双氧化酶2在5-羟色胺加重的小鼠结肠炎模型中的表达及作用

目的 探讨5-羟色胺(5-HT) 对双氧化酶2 (Duox2) 在小鼠结肠组织中的表达情况及其在炎症中的意义.方法 选取6~8周龄的健康清洁级C57BL/6J(B6)雄性小鼠,随机分为5组(n=8):对照组自由饮用无菌蒸馏水;葡聚糖硫酸钠(DSS)(1.0%、2.5%)组自由饮用相应浓度的DSS溶液;5-HT组采用直肠灌药方式(1.0 mg/kg)给药,每3 d 1次;DSS+5-HT组同时给予1.0% DSS和5-HT.于造模第6天处死小鼠取结肠组织.通过结肠长度、疾病活动指数(DAI)评分和HE染色等方法评估肠道炎症程度,采用实时定量PCR(RT-PCR)检测小鼠结肠组织中白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和 Duox2 mRNA表达水平,应用免疫组化检测结肠组织中Duox2蛋白的表达情况.结果 对照组和5-HT组小鼠无肠炎表现;DSS (1.0%) 组小鼠表现为轻度肠炎;DSS+5-HT组和DSS (2.5%) 组有严重急性肠炎表现.IL-1β、IL-6和TNF-α等表达量随炎症程度加重而增加.Duox2 mRNA在5-HT组和DSS (1.0%) 组表达增高(均P<0.05),在DSS+5-HT和DSS (2.5%) 组表达下调(均P<0.05).免疫组化结果显示Duox2蛋白主要表达于小鼠结肠上皮刷状缘及上皮细胞胞质中,与mRNA表达一致.结论 5-HT可能通过影响Duox2的表达在小鼠结肠炎的发生发展中发挥作用.     

呕吐毒素对小鼠精液质量和生育力的影响

目的探讨呕吐毒素即脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)染毒对小鼠精液质量和生育力的影响。方法将40只2~3月龄健康清洁级昆明雄性小鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和10、30、50 mg/kg DON染毒组,每组10只。采用腹腔注射方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,连续染毒7 d。与未染毒的雌性小鼠合笼(雌雄比为2∶1);于妊娠15 d时,检测雄性小鼠精液质量和雌性小鼠生育力的变化情况。结果与对照组比较,各剂量DON染毒组小鼠的精子畸形率升高,而精子存活率和顶体完整率降低,差异均有统计学意义(P0.01,P0.05);且随着DON染毒剂量的升高,小鼠的精子存活率和顶体完整率均呈下降趋势,而精子畸形率呈上升趋势。与对照组比较,各剂量DON染毒组小鼠睾丸总精子数和精子日生成量以及20和30 mg/kg DON染毒组小鼠的附睾尾总精子数均下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);且随着DON染毒剂量的升高,小鼠的总精子数、精子日生成量和附睾尾总精子数均呈下降趋势。与对照组比较,各剂量DON染毒小鼠可使交配母鼠的妊娠率、着床胚胎数、活胎数降低,而妊娠流产率升高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);且随着DON染毒剂量的升高,与各剂量DON染毒小鼠交配母鼠的妊娠率、着床胚胎数、活胎数均呈下降趋势,而妊娠流产率呈上升趋势。结论 DON染毒可降低雄性小鼠精液质量和生育力。     

NADPH氧化酶Nox1和Duox2在小鼠肠炎中的表达和意义

目的:探讨NADPH氧化酶Noxl和Duox2在小鼠肠炎发病中的表达及意义.方法:将6-8周龄的C57BL/6,小鼠随机分为正常组、1.5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)组和3.0%DSS组,每组10只,正常组正常饮水,1.5%和3.0%DSS组分别自由饮用含有1.5%或者3.0%DSS的饮水,共6d建立小鼠急性肠炎模型.通过疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠长度测定和HE染色等方法评估肠道炎症程度.利用生化方法检测血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及结肠组织中氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽(oxidized glutathione/glutathione,GSSG/GSH)比率等氧化应激指标,以评估机体氧化应激程度.采用免疫组织化学方法和实时定量PCR技术分别检测小鼠结肠组织中NADPH氧化酶Nox1和Duox2蛋白及mRNA表达情况.结果:正常组小鼠无肠炎,1.5%DSS组、3.0%DSS组小鼠分别呈轻度和重度肠炎.氧化应激指标(MDA、GSSG/GSH)在1.5%DSS组升高,而3.0%DSS组进一步升高(均P<0.05).NADPH氧化酶Nox1与Duox2蛋白和mRNA在不同炎症程度时表达不同:Nox1蛋白和mRNA在正常组呈高表达,在1.5%DSS组表达下调(P<0.05),在3.0%DSS组进一步下调(P<0.05);Duox2蛋白和mRNA在1.5%DSS组表达较正常组明显上调(P<0.05),而在3.0%DSS组表达下调至正常水平.结论:Nox1主要在维持肠道正常生理功能中发挥作用,而Duox2除了维持正常生理功能外,可能还积极地参与肠炎发病过程.     

NADPH氧化酶NOX2和NOX3基因在胃癌组织中表达的探讨

目的探讨NADPH氧化酶NOX2和NOX3基因在胃癌组织中的表达情况。方法收集在我院行胃癌根治术患者的胃癌及自身正常对照组织标本各15例,慢性胃炎患者胃镜下活检胃黏膜组织标本20例,采用实时定量PCR法检测NOX2和NOX3 mRNA的表达情况。结果 NOX2和NOX3 mRNA在胃癌组织中的表达量显著高于自身正常对照组织和慢性胃炎组织;NOX2 mRNA在胃癌自身正常对照组织与慢性胃炎胃黏膜组织中的表达无明显差异;NOX3 mRNA在后两者中的表达量均很少。结论 NADPH氧化酶NOX2和NOX3在胃癌的发生和发展过程中可能发挥重要作用。     

糖尿病肾病患者血液流变学检测结果分析

目的：探讨血液流变学检测结果与糖尿病肾病的关系及临床意义。方法对118例糖尿病肾病患者(DN)和107例单纯糖尿病未合并肾脏病变患者(NDN)的血液流变学系列检测结果进行分析,并与120例健康体检者为对照组(NC)进行了比较。结果糖尿病肾病患者和单纯糖尿病未合并肾脏病变患者反映血液粘度的系列指标均显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。反映红细胞聚集情况的指数有明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而反映红细胞变形能力的指数有明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病患者血液粘度升高是微血管病变进而导致糖尿病肾病的重要原因,监测血液流变学检测结果的变化对防治糖尿病肾病有一定意义。     

IRE1α和IRE1β在DSS诱导的小鼠慢性结肠炎中的表达及意义

目的 探讨肌醇需求酶1(IRE1)α和IRE1β在葡聚糖硫酸钠(DSS) 诱导的小鼠慢性结肠炎中的表达及意义.方法 选择8~10周龄的C57BL/6雌性小鼠随机分为两组:对照组10只,正常饮水;慢性炎症组10只,先给予1.0% DSS自由饮用7 d,然后正常饮水14 d如此作为一个周期,循环3个周期建立小鼠慢性结肠炎模型.通过疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度测定和HE染色等方法评估肠道炎症程度.采用实时定量PCR技术检测小鼠结肠组织中炎症因子、内质网应激因子IRE1α、IRE1β、非剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1u)、剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)和黏蛋白(MUC)2 mRNA表达,免疫组织化学方法检测IRE1α、IRE1β和MUC2表达.结果 对照组小鼠无肠炎表现,而慢性炎症组在3个周期末结肠出现炎症表现.实时定量PCR结果显示白介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA在慢性炎症组高于对照组(P<0.05);XBP1s 和IRE1α mRNA在两组表达无明显差异;XBP1u mRNA在慢性炎症组表达低于对照组(P<0.05).IRE1β和MUC2 mRNA在慢性炎症组表达均低于对照组(P<0.05).IRE1α蛋白主要表达于结肠上皮的刷状缘、浆细胞等细胞的胞质中,其表达量在炎症组高于对照组,IRE1β蛋白和MUC2蛋白主要表达于结肠上皮细胞胞质中,两者表达量在炎症组低于对照组(P<0.05).结论 IRE1α可能通过对XBP1进行剪接来参与肠道炎症反应,并且IRE1α还有可能通过其他机制来调节自身的表达来参与炎症过程;IRE1β和MUC2可能与结肠上皮的功能维持有关,在肠道炎症过程中IRE1β和MUC2表达功能受到抑制而影响炎症的发生和发展.