RhoC基因转染对人胆管癌QBC 939细胞增殖和侵袭性的影响

目的研究RhoC（ras homolog gene family，member C）基因对胆管癌QBC939细胞株增殖和侵袭能力的影响。方法以脂质体将RhoC cDNA真核表达载体转染人胆管癌QBC939细胞。应用克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化，流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化，Boyden小室侵袭实验检测侵袭能力的变化。结果RhoC基因能促进胆管癌QBC939细胞增殖，流式细胞仪分析结果显示转染后细胞出现G1期细胞减少，侵袭实验显示转染后细胞侵袭能力较转染前有显著加强。结论RhoC基因能够促进胆管癌QBC939细胞株的体外增殖和侵袭能力。     

RhoC基因转染对胆管癌QBC939细胞生物学行为的影响

目的将人RhoC正义、反义基因真核表达载体转染胆管癌QBC939细胞株,研究RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株增殖和侵袭能力的影响。方法以脂质体将包含正义、反义RhoC cDNA真核表达载体,分别转染人胆管癌QBC939细胞。应用克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化,Boyden小室侵袭实验检测侵袭及运动能力的变化。结果正义RhoC基因能促进胆管癌QBC939细胞增殖,流式细胞仪分析结果显示,转染后细胞出现G1期细胞减少;侵袭实验显示,转染后细胞侵袭能力较转染前有显著加强。反义RhoC基因能抑制胆管癌QBC939细胞增殖,流式细胞仪分析结果显示,转染后细胞出现G1期细胞增加;侵袭实验显示,转染后细胞侵袭能力较转染前有显著减弱。结论RhoC基因能够促进胆管癌QBC939细胞株的体外增殖和侵袭能力,反义RhoC基因可抑制胆管癌QBC939细胞的增殖和侵袭能力。     

槲皮素抑制TGF-β1诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生EMT的效果研究CSCD

目的旨在研究槲皮素抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生上皮-间质转化(EMT)的效果。方法将肝癌细胞分为对照组(10 ng/ml TGF-β1)、低剂量组(50 nmol/l槲皮素+10 ng/ml TGF-β1)、高剂量组(10 ng/ml TGF-β1+100 nmol/l槲皮素),分别处理6 h,光学显微镜观察肝癌细胞形态学变化。6、12和24 h后,观察肝癌细胞迁移及侵袭能力。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝癌细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA表达。Western blot法测定肝癌细胞E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白。结果经TGF-β1诱导后,肝癌细胞发生明显EMT。划痕实验结果显示,12和24 h时,高剂量组和低剂量组肝癌细胞迁移划痕空隙长度明显低于对照组(P<0.05)。侵袭实验中,与对照组比较,低和高剂量组每视野穿膜肝癌细胞数明显降低,且高剂量组穿膜高于低剂量组(P<0.05)。RT-PCR实验结果显示,对照组E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组和低剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组和低剂量组(P<0.01)。低剂量E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组(P<0.01)。Western blot实验结果显示,对照组E-cadherin蛋白表达明显低于高剂量组和低剂量组(P<0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白明显高于高剂量组和低剂量组(P<0.01)。高剂量组E-cadherin蛋白表达明显高于低剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显低于低剂量组(P<0.01)。结论槲皮素通过增加E-cadherin蛋白表达表达,降低N-cadherin、Vimentin蛋白表达,使得TGF-β1诱导的肝癌细胞EMT得到明显抑制。     

RhoC反义基因转染对人胆管癌QBC 939细胞增殖和侵袭性的影响

目的研究RhoC反义基因对胆管癌QBC939细胞株增殖和侵袭的影响。方法以脂质体将反义RhoC cDNA真核表达载体转染人胆管癌QBC939细胞。应用克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化,Transwell小室检测侵袭能力的变化。结果转染反义RhoC cDNA真核表达载体后,形成克隆数目较空载体转染细胞和未转染的QBC939细胞明显减少[(54±8)vs(91±11)vs(90±9),P<0.05];并出现G_1期阻滞(52.5% vs 43.4% vs 43.7%);穿过小室滤膜细胞数目明显减少[(36±6)vs(96±12)vs(95±7),P<0.05]。结论RhoC反义基因能够抑制胆管癌QBC939细胞株的体外增殖和侵袭力。     

RhoC基因与肿瘤的侵袭和转移

恶性肿瘤是严重危害人类健康的常见疾病,其主要生物学特征为侵袭和转移。肿瘤的侵袭、转移包括从原发部位浸润性生长、穿透细胞外基质、进入血管、淋巴管或体腔中游走、与靶器官黏附后向间质侵袭以及增殖形成转移灶等几个阶段。这是一个多步骤、多阶段、多基因的复杂过程。肿瘤细胞游走运动一直被视为其侵袭转移的关键步骤之一,并与肿瘤的转移、预后等有密切的关系。在肿瘤细胞的游走过程中,RhoC起着关键的作用。RhoC是Rho基因家族的一个成员,参与细胞信号转导、增殖和肌动蛋白骨架的调节。截止目前,Rho家族已被证实的成员有:Rho(RhoA、…