骨膜细胞联合BMP成骨作用的实验研究

目的 观察骨膜细胞联合BMP协同成骨作用及其效果，探索骨缺损后骨再生的新方法。方法 采用自体骨膜细胞体外培养、扩增、传代，观察兔骨膜细胞活细胞形态学和功能变化；兔24只随机分四组，切除双侧连同骨膜桡骨1cm，分别置入骨膜细胞＋BMP、骨膜细胞、BMP、空白对照，术后定期进行X线拍片、组织学检查。结果 兔骨膜培养活细胞形态分三期：细胞分裂期、细胞发展期、细胞功能期，细胞传代进化后，其结构与原代细胞无明显差异；骨膜细胞体外培养，大量增殖，其细胞悬液自体移植至骨缺损区能形成骨组织；修复骨缺损能力骨膜细胞＋BMP〉BMP〉骨膜细胞，骨膜细胞移植后表现为在骨缺损端形成骨样组织。类似膜内化骨形成新骨，BMP类似软骨内化骨形成新骨，骨膜细胞＋BMP表现膜内化骨和软骨内化骨两种机制，以前者明显。结论 骨膜细胞或BMP两者均有修复骨缺损的能力，骨膜细胞联合BMP有协同成骨作用，为修复骨缺损的一种理想方法。     

脑出血致应激性溃疡大鼠模型的建立

目的:观察大鼠自体尾静脉血建立尾状核脑出血致应激性溃疡实验动物模型的作用和效果。方法:SD大鼠分为对照组和实验组各10只。用非精确定位穿刺法将实验组大鼠自体尾静脉血200μL注入右脑实质内,72h后处死,观察胃黏膜溃疡发生率,溃疡指数,血清内皮素,血清、脑、胃黏膜的丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD),脑含水量,脑、胃黏膜光镜和电镜的病理变化及超微结构电脑图像定量分析。结果:实验组胃黏膜溃疡发生率为30%,溃疡指数为15,两组血清、脑、胃黏膜的MDA、SOD,脑神经元细胞、胃壁细胞超微结构电脑图像定量分析中的线粒体比表面差异均有统计学意义(P<0.01),脑含水量及胃壁细胞线粒体体积密度差异也有统计学意义(P<0.05)。血清内皮素差异没有统计学意义(P>0.05)。实验组脑、胃组织光镜可观察到组织坏死出血病灶,电镜见部分线粒体肿胀、嵴断裂,内质网稀疏或扩张。结论:200μL自体尾静脉血穿刺注入法可有效达到构建脑出血致应激性溃疡的目的。     

裸鼠过渡异体甲状旁腺移植的初步报道

目的探讨裸鼠过渡异体甲状旁腺移植的方法和效果。方法取即死亡尸甲状旁腺，经深低温、^60Co照射、裸鼠移植过渡等处理，治疗甲状旁腺功能低下症2例。结果裸鼠过渡期10～15d血清甲状旁腺分泌最高，其中1例症状消失，效果为优，1例症状部分消失，效果为良，结论裸鼠过渡异体甲状旁腺移植可以是治疗甲状旁腺功能低下症的的一种方法选择。     

两种内源性内皮素对脑出血应激性溃疡干预作用的对比研究

目的 观察内皮素(ET)抗体、ET受体拮抗剂对大鼠脑出血致应激性溃疡的干预作用,并比较其效果.方法 将SD大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、ET抗体组(C组)、ET受体拮抗剂组(D组),每组10只.用非精确定位穿刺法将实验组大鼠自体尾静脉血200μl注入右脑实质内制备大鼠尾状核脑出血致应激性溃疡模型.B、C、D组分别于尾静脉注射0.2 ml生理盐水、ET抗体、ET受体拮抗剂(阿魏酸钠),每日1次,连用3 d.处死大鼠,观察其胃黏膜溃疡发生率、溃疡指数,血清ET-1,血清、脑、胃黏膜的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),光镜和电镜下观察脑、胃黏膜病理变化并进行超微结构电脑图像定量分析线粒体比表面(Rsv)和体积密度(Vv).结果 制模后,血清ET-1无明显变化;血清、脑、胃黏膜MDA显著升高,SOD显著下降,脑组织含水量也明显升高;脑、胃壁细胞Rsv及胃壁细胞Vv均显著下降(P＜0.05或P＜0.01).B组胃黏膜溃疡发生率为30%,溃疡指数为15,其他组肉眼均未见溃疡灶.与B组比较,C、D组血清、脑、胃黏膜的MDA显著降低.SOD显著升高;C组脑含水量较B组显著下降,差异均有统计学意义(P均＜0.01),C、D组间上述指标差异均无统计学意义.B、C、D组间脑神经细胞、胃壁细胞超微结构电脑图像定量分析中的Rsv、Vv变化及各组间血清ET-1差异亦均无统计学意义.结论 ET抗体、ET受体拈抗剂均可有效减轻大鼠脑出血致应激性溃疡的发生发展,ET抗体的干预效果似乎稍优于ET受体拮抗剂.     

人骨膜细胞体外培养的实验

目的：观察体外培养的人骨膜细胞的形态学特征。方法：实验于2001-01／2003-10广东省粤北人民医院骨科和医学动物实验室完成。采用常规细胞培养法进行人骨膜细胞体外培养，并采用倒置显微镜和电子显微镜观察骨膜细胞生长情况、形态特征及超微结构。结果：①人骨膜培养活细胞光镜下形态：早期新生细胞呈梭形，饱满透明，立体感强；分裂期呈立方形或短柱状；后期由长梭形逐渐变成宽梭和不规则形，分泌功能旺盛。②人骨膜细胞电镜下超微结构：胞体呈梭形，膜面有少量微绒毛状突起，粗面内质网丰富，有大量异噬体等次级溶酶体，线粒体体积较小、基质致密有少量嵴。具有原代细胞生物形态学特征。结论：人骨膜成骨细胞可经体外培养大量增殖，且细胞传代进化后，其形态学结构与原代细胞无明显差异，可用于细胞移植。     

人骨膜细胞体外培养的实验

目的:观察体外培养的人骨膜细胞的形态学特征。方法:实验于2001-01/2003-10广东省粤北人民医院骨科和医学动物实验室完成。采用常规细胞培养法进行人骨膜细胞体外培养,并采用倒置显微镜和电子显微镜观察骨膜细胞生长情况、形态特征及超微结构。结果:①人骨膜培养活细胞光镜下形态:早期新生细胞呈梭形,饱满透明,立体感强;分裂期呈立方形或短柱状;后期由长梭形逐渐变成宽梭和不规则形,分泌功能旺盛。②人骨膜细胞电镜下超微结构:胞体呈梭形,膜面有少量微绒毛状突起,粗面内质网丰富,有大量异噬体等次级溶酶体,线粒体体积较小、基质致密有少量嵴。具有原代细胞生物形态学特征。结论:人骨膜成骨细胞可经体外培养大量增殖,且细胞传代进化后,其形态学结构与原代细胞无明显差异,可用于细胞移植。     

人体恶性肿瘤裸鼠移植药敏试验与PCNA表达的相关性研究

目的 探讨人体恶性肿瘤裸鼠移植瘤药敏试验与ＰＣＮＡ表达的内在联系,方法 新鲜实体肿瘤裸鼠肾包膜下移植３０例,每例２４只ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠,随机分为８组（有１０例只分为５或６组）,每组２只腹腔注射１种抗癌药,１只注射生理盐水对照;测定药敏结果后移植瘤行组织学和ＰＣＮＡ检测。结果 移植瘤１２２８个,其中对照组４００个,呈正生长６０．３％,无生长２０．８％,负生长１８．９％;检测抗癌药１３种种,敏感５１次     

人骨膜细胞体外培养的实验研究与临床应用

目的 :研究体外培养的人骨膜细胞的形态学特征 ;探讨人骨膜细胞自体移植治疗骨不连及骨缺损的临床效果。方法 :常规细胞培养法行人骨膜细胞体外培养 ,观察其形态特征及超微结构 ;经皮注入体外培养的自体骨膜细胞治疗骨不连、骨缺损。结果 :人骨膜培养活细胞早期呈梭形 ,饱满透明 ,立体感强 ;分裂期呈立方形或短柱状 ;后期由长梭形逐渐变成宽梭和不规则形 ,分泌功能旺盛。电镜观察 :胞体呈梭形 ,膜面有少量微绒毛状突起 ,粗面内质网丰富 ,有大量异噬体等次级溶酶体 ,线粒体体积较小、基质致密有少量嵴。有原代细胞生物形态学特征。治疗骨不连、骨缺损 11处 ,治愈率为 73 % ;骨延迟愈合 4处 ,治愈率为 10 0 %。移植后均无明显全身和局部反应 ,12～ 16周达到骨性愈合。结论 :人骨膜成骨细胞可经体外培养大量增殖 ,且细胞传代进化后 ,其形态学结构与原代细胞无明显差异 ,可用于细胞移植。骨膜细胞移植能促进骨不连、骨缺损修复     

体外培养骨膜细胞的实验研究

目的研究体外培养的骨膜细胞的形态学特征。方法采用常规细胞培养法进行骨膜细胞体外培养,并观察其形态特征及超微结构。结果人骨膜培养活细胞光镜下形态:早期新生细胞呈梭形,饱满透明,立体感强;分裂期呈立方形或短柱状;后期由长梭形逐渐变成宽梭和不规则形,分泌功能旺盛。人骨膜细胞电镜超微结构:胞体呈梭形,膜面有少量微绒毛状突起,粗面内质网丰富,有大量异噬体等次级溶酶体,线粒体体积较小、基质致密有少量嵴。具有原代细胞生物形态学特征。结论人骨膜成骨细胞可经体外培养大量增殖,且细胞传代进化后,其形态学结构与原代细胞无明显差异,可用于细胞移植。     

胚胎成纤维细胞和Ⅳ型胶原黏附分选表皮干细胞的比较研究

目的比较以Ⅳ型胶原和胚胎成纤维细胞黏附分选表皮干细胞的效率，探索从皮肤中快速表皮干细胞分选的有效方法。方法使用DispaseⅡ和CollagenaseⅠ混合酶、胰酶分步消化皮肤得到的细胞悬液，实验组用胚胎成纤维细胞，对照组使用Ⅳ型胶原，分别作为黏附基质，在细胞培养板中对表皮干细胞进行黏附筛选，培养5d后统计各组表皮干细胞克隆形成数量，评价筛选效率。结果经抗β-整合素单抗和抗角蛋白K19单抗免疫细胞染色确证形成克隆的细胞是表皮干细胞，在两个细胞密度水平，实验组和对照组培养出的表皮干细胞克隆数量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论使用成纤维细胞分选表皮干细胞与使用Ⅳ型胶原方法分选效率相当，成纤维细胞条件培养液对黏附效率没有影响，但能促进表皮干细胞生长。