HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155真核重组载体构建

目的分别构建人乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白、羧基端截断的中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,以便进一步研究其转录激活功能及对宿主细胞信号传导通路的影响。方法设计合成3对寡核苷酸引物,以adr亚型HBV质粒pHBVDNA为模板,采用PCR法分别扩增HBVX基因、MHBst78与MHBst155编码基因片段;用HindⅢ,KpnⅠ双酶切HBVⅩ基因;用HindⅢ和BamHⅠ双酶切MHBst78与MHBst155编码基因片段后,分别定向插入到真核表达载体pcDNA3.1相应酶切位点,转化宿主菌JM109,提取质粒,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果酶切重组体显示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致。结论成功构建了HBVX基因、羧基端截断的HBV中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,为进一步研究HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155对宿主细胞信号转导通路的影响奠定基础。     

针刺治疗50例血管性头痛疗效观察

血管性头痛是临床常见的一种疾病，单纯西药治疗效果不佳．且停药后易复发。笔者采用中医针刺治疗50例，取得一定的疗效。现报告如下：     

用异体牙冠修复后牙牙冠大面积缺损的初步体会

1991年以来,我们采用异体牙冠修复后牙牙冠严重的缺损,收到良好的效果,现将经过一年以上随访观察的6个病例修复情况报道如下。临床资料下颌第一磨牙3例,上颌第一磨牙2例,上颌第2双夹牙1例。牙冠缺损均在2/3以上。各壁均在龈上,全部经根管治疗观察2周无不良反应后,采用2个以上桩针固位修复。材料来源:1.正畸时拔除的异体牙。2.牙周病无法保留而拔除的牙;3.无功能而拔除的牙;4.外伤性根折而牙冠完整,无法再植或粘接的离体牙。     

不依从行为致癫痫治疗失败的原因分析

目的 分析造成癫痫患不依从行为的原因及提高依从行为的措施。方法 采用访问调查的方法，对120例患进行调查，分析其不依从行为致癫痫治疗失败的原因。结果 主要原因为：对自身疾病认识不足31．02％，治疗方法欠妥19．25％，对医嘱了解不够13．37％，治疗过程中出现新问题10．70％。结论 应加强癫痫病知识的健康教育，提高患对疾病的认识，提高到正规医疗单位就医的意识，建立社会家庭双重监督机制，从而提高癫痫患的治疗依从性，提高患的生活质量。     

荧光定量逆转录聚合酶链反应在HCV感染检测中的应用

目的 了解荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)在丙型肝炎病毒(HCV)感染中的临床应用价值。方法 用FQ-RT-PCR检测63份怀疑HCV感染的临床样本，并同时采用酶联免疫吸附试验(ELIA)检测抗HCV，用全自动生化检测仪测定丙氨酸转氨酶(ALT)水平，了解样本中HCV-RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果 63份样本中有40份HCV-RNA含量高于80拷贝／ml，57份抗HCV阳性，26例ALT异常，经统计分析每两者间具有明显相关性。结论FQ-RT-PCR技术检测HCV-RNA特异性强，灵敏度高，具有良好的应用价值。     

PCR定性检测转基因大豆的探讨

目的应用定性PCR方法检测大豆中转基因成分。方法以大豆凝集素（lection）基因为内源参照基因，设计合适引物，对转基因植物中常用的CaMV 35S启动子进行PCR扩增。结果在转基因大豆中扩增出195bp的CaMV 35S启动子片断。结论定性PCR技术是进行转基因食品检测的有效手段。     

荧光分光光度法测定水产品中烷烃类、芳烃类污染物

目的：对使用荧光分光光度法测定水产品中烷烃类、芳烃类污染物的方法进行验证,并检测三类样品。方法：通过氢氧化钠-乙醇皂化处理,用正已烷萃取,用石油醚溶解,测量萃取物荧光强度值进行定量。结果：测得标准油在0.00～12.0μg/ml范围内线性关系良好,相关系数0.9999,检出限为0.2 mg/kg,平均回收率90.2%,RSD5.4%。结论：本法准确度、灵敏度高,检出限低,操作稳定性好。     

几种性传播疾病病原体检测芯片的制备

目的 :为了同时多样本检测和鉴别淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体 3种重要的性传播疾病病原体 ,制备了寡核苷酸检测芯片。方法 :针对 3种病原体和荧光素酶基因设计特异的引物和寡核苷酸探针 ,采用硫代和氨基双功能探针修饰技术制备寡核苷酸芯片 ,以荧光标记多重不对称PCR技术为基础 ,通过将单链PCR产物与芯片杂交实现对性传播疾病病原体的检测。结果 :对 10种与待检病原体无关的菌及定量有限稀释的荧光素酶和 3种病原体基因质粒模板进行芯片检测 ,结果表明芯片对待检病原体特异 ,其检测 4种基因的灵敏度均为 5×10 3 拷贝质粒。对 2 4份性传播疾病患者标本进行芯片检测 ,沙眼衣原体感染率为 10 0 % ,与淋病奈瑟球菌混合感染率为 83.3% (2 0 / 2 4 ) ,与传统PCR诊断结果完全一致。在 2 4份标本中 ,淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体三重感染病例芯片诊断为 3例 ,混合感染率为 12 .5 % (3/ 2 4 ) ;而传统PCR诊断为 4例 ,混合感染率为 16 .7% (4/2 4 ) ,两种方法的符合率为 75 %。结论 :该芯片是一种可靠检测 3种病原体的方法 ,它可快速提供有关患者混合感染的情况 ,因而为指导个性化治疗提供及时可靠的诊断依据。     

基因芯片技术鉴定出血性大肠杆菌O157∶H7和霍乱弧菌O139

目的:建立一种同时快速检测肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7和霍乱弧菌O139的基因芯片,并验证该芯片的特异性和敏感性。方法:选择EHEC O157∶H7的产志贺样毒素基因stx1、stx2和β-葡糖醛酸糖苷酶基因(u idA);霍乱弧菌O139的肠毒素A亚单位(ctxA)、毒力协调菌毛A亚单位(tcpA)、糖基转移酶(glycosotransferaseLPSgt)基因序列分别设计引物和探针,反向引物用荧光素Cy3标记,探针在3′端氨基修饰。在优化的PCR和杂交反应条件下,分别进行三重PCR扩增,产物混合后与芯片进行杂交,产生特异性荧光信号,进一步筛选探针。随后将筛选出的探针制备芯片用于检测临床样本。结果:PCR产物在相应探针处均产生特异性杂交信号,临床样本检测结果表明,此芯片比常规细菌学检测方法灵敏。结论:所研制的同时定性检测EHEC O157∶H7和霍乱弧菌O139的基因芯片是特异、灵敏而且快速的,为这两种肠道致病菌感染的快速诊断提供了新的方法。     

全国卫生经济学教学研讨会纪要

笔者徐文思、阎维君记叙了我国第一次卫生经济学教学研讨会的基本内容。来自全国各地院校的卫生经济学老、中、青教师聚集一堂,共研教学,交流经验,对提高教学质量,加强师资队伍建设有着十分重要的意义。会议认为,我国卫生经济学师资队伍已初具规模,但其数量严重不足,素质有待提高,远不能适应事业发展的需要。加强师资队伍建设迫在眉睫。这是提高卫生经济学教学质量的关键。会议还对师资队伍、教材、教学资料建设等方面的问题,提出了不少建设性意见。