牛皮癣并发骨髓重度受抑患者与急性再生障碍性贫血患者血液形态学的比较

1 资料与方法 1999-2002年本院血液内科收治的以全血细胞减少为主要症状的12例患者,其共同特点是均患有牛皮癣,而且此次住院前都有在个体诊所服中药史,诊断为药物所致造成的骨髓抑制,后经合理治疗痊愈,其中男7例,女5例.另外收集20例急性再障患者.分别在入院治疗2周左右时采集骨髓进行涂片、骨髓活检;末梢血采集进行常规涂片,瑞姬氏染色.选择取材、涂片、染色良好的骨髓片、血片,在1000×下进行血细胞分类计数;另外采末梢血进行血常规检测.     

低功率氦-氖激光阴蒂部照射治疗无排卵型不孕症48例

不孕症是妇产科常见病,排卵功能障碍是女性不孕症的主要原因,约占25%～30%.临床上除药物治疗外,随着激光在医学领域的广泛应用,激光照射为治疗女性不孕症提供了一种新的手段.其中氦-氖(HeNe)激光穴位照射治疗无排卵性不孕症已收到较好的效果.但尚未见He-Ne激光阴蒂部照射治疗无排卵型不孕症的报道.近年我们应用低功率He-Ne激光阴蒂部照射治疗无排卵型不孕症48例,效果显著,现报告如下.     

护理工作压力原因分析及对策

护理工作是高风险的工作 ,是具有压力的工作。护理工作压力对患者、医院及个人均有不同程度的影响。笔者通过对护理工作压力原因分析 ,提出防范对策 ,有助于缓解工作压力 ,提高工作效率 ,使患者得到高质量护理。1　原因分析1 1　社会部分人对护理工作的一些偏见。有些人认为 ,医生是真正有学识有技术的职业 ,而护士只不过是医生的助手 ,并不具备一定专业知识 ,医生让干什么就干什么 ,根本无独立自主权 ,也没有独立处置病人的能力 ,即使是工作二三十年 ,有丰富理论及实践经验的护士也只能根据医嘱执行 ,没有医嘱则不能随便用药及处置 ,这是使…     

基层献血者梅毒感染率分析对血站采血的意义

目的了解基层(吉林地区外五县市)献血者梅毒感染情况对血站采血的指导意义。方法收集1998年10月~2005年8年来外五县(市)23932名献血者梅毒检验结果,并对其阳检率进行分析。结果献血者梅毒感染率呈逐年上升的趋势。结论要加强对基层献血者进行传染病知识的宣传,尽量排除梅毒及其它传染病人群参加无偿献血,提高血液合格率。     

经血源性和羊水源性间充质干细胞基本生物学特性的比较

目的 比较经血源性与羊水源性的间充质干细胞(MSCs)在相同培养条件下的基本生物学特性,旨在为临床提供一种新的干细胞来源.方法 用Ficoll密度梯度离心法分离经血源性MSCs,采用离心贴壁培养的方法 分离羊水中的MSCs.对两种来源细胞的形态及培养特性进行观察,并利用细胞化学染色的方法 对两者的生物化学特性进行鉴定.结果 从经血及羊水中均可成功分离培养出具有典型样特征的MSCs:纤维样或梭形、紧密漩涡状的细胞,并证实可稳定传代.在同等培养条件下,相同代数经血源性MSCs克隆形态相似性更高.经血源性MSCs原代培养24 h左右可见贴壁细胞,而羊水源性MSCs为48 h左右;经血源性MSCs与羊水源性MSCs原代达80%~90%融合度时间均为10 d左右;经血源性MSCs细胞倍增时间约为7 d,羊水源性MSCs约为10 d.细胞化学染色:ACP染色均为强阳性、AS-DCE、ANAE、NAP、PAS、POX、SBB均为阴性,细胞内化学成分及定位大致相同.结论 与羊水源性MSCs相比,经血源性MSCs取材方便,易分离纯化,无伦理学争议,成为MSCs又一可靠的来源     

硫唑嘌呤在胰腺癌动物模型制作中的应用

目的筛选建立胰腺癌动物模型最适合成瘤的硫唑嘌呤(AZA)浓度。方法将40只SD大鼠按照AZA浓度的不同分为5组:空白对照组(A组)、2.6mg/kg AZA组(B组)、2.2mg/kg AZA组(C组)、1.8mg/kg AZA组(D组)、1.4mg/kgAZA组(E组),每组8只。A组每天灌服2mL生理盐水,B、C、D、E组每天灌服相应浓度的AZA生理盐水液2mL。第30天后进行SD大鼠皮下移植Mia PACAⅡ胰腺癌细胞悬液,通过检测大鼠血浆CA24-2和制作胰腺组织病理切片的方法来判断其是否成瘤。结果接种胰腺癌细胞后的第15、20、25、30天,各造模组大鼠血中的CA24-2水平均有不同程度的升高,其中B组在移植后的第15、20、25、30天,体内CA24-2水平分别为(51.56±2.14)、(51.61±1.21)、(54.66±1.02)、(56.00±0.38)U/mL,与C、D、E组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且成瘤率最高,为83.3%。此外,胰腺病理切片镜下显示细胞核畸形、细胞大小不等,可见双核细胞及1～2个核仁,细胞核大且深染等病理特征,同时发现在移植部位的淋巴结和胰腺周围的淋巴结肿大。结论当AZA浓度为2.6mg/kg时,最有利于制作大鼠胰腺癌模型。     

不同孕期羊水间充质干细胞体外培养方法的比较

背景：以往对羊水间充质干细胞的培养多采集孕中期羊水,对妊娠其他阶段羊水进行间充质干细胞培养的研究还很少,特别是系统地对不同孕期羊水和不同培养基进行间充质干细胞培养的效果还未见报道。目的：比较不同孕期羊水中间充质干细胞体外培养的效果。方法：采用两种不同细胞培养基分别对60份妊娠时间为15~42周的羊水进行间充质干细胞的分离培养,观察间充质干细胞培养过程中生长状况及间充质干细胞培养成功率;细胞化学染色法检测间充质干细胞的化学性质;MTT法检测传代后间充质干细胞的生长曲线。结果与结论：采用含体积分数为10%胎牛血清的PRMI-1640培养基和AmnioMAXⅡ complete羊水专用细胞培养基对孕期为37~42周羊水的间充质干细胞培养成功率分别为8%和44%,孕期为21~36周羊水的间充质干细胞成功率分别为20%和60%。而孕期为15~20周的羊水用两种培养基培养成功率为100%。细胞化学染色结果显示：POX、SB（-）,ACP、PAS、AENE（＋）,而NAP有1%为（＋）,不同孕期染色结果无差异。MTT法测定羊水间充质干细胞的生长曲线呈＂S＂形。孕期在15~36周的羊水间充质干细胞可以传15代以上仍然旺盛,而孕期为37~42周的羊水间充质干细胞传10代即表现为生长缓慢。结果表明采用AmnioMAXⅡ complete羊水专用细胞培养基可以明显提高晚期羊水间充质干细胞培养的成功率。羊水的最佳采集时间为15~20周。背景：以往对羊水间充质干细胞的培养多采集孕中期羊水,对妊娠其他阶段羊水进行间充质干细胞培养的研究还很少,特别是系统地对不同孕期羊水和不同培养基进行间充质干细胞培养的效果还未见报道。目的：比较不同孕期羊水中间充质干细胞体外培养的效果。方法：采用两种不同细胞培养基分别对60份妊娠时间为15~42周的羊水进行间充质干细胞的分离培养,观察间充质干细胞培养过程中生长状况及间充质干细胞培养成功率;细胞化学染色法检测间充质干细胞的化学性质;MTT法检测传代后间充质干细胞的生长曲线。结果与结论：采用含体积分数为10%胎牛血清的PRMI-1640培养基和AmnioMAXⅡcomplete羊水专用细胞培养基对孕期为37~42周羊水的间充质干细胞培养成功率分别为8%和44%,孕期为21~36周羊水的间充质干细胞成功率分别为20%和60%。而孕期为15~20周的羊水用两种培养基培养成功率为100%。细胞化学染色结果显示：POX、SB（-）,ACP、PAS、AENE（＋）,而NAP有1%为（＋）,不同孕期染色结果无差异。MTT法测定羊水间充质干细胞的生长曲线呈＂S＂形。孕期在15~36周的羊水间充质干细胞可以传15代以上仍然旺盛,而孕期为37~42周的羊水间充质干细胞传10代即表现为生长缓慢。结果表明采用AmnioMAXⅡcomplete羊水专用细胞培养基可以明显提高晚期羊水间充质干细胞培养的成功率。羊水的最佳采集时间为15~20周。     

冻存复苏条件对髓性白血病细胞株生物学特性的影响

目的:采用不同方法对白血病HL60细胞株进行冻存和复苏,观察生物学特性改变,筛选最佳冻存复苏方案。方法:实验于2006-04/06在吉林医药学院临床检验实验室(国家三级标准)进行。①HL60细胞株由中国科学院上海生物细胞研究所提供。将欲冷冻保存的HL60细胞调整到良好的生长状态(对数生长期),随机数字表法分成4组,离心收集后在含体积分数为0.1小牛血清的RPMI-1640培养基中分别加入二甲基亚砜,使其终浓度依次为50,100,150,200g/L。冻存15d后,每组取1支冻存管复苏并接种于细胞培养板,培养12h后用锥虫蓝拒染法计算细胞复苏率。②选择冻存条件和冻存细胞密度相同的两支冻存管,按不同方法进行HL60细胞复苏。37℃水浴传统复苏法:立即将冻存管置于37℃水浴中,待融化后800r/min离心5min,吸去上清液,加入含体积分数为0.1小牛血清的RPMI-1640培养基,混匀后接种于细胞培养板,1mL/孔,9孔/组,置于体积分数为0.05的CO2培养箱37℃继续培养。40℃溶解后再37℃恒温改良复苏法:将冻存细胞于40℃水浴中迅速溶解,转入37℃水浴箱,融化后离心、加培养基等操作同传统复苏法。复苏细胞培养12h后采用锥虫蓝染色计算细胞存活率。③用无血清RPMI-1640培养基制备HL60细胞悬液,按3×107L-1密度接种于细胞培养板中,1mL/孔,然后分别加入体积分数为0.05,0.1,0.12,0.15,0.2的灭活小牛血清,每种血清浓度设置8个试验孔,并分别于培养12,24,36,48,60,72,84,96h后计数每孔细胞数量,并绘制细胞生长曲线。结果:①不同浓度二甲基亚砜冻存后HL60细胞复苏率的比较:二甲基亚砜200g/L组的细胞复苏率明显低于二甲基亚砜50,100,150g/L组[(64.6±2.8)%,(87.0±1.4)%,(86.4±2.1)%,(85.7±2.8)%;t=25.44,P<0.01],二甲基亚砜50,100,150g/L组间差异无显著性意义(t=0.82～1.44,P>0.05)。②不同复苏方法HL60细胞存活率的比较:与37℃水浴传统复苏法比较,40℃溶解后再37℃恒温改良复苏法的细胞存活率显著升高[(69.5±1.5)%,(87.4±1.8)%,t=23.24,P<0.01]。③RPMI-1640培养基不同血清含量对HL60细胞生长情况的影响:在体积分数为0.05的血清含量培养基中,HL60细胞基本不生长,且有逐渐死亡的趋势;在体积分数为0.1的血清含量培养基中,HL60细胞生长趋势明显,但生长速度相对较慢;在体积分数为0.12,0.15,0.2的血清含量培养基中,HL60细胞生长迅速,3种血清浓度间细胞生长趋势无明显差异。结论:以50g/L二甲基亚砜作为HL60细胞冻存保护剂、联合40℃溶解后再37℃恒温改良复苏法可使细胞保持最佳生物学特性,体积分数为0.12的血清含量为HL60细胞常规培养的最适浓度。     

人羊水间充质干细胞分离培养方法的优化

背景：目前关于人羊水间充质干细胞的体外分离培养方法不一,获得较多数量的间充质干细胞仍有困难。目的：分离80份羊水标本,比较不同的体外培养方法,优化筛选到一种合适的培养纯化条件,为人羊水间充质干细胞的基础研究和临床广泛应用奠定基础。方法：无菌条件下采集足月分娩和终止妊娠引产的羊水,分离羊水细胞,比较孕期、不同培养基、接种密度、首次换液时间对人羊水间充质干细胞原代培养过程的影响,通过细胞化学染色方法检测细胞代谢情况,观察人羊水间充质干细胞的生物学特性。结果与结论：相同培养条件下,采用AmnioMAXⅡcomplete羊水专用细胞培养基,以5×104/cm2的密度接种,首次换液时间为6d时,人羊水间充质干细胞原代培养成功率较高。孕期为14～20周的人羊水间充质干细胞培养成功率高于晚期妊娠（21～36周）及足月分娩（37～42周）的羊水。人羊水间充质干细胞强表达过碘酸-雪夫、酸性磷酸酶、酸性α-醋酸萘酚酯酶染色,弱表达中性粒细胞碱性磷酸酶,不表达过氧化酶、苏丹黑染色。提示,优化筛选到一种合适的人羊水间充质干细胞培养纯化条件。     

造血干细胞移植术后患者巨细胞病毒感染发生率及临床转归

采用免疫组化法对100例异体造血干细胞移植（Allo-HSCT）和14例自体造血干细胞移植（Auto-HSCT)术后患者、17例非移植患者以及27例正常供者CMVpp6抗原血症检出率进行分析。100例Allo-HSCT术后患者随访观察18（4－36）个月。结果：AlloHSCT者91％，在不同病期出现CMVpp65阳性（CMV－I），其中56％出现CMV疾病；急性移植物抗宿主病（GVHD）发生率为54％，时间为25（11－27天）；慢性GVHD52.9%，CMV相关性死亡率为21％，在各种死因中占主要地位。CMV－I在异体移植后好发，而在AutoHSCT术后患者、非移植患者以及正常人群极为少见，提示，CMV感染与急慢性GVHD呈显著相关性，是影响预后的主要因素。