTEN的调节作用。采用荧光定量PCR检测PTEN基因的表达变化。结果 PTEN基因在哮喘患者中的表达低于非哮喘患者（下降3.784倍）,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。细胞实验证明地塞米松能上调人气道上皮细胞A549中PTEN的表达,呈时间和剂量依赖性（P〈0.01）。结论 PTEN参与人哮喘的发病机制,地塞米松对PTEN的上调作用可能是地塞米松治疗哮喘的新途径。