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目的:构建pcDNA3.1-HMOX1重组质粒载体。方法使用基因合成法合成HMOX1基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1载体的BamHⅠ和 NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。结果 pCDNA3.1-HMOX1重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因HMOX1的序列完全正确,重组质粒载体构建成功。结论成功构建pCDNA3.1-HMOX1融合基因并在DH5α大肠杆菌内表达,为进一步探讨HMOX1的生物学功能奠定了基础。 相似文献
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目的:构建pCDNA3.1-MT2A真核表达载体并观察其在293T和SMMC7721细胞株中的定位和表达情况。方法:使用基因合成法合成MT2A基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1(+)载体的BamHⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。将鉴定正确的pCDNA3.1-MT2A质粒采用脂质体法转染293T和SMMC7721细胞株,激光共聚焦显微镜观察其在真核细胞中的表达和定位情况。结果:pCDNA3.1-MT2A重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因MT2A的序列完全正确,真核表达载体构建成功,激光共聚焦观察发现该重组质粒表达于293T和SMMC7721细胞的胞质中。结论:成功构建pCDNA3.1-MT2A融合基因并进行真核表达,发现MT2A主要定位于293T和SMMC7721细胞的细胞质中。本研究为探讨MT2A在肝癌细胞内的功能奠定了基础。 相似文献
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目的用meta分析的方法评价血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)在原发性肝癌(PHC)诊断中的价值。方法检索Cochrane Library、Pub Med、web of knowledge(Medline、BIOSIS Previews)、Springer link、Science Direct数据库,检索时间为1997年1月至2013年12月。中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网、万方、重庆维普等数据库,检索时间为19841月年至2013年12月。检索语言限定为中文和英文。收集研究血清AFU对PHC诊断价值的相关文献,对符合纳入标准的文献进行质量评价,采用meta-Disc 1.4软件进行分析,综合评价血清AFU在原发性肝癌诊断中的价值。结果共纳入20篇文献(中文15篇,英文5篇)。分析病例组2 114例,对照组5 718例。对入选20篇文献进行异质性检验,提示所纳入文献具有非阈值效应引起的异质性,因此选用随机效应模型进行meta分析。汇总灵敏度为0.77;汇总特异度为0.87;汇总阳性似然比为5.37;汇总阴性似然比为0.28;诊断比值比为20.47;受试者工作曲线(SROC)曲线下面积为0.87。结论血清AFU在PHC的诊断中具有较高的灵敏度和特异度,对其临床诊断具有较高的价值。 相似文献
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摘要:目的 探讨中山市育龄人群TORCH的感染现况,为全市优生优育工作提供数据支撑。方法 选取2012-2013年在全院产前诊断中心进行ToRCH筛查的32439例育龄期女性,酶联免疫法(ELISA)检测其血清anti-TORCH抗体。结果 32439例育龄期女性血清中anti-TORCH抗体阳性率分别为anti-TOX-IgM(0.77%)、anti-RV-IgM(1.07%)、anti-CMV-IgM(1.88%)、anti-HSVⅠ/Ⅱ-IgM(1.40%)、anti-HpvB19-IgM(3.79%);anti-TOX-IgG(3.97%)、anti-RV-IgG(83.99%)、anti-CMV-IgG(91.56%)、anti-HSVⅠ/Ⅱ-IgG(88.19%)、anti-HpvB19-IgG(17.46%);低龄组(18~35岁)与高龄组(36~45岁)anti-TORCH IgM阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05);IgG抗体中HSV-IgG、RV-IgG阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 本地区育龄期女性对TORCH病原体普遍易感,应加强育龄期女性的TORCH 筛查力度。 相似文献
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目的:构建HSPC238诱饵载体,筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。方法:基因合成法合成HSPC238基因,sfi IA和sfi IB双酶切后与pGBKT7诱饵载体连接,获得诱饵质粒pGBKT7-HSPC238,经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7共同转化到酵母菌株AH109,在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-HSPC238的自激活作用,进一步从人胎肝c DNA文库中筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。结果:诱饵载体pGBKT7-HSPC238构建成功,经表型筛选检测无自激活作用,经酵母双杂交技术结合文献分析,从人胎肝c DNA文库中初步筛选发现核糖体蛋白L5(Ribosomal protein L5,RPL5)可能是HSPC238相互作用的目标蛋白之一。结论:成功构建pGBKT7-HSPC238诱饵质粒载体,且经酵母双杂交技术结合文献分析发现RPL5可能是与HSPC238相互作用的目标蛋白之一。 相似文献
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目的:检测HSPC238在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达。方法:收集76例宫颈癌、105例CIN及28例正常宫颈标本,采用免疫组织化学的方法检测HSPC238的表达,比较不同组织中HSPC238表达的差异。结果:正常组织和癌组织中的HSPC238的表达强度无显著差异(Z=-0.242,P0.05)宫颈上皮内瘤变组织(CINⅠ,CINⅡ,CINⅢ)与正常组织有显著差异(χ2=19.159,P0.01),并且发现HSPC238的表达与CIN的分级存在显著相关性,随着CIN级别升高,染色程度降低(rs=-0.327,P0.01)。结论:HSPC238的低表达与宫颈肿瘤的发生发展可能有一定关系。 相似文献
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目的观察HSPC238对肝癌细胞中RB mRNA和pRb蛋白水平的影响。方法将PcDNA3.1-HSPC238质粒和PLL3.7-HSPC238干扰载体分别转染HepG2细胞,用实时荧光定量PCR的方法检测RB mRNA的表达量;采用Western blotting法检测pRb蛋白的表达。结果和对照组相比,转染高表达HSPC238载体时,HepG2细胞中RB的mRNA水平和pRb表达量也增加;相反地,和对照组相比,转染低表达HSPC238载体时,HepG2细胞中RB的mRNA水平和pRb蛋白的表达量也减少。以上结果差异均有统计学意义(P0.05)。结论在HepG2细胞中HSPC238对RB基因的表达存在正向调控作用。 相似文献
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目的探讨干血片毛细管电泳技术在新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血(以下简称α-地贫)筛查中的应用价值。方法使用干血片毛细管电泳仪对46 718例新生儿足跟血滤纸干血片标本进行血红蛋白(Hb)电泳分析,检测HbA、HbF、HbA2和异常Hb的水平,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析。结果 46 718例新生儿足跟血滤纸干血片标本中检测出巴特血红蛋白(Hb Bart′s)阳性者2 598例,筛查阳性率5.56%(2 598/46 718);召回544例经基因分析确诊477例α-地贫基因携带者,故Hb Bart′s带筛查与基因确诊的符合率为87.68%(477/544)。进一步分析其临床表型与Hb Bart′s水平的关系可见,随着临床表型的加重,Hb Bart′s水平逐渐增加,且差异有统计学意义(P=0.000)。结论滤纸干血片毛细管电泳分析技术与基因分析有较好的一致性,可根据Hb Bart′s水平的多少初步判断α-地贫的临床分型。 相似文献