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目的:通过慢病毒载体沉默IL-33在间充质干细胞(MSCs)中的表达,探讨IL-33基因沉默后对MSCs增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:通过构建IL-33基因的shRNA慢病毒载体转染MSCs;应用RT-PCR及免疫印迹方法检测IL-33在MSCs中的表达情况及IL-33基因的沉默效果;通过Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况,进而检测IL-33基因沉默后对MSCs增殖、凋亡的影响,并通过免疫印迹检测AKT磷酸化水平。结果:细胞转染及免疫印迹实验表明IL-33 shRNA慢病毒载体构建成功,并干扰了IL-33在MSCs中的表达;稳定沉默IL-33基因后,MTT细胞生长实验表明MSCs增殖能力减弱(P<0.05);流式细胞技术和免疫印迹技术检测显示IL-33基因沉默后可提高MSCs对外界凋亡诱导物的敏感性,且引起细胞survivin基因表达的下调。结论:IL-33基因可能与MSCs增殖和抗凋亡有关,进而参与MSCs的发育和存活,IL-33稳定沉默后通过削弱AKT磷酸化可抑制MSCs增殖。 相似文献
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目的:探讨miR-133a-3p靶向骨形态发生蛋白9(BMP9)对人颌骨骨髓间充质干细胞(hOBMSCs)增殖、分化和凋亡的影响.方法:体外成骨诱导培养hOBMSCs,RT-qPCR和Western blot检测hOBMSCs成骨分化过程中miR-133a-3p和BMP9的表达.MTT法、流式细胞术检测miR-133a... 相似文献
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