重组人白细胞介素—12在昆虫细胞中的表达

采用含ｈＩＬ－１２ｐ３５和Ｐ４０两个亚基基因的重组质粒Ｐ２Ｂａｃ－ｈＩＬ－１２ｐ３５ｐ４０与野生型杆状病毒通过Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ膜融合法进行同源重组，产生的重组籽状病毒感染培养的昆虫细胞Ｓｆ９和Ｓｆ２１，进行重组蛋白的表达。用ｒｈＩＬ－１２酶标试剂盒检测，证实ｒｈＩＬ－１２的表达峰值约为５ｍｇ／Ｌ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示２条重组蛋白条带，分子量为８７ｋｕ和４０ｋｕ。ＰＨＡ淋巴细胞增殖试验显示，重组     

肝硬化失代偿期血小板功能与表面α－颗粒膜蛋白变化

２４例肝硬化失代偿期患者ＰＬＴ、ＰＡｄＴ、ＰＡｇＴ均显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），ＧＭＰ－１４０分子数／血小板显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０５），脾切后肝硬化与未切脾肝硬化两组之间以及消化道出血与无消化道出血两组之间均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。说明肝硬化失代偿患者血小板数量减少、功能低下以及ＧＭＰ—１４０含量增高，血小板在体内处于激活状态。     

人IL－8酶联免疫测定法在白血病标本检测中的应用

采用酶标ＥＬＩＳＡ夹心法，建立了一种简便、灵敏、特异的检测标本中ＩＬ－８含量的方法，其检测下限达１３．７ｐｇ／ｍｌ。运用此法检测了２０例正常人血浆标本、３０例白血病病人血浆标本和１１例白血病病人脑脊液标本，发现白血病病人标本中ＩＬ－８含量明显高于正常人标本（Ｐ＜０．０５），为临床和科研上检测标本中ＩＬ－８含量提供了一个手段。     

重组人白细胞介素-12在昆虫细胞中的表达

采用含hIL－12P35和P40两个亚基基因的重组质粒ρ2Bac－hIL－12ρ35ρ40与野生型林状病毒通过Lipofectin膜融合法进行同源重组，产生的重组杆状病毒感染培养的昆虫细胞Sf9和Sf21，进行重组蛋白的表达。用rhIL－12酶标试剂盒检测，证实rhIL－12的表达峰值约为5mg／L．SDS－PAGE显示2条重组蛋白条带．分子量约为87ku和40ku。PHA淋巴母细胞增殖试驻显示．重组蛋白对淋巴母细胞有一定的增殖能力，并对IL－2的增殖作用有相加性的增强效应。     

大肠杆菌表达rhIL—8的纯化和生物学活性鉴定

高志昕应用钙盐沉淀法将ｈＩＬ一８重组质粒ＰＨＮＰ１０１转化感受态大肠杆菌ＨＢ１０１，转化菌经扩增培养，其包涵体及胞浆内均发现有重组蛋日的表达（约１０：１）。表达蛋白经初步分离，肝素柱、离子交换柱和凝胶柱进一步纯化，获得了高纯度的ｒｈＩＬ—８（＞９５％）。纯化的中ＩＬ—８在新西兰免体内白细胞动员试验中显示了较高的生物学活性硕士研究生＊导师脉采血，计数其外周血白细胞总数。对照组静脉注射等体积灭菌生理盐木，并于相同的时间点干血检查。２结果２．１重组质拉ｐＨＮＰ１０１转化ＨＢ１０１细菌：转化菌可在含１００ｍｇ／Ｌ氨苄青霉素的琼脂平板上生长并形成定落．空日质粒转化细菌则不能生长。２．２纯化ｒｈＩＬ——８的ＳＤＳ—ＰＡＧＥ：成熟ｈＩＬ——８是一低分子蛋曰，分子量约为１０ｋｕ．初步分离的ｒｈＩＬ——８经纯化后其纯度逐步提高（＞９５％），于电泳图谱上１０ｋｕ处显示单一条带（附图）。２．３纯化ｒｈＩＬ——８的ＥＬＩＳＡ检测；ｈＩＬ——８ＥＬＩＳＡ检测结果显示上述纯化后的蛋白为特异性ｒｈＩＬ——８，其含量约为２５ｍｇ／Ｌ。２．４ｒｈＩＬ——８快速募集白细胞进人外周血循环：在静注，ｒｈＩＬ——８（１０μｇ／ｋｇ）５ｍｉｎ后，兔外     

含人IL—12基因的重组质闰p2Bac—hIL—12p35p40的构建

用ＰＣＲ技术克隆ｈＩＬ－１２ｐ３５和ｐ４０两个亚基的ｃＤＮＡ，经酶切反应和琼脂电泳，获得的ｐ３５和ｐ４０基因的大小分别为０．７７ｋｂ和１．１ｋｂ，ＳＫ质粒酶切后和ｐ３５，ｐ４０片段分别进行连接，形成ＳＫ＾＋－ｐ３５和ＳＫ＾＋－ｐ４０重组质粒，再经酶切反应，ｐ３５，ｐ４０片段先后连接至ｐ２Ｂａｃ质粒中，形成同时含有ｈＩＬ－１２两个亚基因的重组质粒ｐ２Ｂａｃ－ｈＩＬ－１２ｐ３５ｐ４０，ＳＫ＾＋－ｐ３５     

大肠杆菌表达rhIL—8的纯化和生物学活性鉴定

应用钙盐沉淀法将ｈＩＬ－８重组质粒ｐＨＮＰ１０１转化感觉态大肠杆菌ＨＢ１０１，转化菌经扩增培养，其包涵体及胞浆内均发现有重组蛋白的表达（约１０：１），表达蛋白经初步分离，肝素柱，离子交换柱和凝胶柱进一步纯化，获得了高纯度的ｒｈＩＬ－８（〉９５％），纯化的ｒｈＩＬ－８在新西兰兔体内白细胞动员试验中显示了较高的生物学活性。     

内镜下皮圈套扎治疗食管静脉曲张18例报告

采用内镜下发圈套扎治疗食管静脉曲张18例，其中15例为急诊止血治疗，平均每人每次音扎6.7点。术后1年、18例均未有再出血及并发症。提示内镜下皮圈套扎治疗食管静脉曲张疗效显著。