Rock-1的表达对体外宫颈癌细胞侵袭能力的影响

目的 探讨Rock-1的表达对宫颈癌侵袭能力的影响.方法 采用RT-PCR和Westernblot方法检测正常宫颈组织、宫颈癌细胞株Hela及其以Rho激酶特异性抑制剂Y-27632处理后的Rock-1和磷酸化cofilin表达变化.并用Transwell小室体外侵袭方法,检测Y-27632处理前、后Hela细胞体外侵袭能力的变化.结果 宫颈癌细胞株Hela细胞中,Rock-1和磷酸化cofilin的表达量均高于正常宫颈组织(P＜0.05).不同浓度的Y-27632阻断Rock-1作用后,Hela细胞中磷酸化cofilin的表达量及体外侵袭能力降低(P＜0.05).结论 Rock-1在宫颈癌细胞中的表达高于正常宫颈组织;抑制Rock-1的表达能降低宫颈癌细胞株Hela细胞的体外侵袭能力.     

组蛋白乳酸化修饰在结直肠癌发展中作用的研究进展

<正>结直肠癌(colorectal cancer, CRC)是一种常见的肠道恶性肿瘤,据统计,每年约有180万例新发病例和90万人死亡^[1-2]。CRC的发病率和死亡率在全部恶性肿瘤中分别位于第二位和第四位,是全世界第三大高发癌症。尽管CRC在早期局部阶段可以治愈,但仍有25%的患者转化为转移性CRC,其5年生存率仅约为14%^[3]。虽然医学技术得到了不断的发展,手术、化疗、放疗等治疗手段不断改进,但是CRC的预后仍然不理想。因此,     

欧当归内酯A对人胶质瘤细胞U251细胞凋亡及自噬的影响

目的 探讨欧当归内酯A(LA)对人胶质瘤细胞U251凋亡及自噬的影响。方法 将对数生长期的U251细胞随机分为空白组、30μmol·L^-1LA组、60μmol·L^-1LA组、90μmol·L^-1LA组,分别用含有0、30、60、90μmol·L^-1的LA培养基培养24、48、72 h,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测4组细胞的增殖能力,应用流式细胞术检测4组细胞培养24 h时的细胞凋亡率。将对数生长期的U251细胞分为空白组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、90μmol·L^-1LA组、30μmol·L^-1LA+3-MA组、60μmol·L^-1LA+3-MA组、90μmol·L^-1LA+3-MA组,空白组不加LA和3-MA,其余5组分别加入含0、90、30、60、90μmol·L^-1 LA和1、0、1、1、1 mmol·L^-1 3-MA的培养基培养24 h,采用CCK-...     

离子导入对罗替戈汀体外渗透速率的影响

 目的 研究脉冲电流占空比、电流强度和药物浓度对罗替戈汀离子导入的渗透速率的影响。 方法 采用离子导入作为促透方法,分别测定不同占空比、电流强度和药物浓度下的盐酸罗替戈汀在离子导入后接受室溶液的浓度,计算它们的稳态透皮速率。 结果 固定药物质量浓度为 1.4 g·L^-1 ,电流强度为 0.5 mA·cm^-2 ,占空比为 1 ∶ 2 时稳态透过速率达到 93.74 μg·cm^-2·h^-1 ,而 1 ∶ 1 时达到 24.98 μg·cm^-2·h^-1 ;固定药物质量浓度为 1.4 g·L^-1 ,占空比为 1 ∶ 2 ,当电流强度由 0.125 mA·cm^-2 提高到 0.5 mA·cm^-2 时,稳态透皮速率由 3.03 增至 93.74 μg·cm^-2·h^-1 ;固定电流强度为 0.5 mA·cm^-2 ,占空比为 1 ∶ 2 ,药物质量浓度由 0.5 g·L^-1 提高到 1.4 g·L^-1 时,稳态透皮速率由 7.96 增至 93.74 μg·cm^-2·h^-1 。 结论 脉冲直流电占空比为 1 ∶ 2 时可以有效消除皮肤极化现象;且在漏槽条件下,罗替戈汀离子导入的渗透速率均随着电流强度和药物浓度的增大而增大,但并不是严格的线性关系。     

自分泌运动因子对EC9706、Eca109及EC-1细胞丝切蛋白磷酸化的影响

目的:探讨自分泌运动因子(AMF)对食管鳞状细胞癌细胞中丝切蛋白磷酸化水平的影响.方法:构建真核表达载体pEGFP-Cl-AMF和pcDNA3.1(+)-AMF,脂质体法转染食管鳞状细胞癌细胞EC9706、Eca109及EC-1,荧光显微镜观察EGFP-AMF融合蛋白在细胞中的定位,RT-PCR和Western Blot法检测转染细胞中AMF mRNA和蛋白的表达,Western Blot检测转染前后细胞中磷酸化丝切蛋白表达的变化.结果:EGFP-AMF融合蛋白均定位于3种细胞的胞质中;转染pcDNA3.1(+)-AMF、未转染及转染pcDNA3.1(+)的EC9706、Eca109及EC-1细胞中AMF mRNA表达(F分别为411.516、475.759和144.857,P均<0.001)及磷酸化丝切蛋白的表达(F分别为40.482、67.125和498.219,P均<0.001)差异均有统计学意义,转染pcDNA3.1(+)-AMF的细胞中AMF mRNA及磷酸化丝切蛋白的表达均较未转染和转染pcDNA3.1(+)的细胞显著增高(P<0.05).结论:AMF能够提高食管鳞状细胞癌细胞株丝切蛋白磷酸化水平.     

应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体

【摘要】目的构建铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn superoxide dismutase, SOD1）-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法（SOEing）分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因,然后将2段基因拼接起来,得到SOD1-G93A基因,并克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体上。结果成功扩增出SOD1-G93A基因,测序结果与GenBank完全一致;对重组质粒SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)进行双酶切鉴定,测序结果与预期完全一致。结论成功构建了SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)真核表达载体。     

PGAM1和Ki67在脑胶质瘤中的表达及意义

目的 探讨脑胶质瘤组织中磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)和Ki67蛋白的表达情况及其与临床病理特征的相关性.方法 收集2014年1月—2018年12月行手术治疗并经病理确诊为脑胶质瘤的83例患者肿瘤组织标本和10例正常的脑组织标本(对照组).对标本进行HE染色,观察脑组织的病理形态变化,通过免疫组织化学方法检测脑组织中PGAM1和Ki-67蛋白的表达情况,分析其表达与患者临床病理特征的关系.结果 HE染色结果显示对照组脑组织细胞分布均匀,未见异型性细胞,脑胶质瘤组随着级别升高,细胞数量增多,细胞异型性也越明显.免疫组织化学方法检测结果显示,两组脑组织中PGAM1和Ki-67蛋白的表达差异有显著性(χ2=21.029、28.105,P<0.05).PGAM1和Ki67表达与肿瘤病理分级密切相关,高级别胶质瘤组织中PGAM1和Ki67蛋白的表达显著高于低级别胶质瘤组织(χ2=14.906、20.415,P<0.05),与患者性别、年龄及肿瘤原发位置无关(P>0.05).脑胶质瘤组织中PGAM1高表达、低表达组组间Ki67阳性指数比较差异具有显著性(Z=-3.038,P<0.05).Kaplan-Meier分析结果显示,脑胶质瘤组织中PGAM1和Ki67表达水平越高,患者的总生存期越短(χ2=4.363、11.370,P<0.05).结论 PGAM1可能参与脑胶质瘤的发生发展过程,有望作为判断脑胶质瘤预后的指标和潜在的治疗靶点.