m6A甲基化对邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯诱导小鼠睾丸间质细胞自噬的作用

目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]致小鼠睾丸间质(TM-3)细胞自噬中m6A甲基化的作用。方法 将对数生长期的TM-3细胞暴露于浓度梯度(0、5、10、20、40、80μmol·L^-1)的m6A甲基化抑制剂3-脱氮腺苷(3-Deazaadenosine,DAA)24 h,CCK-8法检测细胞活力,确定3-脱氮腺苷的染毒剂量后,梯度稀释为对照组(0μmol·L^-1)、MEHP低剂量组(200μmol·L^-1)、MEHP中剂量组(400μmol·L^-1)、MEHP高剂量组(800μmol·L^-1),将TM-3细胞分别暴露于0、200、400、800μmol·L^-1MEHP,40μmol·L^-1DAA+400μmol·L^-1MEHP和40μmol·L^-1DAA染毒组24 h,光镜下观察TM-3细胞形态。CCK-8法检测细胞存...     

睾丸癌铁死亡相关基因的生物信息学分析

目的 应用生物信息学方法分析睾丸癌与正常组织之间的铁死亡相关差异基因和枢纽基因,为睾丸癌的预后和治疗提供新的思路和生物标记物。方法 从TCGA和GTEx数据库下载睾丸癌组织（n=148）和正常组织（n=165）的转录组数据。采用R语言对样本进行主成分分析（PCA）,获取睾丸癌基因表达矩阵并筛选差异表达基因,并与铁死亡数据库（FerrDb）中483个铁死亡背景基因取交集基因,获取睾丸癌铁死亡差异表达基因并进行基因本体（gene ontology,GO）分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）分析;采用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质相互作用（PPI）网络,筛选前10个差异基因的关键枢纽基因并绘制基因热图;用GEPIA数据库分析枢纽基因在睾丸癌和正常组织的表达水平。从GEO数据库下载基因芯片GSE8607的转录组数据,用limma包进行差异分析,并提取前10个差异基因的表达谱数据,绘制睾丸癌相关的铁死亡差异基因热图进行验证。结果 差异表达分析共获得69个睾丸癌铁死亡相关差异基因,信号通路主...     

MEHP抑制小鼠睾丸间质细胞脂噬对睾酮合成的影响

目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)脂噬水平以及对睾酮合成的影响。方法 将对数生长期的TM-3细胞分别暴露于0、200、400、800μmol·L^-1的MEHP中,分别为对照组、MEHP低剂量组、MEHP中剂量组、MEHP高剂量组。油红O染色及流式细胞术检测细胞脂滴水平,免疫荧光共定位检测细胞脂噬水平,游离胆固醇检测试剂盒检测细胞中游离胆固醇含量,ELISA检测上清液中的睾酮水平,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62、SIRT1、FOXO1、Rab7的蛋白表达水平。结果 与对照组相比,MEHP低剂量组脂滴含量、睾酮含量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及P62蛋白表达水平均无明显变化(P均>0.05);MEHP中、高剂量组脂滴含量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及P62均升高(P均<0.05),游离胆固醇含量和睾酮的含量均降低(P均<0.01)。与对照组相比,MEHP低、中、高剂量组TM-3细胞SIRT1、FOXO1、Rab7蛋白表达...     

邻苯二甲酸单丁酯通过Caspase-3/GSDME通路诱导睾丸间质细胞焦亡

目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯（monobutyl phthalate,MBP）诱导睾丸间质细胞（TM-3细胞）焦亡及其可能的发生机制。方法 用浓度为0、2.5、5、10 mmol·L-1MBP（对照组,低剂量组,中剂量组,高剂量组）染毒对数生长期细胞24 h后,光学显微镜观察细胞形态学变化;微量酶标法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）的释放率;荧光显微镜检测PI阳性细胞比例;Western blot检测焦亡相关蛋白Caspase-3、GSDME的相对表达水平。将对数生长期的TM-3细胞暴露于浓度梯度（0、2.5、5、10、20μmol·L-1）的Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO中24 h,CCK-8法检测细胞活力,确定Ac-DEVD-CHO染毒剂量。Ac-DEVD-CHO作用于细胞验证MBP诱导TM-3细胞焦亡的机制。结果 与对照组相比,各染毒组细胞LDH的释放率、PI阳性细胞比例以及Caspase-3和GSDME蛋白的相对表达水平均升高（P均<0.05）。当Ac-DEVD-CHO浓度为5.0μmol·L-1时,细胞存活率为99.17...     

早发型子痫前期患者血清miR-152,miR-375水平与妊娠结局关系

目的：探讨早发型子痫前期患者血清miR-152、miR-375水平与妊娠结局关系。方法：回顾性收集2017年8月-2019年8月在本院住院分娩的早发型子痫前期患者88例(病例组)和规律产前检查健康孕妇78例(对照组),比较两组一般资料，通过随访妊娠结局将病例组分为不良组和良好组；采用实时荧光定量PCR检测两组血清miR-152、miR-375相对表达水平；多因素Cox回归分析早发型子痫前期患者发生不良妊娠结局的影响因素；受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-152、miR-375对早发型子痫前期患者发生不良妊娠结局的预测价值。结果：病例组血清miR-152(7.56±2.42)、miR-375(4.72±1.02)表达高于对照组(1.00±0.26、1.10±0.25)(均P<0.05),病例组中发生不良妊娠结局26例(29.6%),妊娠结局不良患者血清miR-152、miR-375(9.39±2.78、5.98±1.53)表达高于良好患者(6.79±2.06、4.19±0.51)(均P<0.05)。病例组收缩压、舒张压、血清miR-152,miR-375是患者发生不...