免疫相关基因HCST对肾透明细胞癌预后的影响及其机制

目的:分析造血细胞信号转导因子(hematopoietic cell signal transducer,HCST)在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中的表达及与ccRCC预后、免疫浸润的关系,探讨HCST对ccRCC细胞生长侵袭的影响及其作用机制。方法:利用TCGA数据库分析HCST基因在ccRCC组织中的表达水平。Cox比例风险模型分析HCST表达水平及临床特征与ccRCC患者预后的关系。肿瘤免疫评分数据库（tumor immune estimation resource,TIMER）分析ccRCC组织中HCST表达水平与免疫细胞浸润程度的相关性。体外培养ACHN细胞,分为对照组、siRNA阴性对照组和HCST siRNA组。MTT法、流式细胞实验和Transwell实验分别检测各组ACHN细胞增殖、凋亡和侵袭活性。蛋白质印迹法检测caspase-3、Bax、Bcl-2、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果:与正常肾脏组织比较,HCST mRNA在ccRCC组织中的表达显著上调,且与肿瘤的分期、淋巴转移及远处转移正相关(P＜0.01)。HCST高表达、肿瘤T分期及M分期是影响 ccRCC患者预后的独立危险因素(P＜0.05)。ccRCC中HCST表达与CD8+T细胞、树突状细胞、NK细胞及Treg细胞的浸润程度正相关(P＜0.001)。与对照组比较,HCST siRNA组ACHN细胞的增殖活性、侵袭能力、Bcl-2、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),ACHN细胞凋亡活性、caspase-3、Bax和E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P＜0.05)。siRNA阴性对照组与对照组比较上述各指标,差异无统计学意义(P＜0.05)。结论:HCST在ccRCC中表达上调,且与ccRCC患者的免疫浸润和预后相关。沉默HCST的表达可抑制ccRCC细胞的增殖与侵袭、促进其凋亡。     

SLC9A3-AS1调控miR-148a-3p/ROCK1信号轴影响肾癌细胞生物学功能

目的 检测lncRNA SLC9A3-AS1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)组织与肾癌细胞中的表达水平,探讨其促进肾癌细胞恶性生物学行为的机制。方法 应用GEPIA2在线软件(http://gepia2.cancer-pku.cn/)分析TCGA数据库中SLC9A3-AS1在ccRCC组织中的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SLC9A3-AS1在不同肾癌细胞系、24例ccRCC组织与癌旁正常肾脏组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和Transwell小室迁移实验检测敲低SLC9A3-AS1表达对肾癌细胞增殖与迁移的影响;应用蛋白质免疫印迹法检测增殖与迁移相关信号通路蛋白的表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证SLC9A3-AS1与miR-148a-3p/ROCK1轴的靶向调控关系。结果 GEPIA2软件分析结果显示,相较正常肾脏组织,SLC9A3-AS1在肾透明细胞癌组织中表达显著上调(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,...