三七总皂苷预处理通过激活HIF-1α/BNIP3 线粒体自噬信号通路减少心肌细胞H/R 损伤的机制研究

目的 探索三七总皂苷（panax notoginseng saponins,PNS）预处理心肌细胞减少缺氧/复氧（hypoxia- reoxygenation,H/R）损伤的作用机制。方法 设置对照组（常规培养H9c2细胞）、模型组（H/R损伤的H9c2细胞）、PNS组（加入PNS处理的H/R损伤的H9c2细胞）、二甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol,2-ME2）组（加入2-ME2处理的H/R损伤的H9c2细胞）和PNS+2-ME2组心肌细胞（同时加入PNS和2-ME2处理的H/R损伤的H9c2细胞）,采用酶联免疫吸附法检测心肌细胞损伤,蛋白质印迹法检测线粒体自噬信号通路表达,免疫荧光法检测心肌细胞自噬活性。结果 模型组高于对照组的指标有肌酸激酶（creatine kinase,CK）（0.37±0.05 vs. 2.41±0.66）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）（2.20±0.69 vs. 4.05±1.08）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate amino transferase,AST）（38.17±9.02 vs. 107.83±20.89）、细胞自噬标志物LC3（0.17±0.05 vs. 0.63±0.66）、低氧诱导因子-1α（hypoxic inducible factor-1 α,HIF-1α）（0.22±0.09 vs. 0.66±0.08）和B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B 19kDa相互作用蛋白3（B lymphocytoma-2/adenovirus E1B 19kDa interacting protein 3,BNIP3）（0.15±0.02 vs. 0.59±0.13）,差异均有统计学意义（P<0.05）。PNS组低于模型组的指标有CK（2.41±0.66 vs. 1.55±0.39）、LDH（4.05±1.08 vs. 3.19±0.88）、AST（107.83±20.89 vs. 66.52±11.43）,差异均有统计学意义（P<0.05）;PNS组高于模型组的指标有LC3（0.63±0.66 vs. 0.85±0.23）、HIF-1α（0.66±0.08 vs. 0.91±0.22）和BNIP3（0.59±0.13 vs. 0.82±0.17）,差异均有统计学意义（P<0.05）。2-ME2+PNS组低于模型组的指标有CK（2.41±0.66 vs. 2.08±0.54）、LDH（4.05±1.08 vs. 3.51±0.92）、AST（107.83±20.89 vs. 83.49±19.53）;2-ME2+PNS组高于模型组的指标有LC3（0.63±0.66 vs. 0.70±0.54）、HIF-1α（0.66±0.08 vs. 0.72±0.10）和BNIP3（0.59±0.13 vs. 0.64±0.12）,差异均有统计学意义（P<0.05）。2-ME2组高于模型组的指标有CK（2.41±0.66 vs. 3.62±0.98）、LDH（4.05±1.08 vs. 5.67±1.39）、AST（107.83±20.89 vs. 192.13±28.97）,差异均有统计学意义（P<0.05）;2-ME2组低于模型组的指标有HIF-1α（0.66±0.08 vs. 0.27±0.03）和BNIP3（0.59±0.13 vs. 0.25±0.07）,差异均有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,模型组心肌细胞LC3荧光斑点数明显增加（P<0.05）;与模型组相比,PNS组和2-ME2+PNS组心肌细胞LC3荧光斑点数明显增加,2-ME2组LC3荧光斑点数明显减少（P<0.05）。结论 PNS能够通过激活HIF-1α/BNIP3线粒体自噬信号通路,减少心肌细胞H/R损伤。