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1.
目的构建小鼠脂氧素A4受体同源基因(LRHG)的真核表达载体,克隆后转染小鼠肾小球系膜细胞,观察LRHG编码的脂氧素A4受体样蛋白(LRLP)在系膜细胞中的表达.方法应用PCR方法,以小鼠睾丸cDNA为模板,扩增出LRHG基因片段,插入质粒pGEM-T中,转化入大肠杆菌JM109.扩增阳性重组质粒,经酶切后纯化并测序鉴定目的片段.构建含6×组氨酸(His)基因的真核表达载体pcDNA3.1/LRHG-his,转化入大肠杆菌JM109扩增,酶切后再测序鉴定目的片段,抽提质粒后转染系膜细胞,进行Western blot鉴定LRLP的表达.结果测序鉴定表明,克隆的LRHG序列与GenBank中LRHG原序列100%符合,应用抗6×His抗体进行Western blot鉴定系膜细胞中有LR-LP的表达.结论成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1/LRHG-his,并转染了肾小球系膜细胞,获得了稳定的表达. 相似文献
2.
目的 探讨cTnI、TNFα和CRP在乙型病毒性肝炎心肌损伤中的应用价值及相关研究。方法 序贯搜集整理 4 2 0例乙肝住院和门诊患者的ALT和TBIL资料检测 339例cTnI,分为cTnI阳性组和阴性组 ,按随机选出标本检测TNFα和CRP。结果 cTnI总阳性率为 16 2 % (5 5 / 339)。急性、慢性轻度、慢性中度、慢性重度及肝炎肝硬化患者cTnI阳性分别为 18 5 % (5 / 2 2 )、 11 5 % (17/ 135 )、 19 5 % (17/ 70 )、 2 4 5 % (12 / 3)和 16 7%(4 / 2 0 ) ,均大于正常对照组。除慢性重度和慢性轻度差异有显著性意义外 (P =0 0 2 1) ,余各型肝炎差异均无显著性意义。其中 ,cTnI阳性组和cTnI阴性组患者 ,ALT、TBIL、TNFα和CRP与正常对照组相比差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,cTnI阳性组与阴性组相比差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论 乙型病毒性肝炎的心肌损伤程度与患者临床类型有关 ,与TNFα、CRP和TBIL有关 ,提示循环免疫炎症因子在乙型病毒性肝炎心肌损伤中起重要作用 相似文献
3.
目的:研究心肌细胞培养微环境对骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化成心肌样细胞的影响.方法:取SD大鼠骨髓,通过贴壁法进行骨髓间充质干细胞培养,经多次传代后获得较纯的MSCs.用5-氮胞苷(5-aza)进行诱导分化,实验组为在玻片上的5-aza干预的MSCs移入到心肌细胞培养环境中;对照组为5-aza干预的MSCs.显微镜下观察两组形态变化,并通过免疫组化鉴别心肌心肌特异蛋白Desmin和肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)表达及其出现时间的早晚.结果:对照组MSCs诱导后10天可见细胞由原来扁平多角形变成长梭形,15天后部分细胞体明显增粗,可见到有些细胞间有融合样情况发生,20天左右类似肌管样细胞出现.而实验组在17天左右可以看到类似心肌管样细胞.免疫组化表明实验组的阳性结果出现的时间比对照组要早.结论:心肌细胞培养环境对骨髓间充质干细胞定向分化成心肌样细胞有促进作用. 相似文献
4.
Qian Yanning 《南京医科大学学报(英文版)》2000,14(1)
Recently,ithasbeenknownthatimmunesystem,especiallycytokines,playsimportantroleinprovokingsurgicalstressresponse[1].Tumornecrosisfactor-α(TNF-α)andinterleukin-6(IL-6)arepossiblyinvolvedinthisresponse[2-4].Toinvestigatethemechanismofsurgicalstrssresponse,wemeasuredtheperioperativechangesofplasmaTNF-αandIL-6levelsinpatientsundergoingupperabdominalsurgery.MaterialsandMethodsThemethodologyandstudygroupsweredescribedpreviously[5],briefly,thirtyadultpatients(ASAphysicalstatusand)undergoingup… 相似文献
5.
6.
用抗补体法检测循环免疫复合物(CIC)敏感性较高,且无需特殊仪器和试剂。我们参照Johnson等方法(Lancet I,762,1975)加以改良,建立了以下方法。1.豚鼠补体效价滴定:取1∶50稀释豚 相似文献
7.
目的:研究外环境对骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)定向分化成心肌样细胞的影响。方法:取SD大鼠骨髓,通过贴壁法进行MSCs培养,经过多次传代后获得较纯的MSCs。用5-氮胞苷进行诱导分化,显微镜下观察其形态变化,通过RT-PCR鉴定心肌特异基因心房利尿肽和脑钠肽表达。实验分Ⅰ组为在玻片上的5-氮胞苷干预的MSCs移入到心肌细胞培养环境中;Ⅱ组为5-氮胞苷干预的MSCs;Ⅲ组为玻片上未用5-氮胞苷干预的MSCs移入到心肌细胞培养环境中;Ⅳ组为未用5-氮胞苷干预的MSCs。显微镜下观察4组形态变化,并通过免疫组化鉴别结蛋白和心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)表达及其出现时间的早晚。结果:RT-PCR显示诱导6周后有心房利钠肽,脑钠肽的表达。Ⅱ组MSCs诱导后10d可见细胞由原来扁平多角形变成长梭状,15d后部分细胞胞体明显增粗,可见到有些细胞间有融合样情况发生,20d左右类似肌管样细胞出现;而Ⅰ组在17d左右可以看到类似肌管样细胞;Ⅲ,Ⅳ组未见上述形态改变。免疫组化表明Ⅲ,Ⅳ组未见阳性细胞出现;Ⅰ,Ⅱ组可见阳性结果,且Ⅰ组阳性结果出现的比Ⅱ组更早。结论:MSCs在体外的化学诱导物条件下可以诱导分化成心肌样细胞,心肌细胞培养环境对其定向分化成心肌样细胞有促进作用。 相似文献
8.
陈子庆 《国外医学:内科学分册》1980,(9)
作者用多种分化标记观察了50例急性粒细胞性白血病(简称 AML)包括急性早幼粒细胞性白血病(APL)的髓性白血病细胞,29例急性粒单核细胞性白血病和急性单核细胞性白血病(AMMOL 及AMOL),15例慢性粒细胞性白血病(CML)慢性期,22例慢性粒细胞性白血病急变,233例淋巴样细胞恶性病变包括70例急性淋巴细胞性白血病(ALL)、137例淋巴瘤和26例慢性淋巴细胞性白血病(CLL)。很多 APL 和半数过氧化物酶阳性的白血病,有C_2受体、Fcγ受体和髓样抗原。而几乎所有过氧化 相似文献
9.
IL-2受体α链内单克隆抗体相关的CD25存在于活化的T淋巴细胞、B淋巴细胞和单核巨噬细胞膜上[1],其能以可溶的形式从细胞膜表面释放到血液中,此时其称为可溶性IL-2受体(SIL-2R)。1985年Rubin等发现。正常人血清和体液中含有少量的SIL-2R,在某些疾病时其含量可以明显升高,并随疾病的痊愈而下降[2]。SIL-2R与T淋巴细胞活化、免疫调节密切相关,由于这种实验方法具有取材方便、易于检测的 相似文献
10.