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目的运用无血清成球培养法从人食管鳞癌细胞系EC109中分离/富集肿瘤干细胞,并对其＂干性＂特性进行鉴定。方法将EC109细胞接种至添加1XB27的干细胞培养基（DMEM/F12 1：1,无血清）,于poly-Hema包被的培养皿或低黏附培养板中培养,获取细胞球。采用实时定量PCR方法检测其干性相关转录因子的基因表达,连续传代和平板克隆形成实验评价其自我更新能力,免疫荧光细胞化学法检测其分化前后干性相关转录因子和分化标志物的表达变化,以裸鼠移植瘤实验检测其体内成瘤能力。结果培养5d能获得EC109细胞的细胞球。细胞球细胞高表达Oct4等干性相关转录因子,具有自我更新能力、分化潜能。裸鼠体内1×104个细胞球细胞能启动肿瘤形成,而单层培养细胞则需要1×105个细胞,且同数量级的细胞球细胞较单层培养细胞所形成的肿瘤体积大。结论无血清成球培养法能从食管鳞癌细胞系EC109获得细胞球,细胞球富集了肿瘤干细胞。 相似文献
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目的 探讨FAM72D在肺腺癌(LUAD)中的表达变化及其与预后的关系,并进行生物学机制的预测.方法 从TCGA获取原始数据,采用Kaplan-Meier生存分析、单变量Cox分析、多变量Cox分析、表达差异分析、临床相关性分析FAM72D在评估LUAD患者预后中的作用;采用基因集富集分析预测FAM72D的潜在作用机制,并利用TIMER数据库分析FAM72D与LUAD免疫浸润之间的相关性.结果 FAM72D的高表达与LUAD患者的预后不良有关(P＜0.05),是LUAD患者的独立预后指标.与正常肺组织比较,FAM72D表达在LUAD组织中明显上调,FAM72D高表达与高龄呈负相关,与男性、临床分期、T分期呈正相关,差异有统计学意义(P＜0.05).GSEA结果显示细胞周期、同源重组、剪接体、RNA降解、DNA复制、P53通路等相关基因集明显富集于FAM72D高表达.TIMER数据库分析显示,LUAD患者FAM72D表达水平与B细胞、巨噬细胞渗透水平呈负相关,与中性粒细胞的渗透水平呈正相关,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 FAM72D可作为LUAD早期诊断和预测预后的生物标志物. 相似文献
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