HPLC-ELSD法测定葛兰心宁软胶囊中绞股蓝皂苷 XL IL 的含量

目的：建立以HPLC-ELSD法测定葛兰心宁软胶囊中绞股蓝皂苷XL IX含量的方法。方法色谱柱为Kromasil C18（250 mm ×4．6 mm,5μm）,流动相为乙腈—水（35∶65）,检测器为蒸发光散射检测器,流速2．8 L· min－1,漂移管温度105℃。结果绞股蓝皂苷XL IL的线性良好,Y（峰面积）＝1．56X＋5．25,r＝0．999,平均回收率（ n＝6）为101．56％,绞股蓝皂苷XL IX在0．513～10．254μg范围内线性关系良好。。结论该方法专属性强、重复性良好,可用于葛兰心宁软胶囊的质量控制。     

非手术治疗腰椎间盘突出症117例分析

目的观察综合保守疗法对腰间盘突出症的临床疗效。方法回顾性分析117例腰间盘突出症非手术治疗患者的临床资料。结果本组117例,治愈51例,显效34例,好转20例,无效12例,总有效率89.8%。结论综合保守疗法对腰间盘突出症的疗效满意,能明显缓解症状提高生活质量,是一种切实可行的方法。     

强力定眩胶囊 HPLC 特征图谱研究

目的：应用 HPLC 法建立强力定眩胶囊的特征图谱,提高其质量控制水平。方法采用 SHISEIDO MGⅡC18色谱柱,以乙腈（A）—水（B）为流动相,进行梯度洗脱,流速为1．0 mL·min －1,检测波长为280 nm。结果强力定眩胶囊各成分得到了较好的分离,以阿魏酸为参照物,确定了10个共有色谱峰。结论该方法准确、重现性好,可同时分离强力定眩胶囊中的多种成分,可对制剂进行整体的评价并提高该制剂的内在质量。     

融合IL2的慢病毒实现对T细胞的高效基因转导

目的 制备融合IL2的慢病毒以提高对人原代T淋巴细胞的转导效率.方法 将白细胞介素-2(IL2)基因定向克隆至水疱性口炎病毒G蛋白(VSV-G)编码基因5′端,构建新型慢病毒包装辅助质粒pMD2.IL2-G.使用不同剂量pMD2.IL2-G进行慢病毒包装,应用免疫印迹和ELISA比较病毒滴度,流式细胞术检测病毒对T细胞...     

人源抗HER2单链抗体/鱼精蛋白截短体融合蛋白的表达、纯化及鉴定

在人类乳腺癌组织中人类表皮生长因子受体2 (HER2)和受体趋化因子4(CXCR4)的表达成正相关,由于HER2与CXCR4/CXCL-12轴在乳腺癌骨转移中的重要作用,使其成为可供选择的肿瘤治疗靶点.本研究将HER2单链抗体(ScFv)与鱼精蛋白截短体(tP)融合,以期获得同时具有抗原与核酸结合活性的ScFv-tP融合蛋白,核酸与该融合蛋白结合后,有望实现小分子干扰RNA( siRNA)的靶向递送,对HER2与CXCR4/CXCL-12轴进行RNA干扰(RNAi),为新型抗肿瘤药物应用于临床提供资料.     

陕西野生薄荷挥发油化学成分的气相色谱-质谱分析

目的 利用气相色谱-质谱(GC-MS)法对采自陕西省的野生薄荷挥发油化学成分进行分析。方法 采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,取适量配制成溶液,用GC-MS进行分析。色谱柱为HP-FFAP石英毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm),进样口温度为220℃,柱温为程序升温,初始温度为65℃,保持3 min,以5℃/min的速率升温至230℃,保持5 min,载气为N2,流速为1.5 mL/min,分流比为10∶1。质谱条件,接口温度为230℃,离子源温度为220℃。结果 共鉴定了5批野生薄荷挥发油中的67个化学成分,主要成分有薄荷醇、左旋香芹酮和乙酸松油酯。结论 生长环境、居群和采收时间不同,陕西野生薄荷挥发油化学成分的种类和相对含量差异很大。     

用于小鼠及兔源IgG的通用型二抗PA/G-HRP融合蛋白的真核表达及活性检测

目的 制备可与小鼠及兔来源IgG结合的通用型二抗,并用于多种免疫检测实验.方法 全基因合成金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)、链球菌蛋白G(SPG)与辣根过氧化物酶(HRP)融合基因片段,定向克隆至真核表达载体pcDNATM3.1骨架中,瞬时转染入人胚肾HEK293F细胞进行表达.通过SDS-PAGE、Western bl...     

综合方法治疗复杂性区域疼痛综合征23例临床分析

目的探讨复杂性区域疼痛综合征(CRPS)的临床治疗方法。方法对本院23例CRPS患者采用物理治疗、药物治疗、交感神经阻滞和针灸治疗等综合方法治疗,观察治疗效果。结果本组患者显效9例,有效11例,无效3例,总有效率87%。结论采用综合方法治疗CRPS临床效果满意。     

构建稳定表达病毒相关RNA的真核细胞株及其对抗肿瘤免疫促凋亡分子的影响

目的:构建稳定表达病毒相关RNA（virus-associated RNA,VA RNA）的293F-VA细胞株,并探讨其对靶向HER2阳性肿瘤的免疫促凋亡分子表达水平的影响。方法:采用PCR方法,扩增含VA RNA的功能序列,克隆入PiggyBac转座系统质粒,将VA RNA编码序列转入293F细胞中,经过抗性筛选和流式细胞仪鉴定,得到293F-VA细胞株。将萤光素酶、红色荧光蛋白及免疫促凋亡分子编码质粒分别转入293F-VA细胞株或亲本293F细胞株,通过萤光素酶活力检测和Western Blot实验,比较两种细胞株对外源目的蛋白表达水平的影响。结果:成功构建了PiggyBac-VA质粒。共转染PiggyBac-VA质粒可以明显提高细胞内Fluc蛋白的表达水平（P<0.05）。VA RNA编码序列通过PiggyBac转座系统转入293F细胞中,获得293F-VA细胞株。与293F亲本细胞相比,293F-VA细胞株将萤火虫萤光素酶Fluc蛋白的表达水平提高363.9%（P<0.05）;对海肾萤光素酶Rluc蛋白及红色荧光蛋白mCherry的表达均表现出3倍左右的提高（P<0.05）。293F-VA细胞株不仅能够提高免疫促凋亡分子e23-Fc-Fdt-tBid在细胞内的表达水平,并且显著增加目的蛋白向细胞外分泌的水平,较293F亲本细胞提高4.2倍（P<0.05）。结论:建立了稳定表达VA RNA的细胞株293F-VA,该细胞株能够显著提高抗肿瘤免疫促凋亡分子的表达水平。