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目的 为了揭示小分子RNA miR-630抑制肺癌细胞生长的作用,阐明其通过靶向抑制BCL2来发挥作用的分子机制。方法 以CCK8检测细胞活力来评估细胞增殖的状况;以BD FACSCalibur流式细胞仪检测并分析细胞周期各个时期的变化;以mirPath和RNAhybrid两个生物信息学工具预测miR-630的下游靶点。通过一系列如PCR、琼脂糖胶回收、限制性克隆位点酶切链接以及质粒小提和大提等克隆工具,将miR-630基因构建到miRNA表达质粒pmR-mcherry载体,使用Lipofectamine 2000转染miR-630表达质粒至细胞内以在体外表达miR-630;以Western blot检测BCL2蛋白的表达。结果 成功构建表达miR-630的表达质粒,与对照组相比较,pmR-premiR630表达质粒转染48 h和72 h后miR-630的表达水平增高了(4.49±0.59)和(9.16±1.50)倍(P均<0.05)。与对照空质粒转染48 h和72 h后细胞活力为1.26±0.09和1.84±0.03相比较,miR-630表达质粒转染48 h和72 h后细胞活力降低到 0.89±0.09和1.34±0.23(P均<0.05)。细胞转染miR-630表达质粒转染48 h后细胞周期中S期降低。生物信息学预测到BCL2是miR-630的一个靶点。与对照组相比较,pmR- premiR630表达质粒转染48 h和72 h后BCL2蛋白的表达分别下降了(0.6±0.03)和(0.4±0.01)倍(P均<0.05)。细胞转染 miR-630表达质粒后BCL2蛋白表达降低。结论 miR-630通过抑制BCL2表达来抑制肺癌细胞的生长。 相似文献
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目的体外构建胶原—壳聚糖复合支架材料,分析其物理化学性质及生物相容性,探讨其应用于组织工程支架材料的可行性。方法利用冷冻干燥的方法构建三维多孔的胶原支架材料,通过甲醛交联以及添加壳聚糖的方法改善其物理化学性能。通过体外降解实验以及电镜扫描的方法检测材料的各项物理化学指标;通过细胞接种的方法研究材料的生物相容性。结果胶原—壳聚糖复合材料通过冷冻干燥的方法,能够获得稳定的三维多孔结构,电镜显示孔隙贯通,体外降解速度降低,并且能够支持细胞生长。理化性质分析显示该结构适合细胞生长,具有良好的生物相容性。结论本课题体外构建胶原—壳聚糖复合支架材料,满足组织工程生物材料的理化以及生物相容性要求,为其应用于组织工程支架材料提供重要的依据。 相似文献
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动态心电图(DCG)是现代临床心电图发展的重要分支,对心律失常可作出准确的定性和定量分析,不仅可确定心律失常有无、种类、数量,而且可确定心律失常起止时间以及日常生活及自觉症状之间的关系,还可以了解不同心律病心律失常发作的不同特点,这对及早诊断和治疗疾病,判断患者预后有重要临床价值.为了提高心律失常的检出率,以弥补常规心电图检查的不足,我们对402例患者进行了DCG检查,分析如下. 相似文献
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动态心电图 (DCG)是现代临床心电图发展的重要分支 ,对心律失常可作出准确的定性和定量分析 ,不仅可确定心律失常有无、种类、数量 ,而且可确定心律失常起止时间以及日常生活及自觉症状之间的关系 ,还可以了解不同心律病心律失常发作的不同特点 ,这对及早诊断和治疗疾病 ,判断患者预后有重要临床价值。为了提高心律失常的检出率 ,以弥补常规心电图检查的不足 ,我们对 4 0 2例患者进行了 DCG检查 ,分析如下。1 资料与方法取我院 2 0 0 3年 8月至 2 0 0 4年 4月期间住院及门诊老龄病例 4 0 2例 ,男 2 5 4例 ,女 14 8例 ,年龄在 6 5岁～ 10… 相似文献
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为了解中老年冠心病患者 2 4ｈ不同时间段其心脏自主神经活性的变化情况 ,我们于 1996年 1月～ 2 0 0 0年 12月对3 0 0例中老年人做了 2 4ｈ动态心电监测 ,分析其反映心脏自主神经活性的心率变异 (ＨＲＶ)指标 ,现分析报告如下。1 资料与方法5 0例健康者为正常对照组 ,男 3 8例 ,女 12例 ,年龄 45～ 85岁 ,经体格检查、心电图、超声心动图 (ＵＣＧ)和胸部Ｘ线片检查均无异常 ,并排除了心脑血管疾病 ,糖尿病和甲状腺疾病者。 2 5 0例冠心病患者 ,男 170例 ,女 80例 ,年龄 48～82岁。冠心病诊断依据国际心脏病学会和ＷＨＯ诊断标准[1 ] 。采… 相似文献
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