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目的探讨骨髓干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,MSC)移植对慢性心力衰竭大鼠模型心肌瘢痕周边及远隔区心肌的影响。方法制作心力衰竭大鼠模型,4周后分为细胞移植组(将5×10~6MSC注射到梗死后心肌)和对照组(注射等体积磷酸缓冲液),每组7只。组织多普勒评价室壁运动。Tunel染色检测心肌细胞凋亡情况。RT-PCR及Western杂交检测Bax、Bcl2基因和蛋白表达。结果细胞移植组在心肌瘢痕区观察到血管形成。与对照组相比,治疗后21 d移植组大鼠心肌收缩及舒张期纵向峰值速度在左室前壁、后壁、前室间隔及二尖瓣水平均显著升高[左室前壁收缩峰值速率为(0.67±0.02)cm/s对(0.31±0.02)cm/s,P<0.0013;左室前壁舒张峰值速率为(1.26±0.04)cm/s对(0.4±0.01)cm/s,P<0.001];移植组大鼠心肌凋亡细胞减少[(9.2±1.1)个/mm~2对(28.5±3.6)个/mm~2,P<0.001];瘢痕远隔区细胞比对照组细胞减小[(29.5±1.6)μm~2对(78.5±3.9)/μm~2,P<0.001]。与对照组相比,移植组大鼠心脏Bax基因和蛋白表达降低,Bcl2基因和蛋白表达升高。结论MSC移植改善瘢痕边缘缺血心肌血供,增强缺血心肌功能;拮抗细胞凋亡,防止远隔区细胞肥大。 相似文献
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目的:以腺病毒(Ad—CMV)介导钙离子ATP酶基因(sarcoplasmic reticulum Ca^2+ ATPase,SERCa2a)转染骨髓间充质干细胞(Bone marrow msenchymal stem cells,BMSCs),测定表达产物,为心力衰竭的细胞移植和基因治疗提供实验基础。方法:体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,用已构建好的Ad5-CMVSERCa2a真核载体进行转染。通过流式细胞仪检测转染效率。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westem杂交等方法检测SERCa2amRNA和蛋白质的表达。结果:Ad5-CMV—SERCa2a对BMC的转染率为80%左右,没有明显的细胞毒性反应。RT-PCR检测到SERCa2a,Western杂交确定SERCa2a蛋白表达。结论:腺病毒载体可有效地介导SERCa2a基因转染BMC,并表达SERCa2a蛋白,为基因治疗心力衰竭的研究奠定了基础。 相似文献
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背景:目前仍缺乏有效手段修复心力衰竭后受损心肌,逆转心肌病理性重塑。作为一种新的治疗策略,用正常肌细胞和治疗性基因干预受损心肌正逐渐显示出其在改善心功能方面的优势。
目的:观察腺病毒转染不同代骨髓间充质干细胞的有效性和稳定性。并以携带肌浆网钙离子ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca(2+) ATPase,SERCA2a) 基因的腺病毒转染骨髓间充质干细胞,治疗心力衰竭大鼠,比较SERCA2a基因治疗,骨髓间充质干细胞移植以及骨髓干细胞基础的SERCA2a基因治疗慢性心力衰竭大鼠的效果。
设计:随机对照实验。
单位:解放军总医院老年心血管病科和北京医科大学生物化学系。
材料:选取购于北京医科大学动物实验中心的4周龄雄性SD大鼠作为骨髓供体。选取体质量200~250 g雌性成年SD大鼠作为细胞移植和基因治疗受体。以雄性大鼠Y染色体sry基因鉴定供体移植细胞是否在雌性大鼠受体心肌内存活。实验所用Ad-SERCa2a,Ad-EGFP的构建由我科鲁小春博士完成;第3和8代骨髓间充质干细胞自行分离培养。
方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系周春燕实验室完成。对30只雌性SD大鼠进行左冠状动脉结扎,制作急性心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型。将造模成功的29只大鼠随机分为4组:基因治疗组7只,干细胞移植治疗组7只,基因修饰的干细胞移植组8只,腺病毒空载体对照组7只,分别予以单纯SERCA2a基因、MSC移植、SERCA2a基因修饰的骨髓间充质干细胞移植及腺病毒空载体干预。分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,用携带SERCA2a及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-SERCA2a-GFP)转染第3和8代骨髓间充质干细胞。
主要观察指标:采用流式细胞仪检测不同代骨髓间充质干细胞的Ad-SERCA2a-GFP转染率。分别在治疗前及治疗后14,21 d采用超声心动图检测大鼠心功能。采用免疫组化法检测大鼠心脏Ⅷ因子表达;采用RT-PCR 和Western杂交检测SERCA2a的基因和蛋白水平表达,并按照说明书检测宿主SERCA2a功能活性。
结果:①转染率:腺病毒转染不同代骨髓间充质干细胞的转染率超过80%,第3代骨髓间充质干细胞与第8代的转染率比较,差异无显著性意义(P > 0.05)。②大鼠心功能:治疗后14 d,与腺病毒空载体对照组相比,其余3组左室射血分数均明显升高(P < 0.01)。治疗后 21 d,与腺病毒空载体对照组相比,干细胞移植治疗组和基因修饰的干细胞移植组大鼠室壁增厚;干细胞移植治疗组和基因修饰的干细胞移植组左室射血分数和左室短轴缩短率改善率持续升高(P < 0.01),基因治疗组两指标改善率较治疗14 d时下降。与腺病毒空载体对照组相比,基因修饰的干细胞移植组左室前壁和室间隔收缩期纵向峰值速度显著升高(P < 0.01),左室前壁和室间隔舒张期纵向峰值速度亦呈现相同改善(P < 0.01)。③心肌SERCA2a的基因、蛋白水平表达和功能活性,以及Ⅷ因子表达:携带SERCA2a基因的骨髓干细胞在宿主心肌能有效地合成和表达有功能的SERCA2a蛋白。与腺病毒空载体对照组相比,基因修饰的干细胞移植组SERCA2a基因、蛋白表达和酶活性均显著增强。干细胞移植组心力衰竭大鼠心脏瘢痕区可观察到Ⅷ因子表达。
结论:①第3和8代骨髓间充质干细胞均具有高腺病毒转染率,骨髓间充质干细胞是基因治疗的良好细胞载体,其介导的SERCA2a基因治疗对衰竭心肌具有持续稳定的心功能改善作用。②骨髓间充质干细胞移植改善心功能的作用可能与促进血管新生有关。 相似文献
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老年人肺动脉高压59例临床分析 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:调查65岁以上老年人肺动脉高压(PAH)患病情况及肺动脉高压分型.方法:回顾性分析2005-05/2007-05月间我科收治的59例老年肺动脉高压患者临床资料.结果:与左心疾病有关的PAH为93.22%,其中与左房或左室心脏病相关的PAH 48例;与左心瓣膜性心脏病相关的PAH 7例.与肺呼吸道疾病和(或)缺氧有关的PAH为5.08%,慢性阻塞性肺疾病3例,垂体腺瘤肢端肥大症1例.年龄和肺动脉压相关系数为0.29(P>0.05).25例中重度肺动脉高压患者中心功能Ⅲ级12例,Ⅳ级8例,3例患者死亡.结论:高血压病和冠心病等左心疾病是老年PAH最常见类型.重度肺动脉高压提示预后不良.老年PAH患者年龄与肺动脉压无关. 相似文献
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慢性心力衰竭患者获得性生长激素抵抗的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究观察慢性心力衰竭 (心衰 )患者血生长激素(GH)、胰岛素样生长因子 (IGF 1)的变化 ,以log(IGF 1/GH)作为生长激素敏感性指标 ,探讨获得性生长激素抵抗的产生机制。1 资料与方法 :本院 2 0 0 0年 10月~ 2 0 0 1年 6月住院的慢性心衰患者 95例。心功能Ⅱ级组 2 8例 ,Ⅲ级组 36例 ,Ⅳ级组 31例。年龄 4 8~ 90 (6 0 2± 8 1)岁 ,男 4 9例 ,女 4 6例。其中冠心病和高血压性心脏病 6 8例 ,肺原性心脏病 12例 ,扩张型心肌病 12例 ,风湿性心脏病 3例。所有患者符合Framinghan诊断标准 ,心功能按NYHA分级 ,左室射… 相似文献
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高龄老年急性心肌梗死患者102例临床分析 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 探讨老年急性心肌梗死(AMI)的临床特点。方法回顾性分析2007年-2008年收住院治疗的102例高龄老年急性心肌梗死患者的临床资料。结果患者合并高血压病百分率最高(78.2%),其次是脑血管病和糖尿病(65.7%和45.1%)。总胆固醇(TC)水平达标者占54.1%,低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)达标者占27%,仅有56.8%的患者应用抗血小板药,他汀类调脂药最少。AMI患者发病时,有81例表现为非ST段抬高型,21例表现为ST段抬高,所有的患者肌钙蛋白Ⅰ(WnⅠ)值均高于正常水平。结论高血压病是高龄老年冠心病患者最常见的高危因素,其预防措施达标率低,应该加强。 相似文献
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目的探讨补充生理水平的外源性雄激素对去势大鼠动脉壁内皮型NO合酶(eNOS)和诱导型NO合酶(iNOS)表达的影响。方法将大鼠随机分为去势组、外源性生理水平雄激素补充组和对照组。采用实时荧光定量PCR和Western blot,观察不同处理组胸主动脉壁一氧化氮合酶(NOS)亚型eNOS和iNOS mRNA和其蛋白表达的变化。结果与对照组相比,去势组大鼠eNOS的表达显著降低(P<0.05),而外源性雄激素生理水平补充组大鼠eNOS的表达接近正常水平;两个处理组iNOS mRNA的水平与对照组比较均无统计学差异。结论补充外源性生理水平的雄激素对去势大鼠心血管系统的保护作用,可能是通过血管壁eNOS影响NO的合成与释放而介导的。 相似文献
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目的分析基于智能腕表的单导联心电图(iECG)算法识别窦性心动过速及快心室率心房颤动(房颤)的准确性。方法本研究为非随机对照试验, 于2020年12月15日至2022年5月30日在解放军总医院招募642例≥18岁窦性心动过速(心率111~145次/min)或快心室率房颤(心率110~150次/min)患者为受试者, 使其左手腕佩戴华为Watch GT2 Pro智能腕表, 将放松状态下腕表检测的生理信号作为实测数据, 采用华为公司基于智能腕表的iECG算法进行识别, 同时进行12导联心电图(12L-ECG)检查, 并由2名心内科医师进行判读作为金标准。根据检测结果, 排除不符合纳排标准的受试者3例, 最终入组639例为研究对象。采用召回率、精确率、多分类的综合准确率宏观F1值评价该算法识别窦性心动过速及快心室率房颤的准确性。结果纳入分析的639例受试者中, 男性469例, 女性170例, 窦性心动过速389例, 快心室率房颤250例, 年龄(46.53±13.32)岁。iECG算法识别窦性心动过速的召回率为98.7%, 精确率为99.2%, F1值为99.0%;识别快心室率房颤的召回率为... 相似文献
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患者,女,32岁,农民.病案号:2910334.因误服草乌、川乌药酒10 ml 2小时入院.患者诉服药酒后口周、四肢麻木、心悸、乏力.查体:BP14.6/10.6 kPa,神志清楚,双肺呼吸音清晰,心界不大,心率90 bpm,心律不齐,未闻及杂音,心电图及心电监护示窦性心律,频发多源室上性及室性早搏.心脏彩色多普勒检查,心脏结构、瓣膜、血流无异常. 相似文献