rHSG/pExpress-1重组质粒载体的构建及序列分析

目的构建大鼠增殖抑制基因（rat hyperplasia suppressor gene,rHSG）的真核表达载体rHSG/pExpress-1并鉴定,为进一步构建腺病毒载体及恶性胶质瘤的基因治疗提供物质基础。方法抽提SD大鼠心肌基因组RNA后逆转录,用PCR方法扩增大鼠增殖抑制基因（rHSG）段的基因片段;扩增产物经纯化后克隆至pExpress-1质粒载体,挑取重组质粒阳性克隆进行双酶切鉴定和测序。结果成功构建了真核表达载体rHSG/pExpress-1;重组质粒经测序后与预期序列一致。结论成功构建了大鼠增殖抑制基因真核表达载体rHSG/pExpress-1,为深入研究rHSG功能和rHSG基因治疗恶性胶质瘤奠定了基础。     

α-硫辛酸对实验大鼠变态反应性脑脊髓炎作用

目的:研究α-硫辛酸(ALA)对实验大鼠变态反应性脑脊髓炎(EAE)的作用。方法:用豚鼠6只制备实验用免疫抗原。选择Wistar大鼠30只,随机分为5组(n=6):(1)正常对照组(NC组);(2)EAE-7 d和(3)EAE-14 d组,于皮下注射抗原匀浆观察7 d和14 d;(4)ALA-7 d和(5)ALA-14 d组,于第1次发病时给予ALA腹腔注射,连续用7 d和14 d。在研究时间点处死大鼠,HE染色观察病理学改变,免疫细胞化学染色观察白介素-17(IL-17)的表达,同时测定大鼠脑组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)。结果:HE染色显示,在α-硫辛酸治疗的ALA-7 d和14 d组,均能减轻脊髓组织的炎性反应和髓鞘损伤。免疫细胞化学染色表明,EAE大鼠IL-17蛋白表达明显增加(P0.05~0.01),经α-硫辛酸处理后IL-17蛋白表达降低并于14 d接近对照水平。与NC组比较,EAE组大鼠MDA含量明显升高,GSH则明显降低;经ALA处理后,MDA显著降低,而GSH则明显增加(P0.05~0.01)。相关性分析表明,IL-17表达与MDA含量呈正相关(r=0.466,P0.05),而与GSH含量则呈负相关(r=-0.478,P0.05)。结论:在EAE大鼠模型中ALA可以改善和缓解炎症反应,其保护作用可能通过调节IL-17表达实现,并表现为MDA和GSH含量的变化。     

腺病毒介导的大鼠增殖抑制基因抑制大鼠胶质瘤的生长

目的:探讨腺病毒介导的大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)对大鼠胶质瘤生长的抑制作用.方法:建立大鼠C6胶质瘤动物模型,分别在接种C6胶质瘤细胞后第4和11天,于肿瘤原位注射0.9％氯化钠溶液(对照组)、重组腺病毒Adv-rHSG-GFP和腺病毒Adv-GFP,并于接种C6胶质瘤细胞后第9、15和21天取脑胶质瘤观察肿瘤的生长情况,免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和rHSG蛋白的表达以及微血管密度(microvessel density,MVD),RT-PCR和蛋白质印迹法检测rHSG mRNA及蛋白的表达.结果:Adv-rHSG-GFP组肿瘤体积明显小于对照组和Adv-GFP组(P＜0.01).Adv-rHSG-GFP组PCNA标记指数和MVD均低于对照组和Adv-GFP组.Adv-rHSG-GFP组rHSG mRNA和蛋白的相对表达量均明显高于对照组和Adv-GFP组(P＜0.01).结论:Adv-rHSG-GFP能够抑制胶质瘤血管生成和肿瘤细胞增殖,对恶性胶质瘤的生长具有明显的抑制作用.     

小骨窗经侧裂入路高血压脑出血的手术治疗疗效分析

【摘要】：目的：探究小骨窗经侧裂入路高血压脑出血的手术治疗疗效。方法：基于本院自2013年7月-2015年7月期间收治的50例高血压脑出血患者的临床资料,按照临床治疗方式的不同,随机的将这50例患者分为观察组（采用小骨窗经侧裂入路手术治疗方式）和对照组（采用切管切开手术治疗方式）,两组各25例,观察比较两组患者的临床疗效、术后并发症发生情况以及患者对手术治疗工作的满意程度。结果：观察组25例高血压脑出血患者的临床治疗效果（总有效率为88%）明显的优于对照组25例高血压脑出血患者的临床治疗效果（总有效率为60%）（P<0.05）,具有统计学意义;观察组25例患者术后并发症发生率36%明显的低于对照组25例患者术后并发症发生率60%（P<0.05）,具有统计学意义;观察组25例患者对手术治疗工作的满意度（总满意率为84%）明显的高于对照组25例患者对手术治疗工作的满意度（总满意率为56%）（P<0.05）,具有统计学意义。结论：高血压脑出血行小骨窗经侧裂入路手术治疗,具有创伤小、救治率高、术后并发症少等优点。     

RGS5表达变化和大鼠胶质瘤生长的关系

目的 探讨G蛋白信号调节因子5 (regulator of G protein signaling 5,RGS5)表达变化与大鼠胶质瘤生长之间的关系.方法 72只Sprague-Dawley (SD)大鼠随机平均分为胶质瘤组、生理盐水组、健康对照组、腺病毒-大鼠增殖抑制基因-绿色荧光蛋白重组复合物(adenovirus-rat hyperplasia suppressor gene-green fluorescent protein,Adv-rHSG-GFP)组.胶质瘤组和Adv-rHSG-GFP组建立大鼠C6胶质瘤动物模型,生理盐水组颅内注射10 μL生理盐水,健康对照组为健康大鼠.Adv-rHSG-GFP组在接种C6胶质瘤细胞后第4和11天,于肿瘤原位注射重组腺病毒Adv-rHSG-GFP.接种C6胶质瘤细胞后第9、15和21天取脑胶质瘤观察肿瘤的生长情况,免疫组织化学法检测RGS5蛋白的表达.结果 Adv-rHSG-GFP组肿瘤体积小于胶质瘤组(P＜0.01).生理盐水组和健康对照组无肿瘤生长.接种后第15和21天胶质瘤组RGS5蛋白表达均高于生理盐水组、健康对照组和Adv-rHSG-GFP组(均P＜0.01).结论 RGS5高表达与大鼠胶质瘤生长密切相关.     

美罗培南联合万古霉素双途径给药治疗开颅术后颅内感染应用效果

目的探讨美罗培南、万古霉素静脉滴注联合万古霉素鞘内给药治疗开颅术后颅内感染的应用效果。方法选取延安大学附属医院自2015年7月至2016年6月收治的63例开颅手术术后感染的患者,随机分为A组(n=31)和B组(n=32)。A组采用常规静脉滴注美罗培南和万古霉素进行治疗;B组在A组的基础上予以每日10 mg的万古霉素鞘内给药。比较两组的临床疗效,并分析治疗前、后的颅内压、脑脊液常规和血清炎性因子水平。结果 B组总疗程短于A组,痊愈率和有效率均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组脑脊液葡萄糖、蛋白质及pH水平变化不大,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);但两组颅内压和白细胞计数有降低,且B组低于A组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血清C反应蛋白、白细胞介素-6及肿瘤坏死因子α水平有所降低,且B组低于A组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论美罗培南、万古霉素静脉滴注联合10 mg万古霉素鞘内给药治疗颅内感染疗效明确,安全性高,具有一定的临床推广价值。     

甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤模型wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响

目的:研究甲基强的松龙对急性脊髓损伤(SCI)大鼠模型wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。方法:SD大鼠48只随机分为,甲基强的松龙处理组(Meth)、生理盐水处理组(Salin)和假手术组(Sham,仅进行椎板切除术)。Meth(甲基强的松龙,30 mg/kg)和Saline(生理盐水,等量)组通过Allens法建立急性SCI模型后经尾静脉立即注射,并在SCI后的1 d和2 d相同时间点各注射1次。SCI模型建立后用尼氏染色(Nissl)观察神经细胞变化,用Western Blot检测wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin和GSK-3β的表达,用免疫荧光技术观察凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-6表达,进行统计学处理。结果:实验组SCI后7 d,尼氏染色观察到Meth组前角运动神经元形态和数量得到明显改善(P0.01),同时对损伤区域修复有明显促进作用。SCI后3 d和7 d,Western Blot显示β-catenin表达水平明显(P0.05),而GSK-3β蛋白表达则降低(P0.05);免疫荧光观察到,甲基强的松龙处理组凋亡活动被明显抑制,表现为凋亡蛋白caspase-3和caspase-6降低(P0.01)。结论:结果表明,甲基强的松龙可能通过激活wnt/β-catenin信号通路影响一些相关蛋白表达,从而抑制大鼠急性SCI神经细胞的凋亡和促进运动功能恢复。     

颅内动脉瘤早期破裂出血显微夹闭术的最佳手术时机研究

目的:探讨颅内动脉瘤早期破裂出血采用显微夹闭手术治疗的最佳时机.方法:选取本院心内科2010年1月~2015年1月收治的90例颅内动脉瘤破裂出血患者进行回顾性分析,其中43例患者于出血后24h内进行显微夹闭手术治疗(24h组)、其余47例患者于24~72h内进行显微夹闭手术(72h组),统计分析两组患者的围手术期情况及术后远期预后情况.结果:24h组患者术前动脉瘤再次破裂率0%显著低于72h组的12.77%,24h组与72h组患者术中动脉瘤再次破裂、完全夹闭率差异无统计学意义;24h组术后3例患者发生脑梗死、4例患者发生脑积水与72h组的6例脑梗死、8例脑积水比较差异无统计学意义;24h组术后6个月达到预后良好的有36例、72h组预后良好的有31例,24h组患者预后良好率83.72%显著高于72h组的65.96%且差异具有统计学意义.结论:颅内动脉瘤早期破裂出血采用显微夹闭手术应该尽早治疗,24h内治疗患者的预后较好.     

高压氧联合持续腰大池引流治疗动脉瘤性蛛网膜下腔出血的临床疗效

目的分析高压氧联合持续腰大池引流治疗动脉瘤性蛛网膜下腔出血的临床应用疗效。方法选择2015年7月至2016年6月延安大学附属医院神经外科收治的证实为动脉瘤性蛛网膜下腔出血的60例患者为研究对象,依据治疗方案以随机数字法将其分为对照组(28例)、试验组(32例)。所有动脉瘤患者均接受血管内栓塞治疗,对照组术后进行持续腰大池引流治疗,试验组患者术后进行高压氧联合持续腰大池脑脊液引流治疗。结果治疗后,对照组患者总脑积水发生率(35.7%)明显高于试验组(12.4%),差异有统计学意义(P=0.034);手术侧大脑中动脉(MCA)血液流速均显著下降,但对照组患者MCA流速(110.67±9.69cm/s)明显高于试验组(98.59±9.09cm/s),对照组患者脑血管痉挛发生率(57.1%)明显高于试验组(21.9%),差异具有统计学意义(P=0.005)。结论高压氧联合持续腰大池脑脊液引流在改善血管痉挛状态及防治脑积水方面具有重要临床价值。