NR4A1 DNA 结合域的表达纯化

目的：寻求一种核受体家族蛋白NR4A1 DNA结合域(NR4A1 DNA binding domain,NR4A1-DBD)表达纯化的 方法。方法：构建融合蛋白PET28a-NR4A1-DBD表达载体,分别通过镍亲和层析、阳离子交换层析及凝胶过滤的方法 对目的蛋白进行纯化。结果：PET28a-NR4A1-DBD蛋白在低温诱导(24 ℃)时多以可溶性形式存在,通过此纯化,可达 到每升培养基产生2~3 mg蛋白,纯度高达95%以上。结论：镍亲和层析是一种可靠、实用的蛋白表达纯化方法,后续 使用阳离子交换层析及凝胶过滤可以进一步提高蛋白纯度。