肿瘤相关成纤维细胞来源外泌体ciRS-7经miR-7/IGF1R轴促进胰腺癌细胞糖酵解

目的：探讨肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）来源外泌体ciRS-7对胰腺癌细胞糖酵解代谢的影响。方法：采用超速离心法提取CAFs外泌体,并通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测外泌体中ciRS-7的表达及胰腺癌细胞糖酵解关键酶mRNA的表达;构建含ciRS-7 野生及突变序列的荧光素酶检测报告质粒,在胰腺癌细胞中验证ciRS-7与miR-7的关系;蛋白质印迹（Western blot）法检测IGF1R/AKT蛋白表达。结果：ciRS-7在胰腺癌相关成纤维细胞的外泌体中表达上调（P ＜0.05）;CAFs释放的外泌体促进胰腺癌细胞糖酵解和增殖（P ＜0.05）;敲降胰腺癌相关成纤维细胞ciRS-7的表达,其外泌体可抑制胰腺癌细胞糖酵解相关基因的表达（P ＜0.05）;ciRS-7在胰腺癌细胞中经miR-7/IGF1R/AKT通路促进癌细胞糖酵解（P ＜0.05）。结论：ciRS-7在胰腺癌相关成纤维细胞的外泌体中高表达,下调ciRS-7具有抑制胰腺癌细胞糖酵解的作用。     

miR-7-5p抑制胰腺癌细胞放疗后加速再增殖的体外实验研究

目的 研究放疗后濒死胰腺癌细胞（PANC-1）释放的微小RNA-7-5p（miR-7-5p）对存活PANC-1加速再增殖效应的相关机制。方法 通过慢病毒感染,建立荧光素酶标记的PANC-1-LUC胰腺癌细胞放疗后加速再增殖模型。通过RT-qPCR检测miRNA-7-5p的表达水平,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,双荧光素酶法验证miR-7-5p靶基因,Western blotting检测γH2A.X与DDIT4 蛋白的表达情况。结果 miR-7-5p在受辐照PANC-1（10 Gy）濒死细胞上清中表达下调,受辐照PANC-1细胞与存活PANC-1-LUC细胞共培养,可促进放疗后存活PANC-1-LUC细胞加速再增殖及其DNA损伤修复,而上调miR-7-5p可抑制放疗后胰腺癌细胞PANC-1-LUC再增殖。进一步研究表明,miR-7-5p在胰腺癌细胞中通过靶向下调DDIT4通路促进凋亡信号。结论 受辐照胰腺癌细胞可通过下调miR-7-5p促进DDIT4表达,从而抑制细胞凋亡及调控细胞周期再分布来加速再增殖,表明提高miR-7-5p的水平能够提高胰腺癌细胞的放疗敏感性,这将为改善胰腺癌放疗抵抗提供了一种新的思路和方法。     

SOAT1在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：观察甾醇O-酰基转移酶1（SOAT1）在肝细胞癌（HCC）组织及癌旁组织中的表达,探索其与患者预后及临床病理特征之间的相关性。方法：从癌症基因组图谱（TCGA）数据库收集HCC数据集,下载SOAT1 mRNA表达谱及预后资料,比较SOAT1 mRNA在50例正常肝组织与374例HCC组织中的表达,分析表达量与患者预后相关性。收集53例HCC患者石蜡组织标本,采用免疫组织化学方法检测癌和癌旁组织中SOAT1的蛋白表达水平,并分析其与临床病理特征之间的相关性。结果：TCGA数据库数据分析显示,与癌旁正常组织比较,SOAT1在HCC中表达显著升高（P＜0.01）。预后生存分析发现SOAT1高表达患者的5年生存率较低（P＜ 0.05）。免疫组织化学结果显示,与癌旁组织相比,HCC组织中SOAT1蛋白表达量显著升高（P＜0.05）。癌组织中SOAT1蛋白表达量与肿瘤临床分期及微血管癌栓形成相关（P＜0.05）。结论：SOAT1在HCC组织中表达增高,并与HCC癌患者的临床病理特征密切相关,其表达与肿瘤恶性程度高度相关。     

p40、TTF-Ⅰ、p63、CK5/6在肺腺癌和肺鳞癌中的表达及其意义

目的：探讨p40、TTF-1、p63和CK5/6在肺腺癌和肺鳞癌中的表达及其意义.方法：应用组织芯片技术结合免疫组织化学法,检测p40、TTF-1、p63和CK5/6在108例肺腺癌标本、66例肺鳞癌病理标本中的表达,分析其差异及临床病理意义.结果：①p40、p63、CK5/6、TTF-1在肺鳞癌中的阳性表达率分别为93.9％ （62/66）、86.4％ （57/66）、89.4％ （59/66）、6.1％ （4/62）.②p40、p63、CK5/6、TTF-1在肺腺癌中的阳性表达率分别为3.7 （4/108）、22.2％ （24/108）、24.1％ （26/108）、95.4％ （103/108）.③p40、p63、CK5/6在肺鳞癌中的特异度分别是96.3％、77.8％、75.9％,p40特异度高于p63、CK5/6（P＜0.05）.④p40、p63、TTF-1与性别、病理类型、肿块大小、吸烟史有关（均P＜0.05）,与年龄、分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关（均P＞ 0.05）.⑤在低分化肺鳞癌中p40的阳性表达率（为89.3％）较p63（为78.6％）、CK5/6（为82.1％）高（均P＜0.05）.结论：p40、TTF-1、p63和CK5/6在肺癌的诊断及鉴别中具有重要价值,p40对肺鳞癌的鉴别明显优于p63和CK5/6,p40在低分化肺鳞癌中具有较高的阳性表达率.性别、病理类型、肿块大小、吸烟史与p40、TTF-1、p63、CK5/6的表达有相关性.     

泛素相关基因在肝细胞肝癌中 的表达及临床意义

目的 探讨泛素相关基因（URGs）在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及临床意义。 方法 筛选癌症基因组图谱 （TCGA）数据库中 HCC 患者差异表达的 URGs，以差异表达最明显的泛素结合酶（UBE）2C 为对象，采用 qRT-PCR 法和免疫组 化法验证 UBE2C 的表达及与 HCC 患者临床病理特征、预后的关系；构建与 URGs 相关 HCC 临床预后模型，并绘制 ROC 曲线分 析模型预测患者 1、2、3 年生存期的效能。 结果 qRT-PCR 和免疫组化结果均证实，相比癌旁组织，UBE2C mRNA 和蛋白 在 HCC 组织中均显著高表达（均 P＜0.05）；生存分析结果显示，UBE2C 高表达组累计生存率显著低于 UBE2C 低表达组 （P＜0.01）。TCGA 数据显示 UBE2C 高表达与 HCC 患者年龄及肿瘤分级、分期、大小均显著相关（均 P＜0.01），UBE2C 高 表达是 HCC 患者较差预后的独立影响因素（P＜0.01）。临床数据发现 UBE2C 高表达与肿瘤分级、分期、血清甲胎蛋白 （AFP）及 HBsAg 相关（均 P＜0.05）；TCGA 中发现 11 个 URGs 与 HCC 不良预后相关。构建的预后模型预测患者 1、2 和 3 年生存期的 AUC 分别为 0.762、0.708 和 0.683。 结论 UBE2C 在 HCC 中高表达，且与 HCC 分级、分期、不良预后相关；利用 URGs构建预测HCC的临床预后模型可有效预测患者术后生存期。