胆石症病人和正常人胆汁泡蛋白成核活性及糖链结构的比较

目的 比较胆石症病人和正常人胆汁泡蛋白促成核活性,并分析其糖链结构特点.方法 进行胆固醇结晶生长试验,检测胆石症病人和正常人相对分子质量为33 500的泡蛋白成核时间,并计算其促成核活性.采用HRP凝集素探针介导的Western-Blot印迹法分析不同来源泡蛋白糖链的结构特点.结果 胆石症病人来源的33 500泡蛋白具有明显的促成核活性,其平均成核时间为(3.75±0.66)d,成核活性为0.303±0.075;而正常人来源者则仅具较弱的促成核活性,平均成核时间为(8.38±0.86)d,成核活性为0.677±0.086,两者比较,差异显著(P＜0.05).胆石症病人来源的33 500泡蛋白DSA(+)、ConA(-),属于复杂型多天线聚糖;而正常人来源者为ConA(+)、DSA(-)的二天线糖链.结论 胆石症病人来源的33 500泡蛋白较正常人来源者具有更强的促成核活性,两者糖链结构特点亦有明显不同,提示泡蛋白促成核活性的改变可能由于其糖链结构特点的变化引起.     

胆石症患者与正常人胆汁33500泡蛋白成核活性的比较

目的比较胆石症患者与正常人的胆汁33 500泡蛋白成核活性。方法利用超速离心法从正常人及胆石症患者胆汁中纯化33 500泡蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其纯化效果。通过Holan法测定成核时间,计算成核活性。结果胆石症患者的33 500泡蛋白平均成核时间为(3.8±0.7)d,成核活性中位数达0.303,具有强促成核作用,能显著缩短成核时间,促进胆固醇结晶形成。而正常人促成核作用较弱,平均成核时间为(8.4±0.9)d,成核活性中位数仅为0.667。胆石症患者与正常人胆汁33 500泡蛋白平均成核时间及促成核活性的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论与正常人相比,胆石症患者的胆汁33 500泡蛋白促成核活性明显增强。     

胆宁片对胆汁33.5 kDa泡蛋白糖链结构的影响

目的探讨胆宁片对胆汁33．5 kDa泡蛋白糖链结构的影响。方法按随机序贯原则将胆石症患者分成治疗组(10例)和对照组(10例),治疗组术后第3天口服胆宁片治疗,对照组术后则不服用。取手术当天(外参对照组)及术后第3、10天的T管胆汁,通过蔓陀螺凝集素探针(DSA)介导的Western印迹法分析两组患者胆汁中33．5 kDa泡蛋白糖链天线数目的变化情况。结果治疗组术后3 d的胆汁33．5 kDa泡蛋白糖链Western印迹染色条带亮度降低;治疗组术后10 d与外参对照组的33．5 kDa泡蛋白糖链条带DSA结合率糖链显著下降(P＜0．05)。结论33．5 kDa泡蛋白糖链天线数目变化的时间(用药后7 d)要早于文献报道的变化时间(14 d),进一步证实了33．5 kDa泡蛋白糖链数目的增加导致泡蛋白含量及促成核活性改变的推测。