左卡尼汀改善非糖尿病维持性血液透析患者胰岛素抵抗

目的探讨左卡尼汀对非糖尿病维持性血液透析(HD)患者胰岛素抵抗的影响。方法41例非糖尿病HD患者为研究对象,20例应用左卡尼汀治疗,另21例作为对照组。治疗方法为静脉注射左卡尼汀(雷卡)1.0g、每次透析结束后静脉注射,观察时间6月。观察指标包括空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和炎症标志物血C反应蛋白(CRP)。结果左卡尼汀治疗6月后,治疗组和对照组空腹血糖无变化,而在治疗组空腹胰岛素和HOMA-IR明显下降,下降差值分别为-10(-35,20)vs-1(-15,20),P=0.03;(-2.8±0.6)vs(-0.4±0.5),P0.01。血CRP在治疗组明显下降,下降差值为(-5.9±1.2)vs(-0.1±0.1)(对照组),P0.01。相关分析显示,血CRP与空腹胰岛素(r=0.56,P0.01)和HOMA-IR(r=0.46,P0.05)呈正相关。结论静脉注射左卡尼汀治疗有效改善非糖尿病HD患者胰岛素抵抗,改善的胰岛素抵抗与改善炎症状态有关,我们的结果对HD患者胰岛素抵抗的治疗提供新的治疗思路。     

维持性血液透析患者血清和透析液对脂肪细胞凋亡的影响

目的 观察维持性血液透析（HD）患者血清及其与常规透析液（CD）或高纯透析液（HPD）联合干预对脂肪细胞凋亡的影响。方法 采集20例HD患者（CD和HPD治疗各10例）血样并分离血清,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α) 水平。分别以HD患者血清（HDPS组）、HD患者血清联合CD（HDPS+CD组）和HD患者血清联合HPD（HDPS+ HPD组）对经体外诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞进行干预,48 h后收集细胞。Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞形态学改变;Annexin-V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡。PCR检测CD和HPD中细菌DNA片段表达。结果 ELISA法检测结果显示,与HPD治疗HD患者比较,CD治疗HD患者血清TNFα水平显著升高（P<0.05）。在HDPS组和HDPS+CD组,荧光显微镜观察可见呈典型凋亡形态学改变的细胞增多,两组细胞凋亡率均显著高于HDPS+HPD组（P<0.05）。PCR检测显示,CD和HPD中细菌DNA表达分别为902.79±60.57和454.87±32.22,两者差异有统计学意义（P<0.05）。结论 HDPS可诱导3T3-L1脂肪细胞凋亡,可能与患者血清TNF-α水平升高有关。与HD患者血清联合CD干预比较,联合HPD干预诱导的脂肪细胞凋亡率较低且HPD中细菌DNA表达较少。     

不同含糖的乳酸盐腹膜透析液对外周血单核细胞线粒体跨膜潜能的影响

细胞凋亡主要是细胞核和染色质的改变 ,研究发现抗凋亡基因Bcl 2位于线粒体内膜意味着凋亡细胞线粒体出现异常。已有一些实验观察到淋巴细胞、胸腺细胞、U937细胞及肝细胞凋亡早期常伴线粒体异常 ,进一步观察发现 ,线粒体跨膜潜能 (ΔΨm)下降常伴有线粒体渗透转移 (PT)肿胀 ,即线粒体PT孔的开放。单核细胞是机体的重要防御细胞 ,已有文献报道不同含糖的乳酸盐腹膜透析液(L PDS)对腹膜巨噬细胞、腹膜间皮细胞及外周血白细胞有损害[1] 。体外实验观察到当细胞与L PDS孵育后 ,出现胞内酸中毒导致细胞功能异常而死亡。本研究通过调查L P…     

脂质与肾脏疾病的关系

肾脏疾病常伴脂蛋白异常，如肾病综合症、慢性肾功能不全等。肾病综合征脂质代谢异常包括总胆固醇升高、ＬＤＬ胆固 醇升高、甘油三酯水平升高以及ＶＬＤＬ和ＩＤＬ水平增高，脂蛋白异常可能主要与肝脏合成增加以及清除下降有关。不同肾脏疾病肾脏脂质沉着已有报道［１，２］，Ｌｅｅ等［２］通过活检观察到脂质沉积在免疫因素、非免疫因素所致肾小球疾病占２０％－３３％，６２％肾小球有ａｐｏＢ沉积，免疫组化分析显示肾小球有ａｐｏ（ａ）和ａｐｏ－Ｂ１００沉积［３］。这些现象使我们有理由相信脂质在肾小球疾病的发生发展中起重要作…     

维持性血液透析患者血清和透析液对脂肪细胞凋亡的影响

目的观察维持性血液透析（HD）患者血清及其与常规透析液（CD）或高纯透析液（HPD）联合干预对脂肪细胞凋亡的影响。方法采集20例HD患者（CD和HPD治疗各10例）血样并分离血清,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。分别以HD患者血清（HDPS组）、HD患者血清联合CD（HDPS＋CD组）和HD患者血清联合HPD（HDPS＋HPD组）对经体外诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞进行干预,48 h后收集细胞。Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞形态学改变;Annexin-V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡。PCR检测CD和HPD中细菌DNA片段表达。结果 ELISA法检测结果显示,与HPD治疗HD患者比较,CD治疗HD患者血清TNF-α水平显著升高（P〈0.05）。在HDPS组和HDPS＋CD组,荧光显微镜观察可见呈典型凋亡形态学改变的细胞增多,两组细胞凋亡率均显著高于HDPS＋HPD组（P〈0.05）。PCR检测显示,CD和HPD中细菌DNA表达分别为902.79±60.57和454.87±32.22,两者差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 HDPS可诱导3T3-L1脂肪细胞凋亡,可能与患者血清TNF-α水平升高有关。与HD患者血清联合CD干预比较,联合HPD干预诱导的脂肪细胞凋亡率较低且HPD中细菌DNA表达较少。     

维持性血透患者外周血中性粒细胞的IL-1ra基因表达和吞噬杀菌功能

目的：对维持性血液透析（ＨＤ）患者外周血中性粒细胞（ＰＭＮ）白介素－１受体拮抗物（ＩＬ－１ｒａ）基因表达和吞噬及杀菌功能进行研究，并探讨二者的相关性。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＨＤ患者外周血ＰＭＮ ｉｃＩＬ－１ｒａ（胞内型）和ｓＩＬ－１ｒａ（分泌型）基因表达；通过菌落计数方法观察ＰＭＮ对金黄色葡萄球菌（金葡菌）吞噬和杀菌功能的改变。结果：ＨＤ患者ＰＭＮ中可检测到５１２ｂｐ（ｉｃＩＬ－１ｒａ）和１４６ｂｐ（ｓＩＬ－１ｒａ）的ＲＴ－ＰＣＲ产物；ＨＤ患者ＰＭＮ对金葡菌的吞噬和胞内杀菌能力均较正常对照明显下降（Ｐ〈０．０１或Ｐ〈０．０５）。结论：ＨＤ患者ＰＭＮ可自发表达ｉｃＩＬ－１ｒａ和ｓＩＬ－１ｒａ，这种预激活状态与其对金葡菌的吞噬和杀灭作用下降相平行。     

乳酸盐与丙酮酸盐腹膜透析液对外周血中性粒细胞凋亡的影响

目的 :比较研究乳酸盐与丙酮酸盐腹膜透析 (腹透 )液对外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡以及吞噬和杀菌能力的影响。方法 :含有不同浓度 (1.5 % ,4.2 5 % )葡萄糖的乳酸盐或丙酮酸盐腹透液 ,与外周血 PMN孵育不同时间 (10 ,30 m in)后 ,利用流式细胞术及荧光素标记的 Annexin- 检测细胞凋亡情况 ;通过菌落计数方法观察 PMN对金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )吞噬和杀菌功能的改变 ,分别以细胞外和细胞内活菌下降的百分数表示。 结果 :PMN与 1.5 %乳酸盐腹透液 (p H6 .7)孵育 10min,收集细胞 ,培养 72 h后细胞凋亡率与正常对照组比较无差异 ,而孵育时间延长至 30 min后 ,培养的 PMN在 72 h凋亡率[(6 6 .90± 2 .35 ) % ]明显增加 ,与 4.2 5 %乳酸盐腹透液 (p H7.2 ) 10 m in组结果相似 [(6 5 .36± 2 .6 0 ) % ];1.5 %葡萄糖乳酸盐腹透孵育 30 m in及 4.2 5 %葡萄糖乳酸盐腹透液孵育 10 m in组 ,PMN的吞噬及杀菌功能均较对照组显著降低。无论是含1.5 %还是 4.2 5 %葡萄糖的丙酮酸盐腹透液 ,PMN凋亡率均与对照组无显著差异 ;对 PMN吞噬和杀金葡菌功能也无显著影响。 结论 :丙酮酸盐腹透液对外周血 PMN凋亡以及吞噬和杀菌功能的影响均较小 ,具有较好的临床应用前景     

急性细菌性腹膜炎CAPD患者透出液透明质酸水平对机体防御功能的影响

透明质酸 (Ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ ,ＨＡ)是由腹膜间皮细胞和纤维母细胞产生和分泌的一种高分子量粘多糖 ,对机体防御功能的影响目前并不完全清楚。有试验观察到ＨＡ在急性和慢性细菌性腹膜炎过程中对结缔组织生长的调节起重要作用[1] ,Ｙａｍａｇａｔａ等[2 ] 试验显示随着腹膜透析时间的延长 ,透出液ＨＡ丢失增加。有学者观察到急性细菌性腹膜炎对腹膜ＨＡ合成增加[3 ] ,但这种ＨＡ合成增加与机体防御的关系并不清楚。为了探讨透出液ＨＡ含量对机体防御功能的影响 ,我们对持续性非卧床腹膜透析 (ＣＡＰＤ)急性腹膜炎患者透出液ＨＡ含量进行…     

不同血液透析液对U937细胞凋亡和PKCδ表达的影响

目的 研究不同血液透析液对U937细胞蛋白激酶C-δ(PKCδ)表达及细胞凋亡的影响.方法 在对数生长期人单核细胞株U937细胞培养液中添加不同血液透析液进行干预,分为A液+B液组(血液透析液A液+B液组合)、A液+B液+PKCδ特异性抑制剂(rottlerin)组、A液+B粉组(血液透析液A液+B粉组合)、A液+B粉+ rottlerin组,同时设立空白对照和正常对照组.分组干预后24 h和48 h分别收集细胞,Hoechst33258染色后荧光显微镜观察细胞形态学改变;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR和Western blotting 检测PKCδ mRNA和蛋白表达.结果 A液+B粉组凋亡细胞明显增多,呈凋亡典型形态学改变,分组干预24 h和48 h的细胞凋亡率明显高于相应时间点空白对照组、正常对照组和A液+B粉+rottlerin组(P<0.05);同时与两对照组和A液+B粉+rottlerin组比较,A液+B粉组U937细胞PKCδ mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05).A液+B液组细胞凋亡率及PKCδ mRNA和蛋白表达与两对照组和A液+B液+rottlerin组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 血液透析液A液+B粉组合对U937细胞有明显促凋亡作用,其机制可能与上调细胞PKCδ表达有关;与A液+B粉组合比较,选择A液+B液组合作为血液透析液可降低患者外周血单核细胞的细胞凋亡率.     

不同血液透析液对U937细胞凋亡和PKCδ表达的影响

目的 研究不同血液透析液对U937细胞蛋白激酶C-δ(PKCδ)表达及细胞凋亡的影响.方法 在对数生长期人单核细胞株U937细胞培养液中添加不同血液透析液进行干预,分为A液+B液组(血液透析液A液+B液组合)、A液+B液+PKCδ特异性抑制剂(rottlerin)组、A液+B粉组(血液透析液A液+B粉组合)、A液+B粉+ rottlerin组,同时设立空白对照和正常对照组.分组干预后24 h和48 h分别收集细胞,Hoechst33258染色后荧光显微镜观察细胞形态学改变;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR和Western blotting 检测PKCδ mRNA和蛋白表达.结果 A液+B粉组凋亡细胞明显增多,呈凋亡典型形态学改变,分组干预24 h和48 h的细胞凋亡率明显高于相应时间点空白对照组、正常对照组和A液+B粉+rottlerin组(P<0.05);同时与两对照组和A液+B粉+rottlerin组比较,A液+B粉组U937细胞PKCδ mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05).A液+B液组细胞凋亡率及PKCδ mRNA和蛋白表达与两对照组和A液+B液+rottlerin组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 血液透析液A液+B粉组合对U937细胞有明显促凋亡作用,其机制可能与上调细胞PKCδ表达有关;与A液+B粉组合比较,选择A液+B液组合作为血液透析液可降低患者外周血单核细胞的细胞凋亡率.