熊果酸对卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用

目的探讨熊果酸对于卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用。方法选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集干细胞,接种于裸鼠皮下,建立裸鼠人卵巢癌干细胞皮下移植瘤耐药模型。随机分为Skov3贴壁细胞组、干细胞组,熊果酸高、中、低剂量组,顺铂组,顺铂联合熊果酸组。连续给药14天,空白组给予0.9%Na Cl溶液。每天测量瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。给药结束后,取肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞形态、结构,免疫组化检测ABCG2的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果熊果酸可以抑制肿瘤组织生长,并且抑瘤率随剂量增加而上升,熊果酸与顺铂联用明显优于顺铂(P0.01)。不同剂量的熊果酸干预后,ABCG2的表达下调,肿瘤干细胞凋亡增多,均具有剂量依赖性。并且熊果酸联合顺铂组较单用顺铂组,ABCG2的表达明显被抑制,细胞凋亡数明显升高。结论熊果酸可以抑制卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠的瘤体生长,通过下调耐药指标ABCG2,促进细胞凋亡,提高顺铂诱导的细胞凋亡来达到逆转耐药的作用。     

LncRNA SOX2OT海绵吸附miR-34a促进SOX2表达增强大肠癌多药耐药

目的 验证长链非编码RNA SOX2OT(Long noncoding RNA SOX2OT,SOX2OT)增强大肠癌HCT-116细胞多药耐药(Multidrug resistance,MDR),并从SOX2OT/miR-34a/SOX2信号通路探讨其可能的有效机制。方法 双荧光素酶报告基因验证SOX2OT与miR-34a、miR-34a与SOX2的靶向结合;HCT-116细胞瞬时转染SOX2OT质粒、miR-34a mimic,RT-qPCR验证转染效率;RT-qPCR检测SOX2OT、miR-34a和SOX2表达水平并进行相关性分析;CCK-8检测细胞增殖,评估SOX2OT、miR-34a对HCT-116细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)、顺铂(CDDP)、紫杉醇(TAXOL)化疗敏感性的影响。结果 SOX2OT与miR-34a、miR-34a与SOX2之间存在靶向关系;SOX2OT抑制miR-34a(P＜0.05),上调SOX2(P＜0.01);miR-34下调SOX2OT(P＜0.01)和SOX2(P＜0.01);转染SOX2OT质粒后HCT-116细胞的5-FU、VCR、CDDP、TAXOL的IC₅₀值均升高(P＜0.01);HCT-116细胞共转染SOX2OT、miR-34a mimic时对四种化疗药物的IC₅₀值与转染SOX2OT组相比均明显降低(P＜0.01),其中5-FU、CDDP的IC₅₀值与对照组相比无统计学差异(P＞0.05)。结论 SOX2OT海绵吸附miR-34a促进SOX2的表达致使HCT-116细胞多药耐药。     

丹参酚酸B通过抑制ROS对大肠癌LOVO细胞侵袭与迁移的作用

目的：验证丹参酚酸B(SalB)通过上调细胞内活性氧(ROS)含量抑制LOVO细胞侵袭与迁移以及SalB对LOVO细胞侵袭和迁移的量效相关性调控。方法：体外培养人大肠癌LOVO细胞,并将其分成6组,Control组、SalB-L组、SalB-M组、SalB-H组、H₂O₂组和SalB-M+NAC组,进行分组干预。显微镜下观察LOVO细胞形态,采用流式细胞术测定细胞内ROS浓度,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力。结果：显微镜下可见,SalB干预后LOVO细胞生长抑制、细胞伪足变短或消失;低浓度SalB对LOVO细胞内ROS含量无影响(P>0.05),中、高浓度SalB浓度依赖性促进细胞内ROS生成(P<0.01),中浓度SalB诱导产生的ROS可被ROS清除剂NAC完全清除(P<0.01);低浓度SalB对LOVO细胞侵袭、迁移能力无影响(P>0.05),中、高浓度SalB可浓度依赖性抑制LOVO细胞侵袭、迁移(P<0.01),中浓度SalB对细胞侵袭、迁移的抑制作用可被NAC完全逆转(P<0.01...     

张镜人教授治疗多发性骨髓瘤的经验

多发性骨髓瘤是一种浆细胞系恶性肿瘤,以骨髓中浆细胞恶性克隆增生,血清或尿液中出现单克隆免疫球蛋白或其成分（M蛋白）,正常免疫蛋白受到抑制以及广泛溶骨病变和（或）骨质疏松为特征,引起骨折和骨髓功能衰竭,产生一系列临床症状,预后差［1］。张镜人老中医对多发性骨髓瘤的中医治疗有着深厚造诣,认为其病机乃肝肾气阴亏虚为本,外邪夹瘀痰阻络为标,治疗上扶正与祛邪并重,虚症以益气养阴、补益肝肾为主,实证以清热散瘀、凉血止血为主,有一定疗效。该文从中医病因、病机、治法、方药等角度对张教授治疗多发性骨髓瘤的临床心得进行探讨,并举验案1则。     

丹参酚酸B调控ROS抑制大肠癌细胞HCT-116增殖并促进其凋亡

目的 验证丹参酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)抑制人大肠癌细胞HCT-116增殖并促进其凋亡,进一步通过活性氧簇(Reactive oxygen species,ROS)阐述其可能机制。方法 体外培养大肠癌细胞HCF-116,分成HCT-116组、HCT-116+H₂O₂组、HCT-116+SalB组、HCT-116+SalB+N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)组。分组干预后,采用MTT法检测细胞存活率、平板克隆实验检测细胞增殖、流式细胞术检测ROS含量、细胞周期及细胞凋亡率。结果 SalB对HCT-116细胞具有抑制作用,且在一定浓度范围内呈正相关(P＜0.01);SalB、H₂O₂促进HCT-116细胞内ROS生成(P＜0.01),ROS清除剂NAC预处理可清除由SalB产生的ROS(P＜0.01);SalB抑制HCT-116细胞增殖(P＜0.01)并促进其凋亡(P＜0.01),该作用可被NAC部分逆转(P＜0.05);SalB引起HCT-116细胞G0/G1周期阻滞(P＜0.01),NAC预处理完全逆转SalB导致的周期阻滞(P＜0.05)。结论 SalB可通过增加HCT-116细胞内ROS水平引起细胞周期阻滞,从而抑制细胞增殖,并促进其凋亡。     

丹参酚酸B靶向SOX2OT/miRNA-34a/SOX2轴抑制大肠癌细胞侵袭转移

目的:验证SOX2OT/miRNA(miR)-34a/SOX2信号轴对人大肠癌LOVO细胞侵袭转移的影响以及丹参酚酸B(SalB)通过该信号轴浓度依赖性抑制LOVO细胞侵袭转移.方法:双荧光素酶报告基因检测SOX2OT与miR-34a、miR-34a与SOX2的靶向结合;瞬时转染SOX2OT质粒和miR-34a mim...     

张镜人教授治疗病毒性肝炎的经验

病毒性肝炎是由肝炎病毒引起的以肝脏损害为主要特征的消化道传染病[1]。张镜人教授对中医治疗病毒性肝炎有着深厚的造诣,认为其病机乃素体脾虚、湿毒内盛、肝脾同病,治疗上以祛湿为要,病变早期以健脾化湿、疏肝利胆为基本治法,晚期则以活血化瘀,软坚消积为主,兼顾清化湿热,疗效颇佳。该文从中医病因病机、治法方药等角度对张教授治疗急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化的临床经验进行探讨,并举验案2则,以资赏析。     

丹参酚酸B量效相关性抑制大肠癌HCT-116细胞生长及其相关机制研究

目的 验证丹参酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)浓度依赖性抑制人大肠癌HCT-116细胞增殖、促进其凋亡,并从活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)水平进一步探究SalB抑制大肠癌生长的作用机制。方法 以低、中、高剂量SalB干预HCT-116细胞48h,显微镜下观察细胞生长状态及形态学特征;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术分析细胞周期分布、细胞凋亡率以及细胞内ROS含量。结果 随着SalB作用HCT-116细胞浓度增加,镜下可见细胞数量逐渐减少,细胞折光率逐渐减弱,体积变小,核固缩,核颜色加深,出现大量细胞碎片及漂浮细胞;平板克隆实验显示,中剂量和高剂量SalB显著抑制HCT-116细胞克隆形成能力(P<0.05或P<0.01),且随着药物浓度增加,抑制作用更强(P<0.01);中剂量和高剂量SalB处理后,GO/G1期细胞数量显著升高(P<0.01),S期和G2/M期细胞数量均显著降低(P<0.05或P<0.01),该周期阻滞作用在一定浓度范围内与SalB浓度呈正性相关;低、中、高浓...     

在体阿霉素干预联合全克隆培养方法富集肾上腺皮质癌肿瘤干细胞的研究

目的 通过阿霉素在体干预联合全克隆的富集方法来研究肾上腺皮质癌SW13肿瘤干细胞的特性。方法 建立裸鼠SW13移植瘤连续传代3代模型，实验组尾静脉注射阿霉素，对照组注射等量生理盐水。收集移植瘤细胞进行单克隆培养，所获克隆分别进行克隆转移实验、克隆连续传代实验、Hoechst33342/PI双染色检测凋亡率实验，并通过RT-qPCR检测肿瘤标志物CXCR4在两组瘤体细胞中的表达。结果 与对照组相比，实验组的瘤体直径小、CXCR4表达更高，实验组全克隆细胞的克隆转移能力、连续传代能力最高、凋亡率最低(P<0.05)。结论 在体阿霉素干预联合全克隆富集方法可以有效富集肾上腺皮质癌肿瘤干细胞，肾上腺皮质癌肿瘤干细胞高表达CXCR4。