重组人BAFF112-285的制备及活性分析

目的 制备具有功能活性的重组人TNF家族的B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)胞外区112—285氨基酸残基段(rhBAFF112—285)，为BAFF的深人研究奠定基础。方法 提取人HL-60细胞总RNA，经RT—PCR扩增编码人BAFF胞外区112—285氨基酸残基(BAFF112—285)的cDNA，行序列测定后，构建于原核表达载体pQE—80L并转化大肠杆菌DH5α，经IPTG诱导表达rhBAFF112—285，Ni^2 —NTA层析纯化，进而经^3H—TdR掺人实验检测其免疫学活性。结果 RT—PC双扩增得到了525bp的DNA片段，序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF112—285的cDNA序列一致，该胞外区片段在大肠杆菌中获得了高效表达，表达水平达细菌总蛋白的45．7％，经纯化后纯度可达98．4％，活性检测证实其能明显刺激外周血淋巴细胞活化。结论 利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF112—285，所获纯化产物具有生物学活性，所获结果为进一步研究创造了条件。     

若干重要药用植物的成分研究

本项目长期致力于我国重要药用植物成分结构与功能方面的基础研究,旨在揭示其控制疾病和生态适应性的科学内涵并为新药和新资源发现提供重要线索。采用现代波谱和色谱方法与国际公认的分子、细胞和动物水平的功能评价体系高效集成,深入系统地研究了220 种传统用途明确且具自然竞争优势重要药用植物的内含物,揭示了它们的物质基础与作用特点,获得了大量重要科学数据。为将药用植物的资源优势及其相关知识积累及时转化成现代新药研究领域急需的新生长点进行了大量的研究工作。另外,植物不能主动逃避任何威胁,它们可能是靠有关成分来应对干旱、暴晒、昆虫和病菌攻击等多种挑战。本项目对如何有效地分析活性物质特殊性并揭示植物“生态适应力”与“成分”的关联性进行了长期不懈的研究,发现了大量有生物学功能和/或化学系统学意义的新成分,并阐明了相关化合物的光谱学规律和生物活性特点。此发现既揭示了这些植物的药用价值和化学系统学特征,又为重要成分的新来源研究提供了重要线索,积累了大量重要科学数据,对其它来源的天然产物研究具有广泛的参考价值。     

从噬菌体构象型7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽

目的 :从噬菌体构象型 7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽。方法 :用重组人BLyS筛选噬菌体构象型 7肽库 ,用间接ELISA、竞争ELISA和细胞增殖活性试验鉴定噬菌体克隆。结果 :经过 3轮亲和筛选 ,噬菌体的回收率增加 ,阳性克隆得到富集。所获两个阳性噬菌体克隆能特异性地抑制BLyS刺激细胞增殖的活性。结论 :获得了噬菌体呈现的能够抑制BLyS的两个短肽。     

生姜中二苯庚烷类化合物的抗氧化 和细胞毒活性研究

目的：研究生姜中二苯庚烷类化合物(1 ~ 5)的抗氧化和细胞毒活性。方法：采用吸光度测试法检测化合物于50 mg •L–1清除超氧阴离子的效果,同法检测化合物(1 ~ 5)清除1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基之半数清除浓度（IC50）,用MDA检测法检查化合物于100 mg•L–1浓度下抑制大鼠脑匀浆脂质过氧化的能力,以及用MTT法研究化合物抑制过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)损伤的活性,并采用MTT法检测化合物对人慢性髓源性白血病细胞株(K562)及其阿霉素耐药株(K562/ADR)的细胞毒活性（IC50）。 结果：化合物1 ~ 5对DPPH自由基有较好的清除作用,化合物5的清除作用最强,IC50（22.6 ± 2.4）μmol•L-1;化合物1,3和4有抑制大鼠脑匀浆脂质过氧化作用,100 mg•L–1其抑制率分别为(66.3 ± 15.4)%,(68.7 ± 15.8) %,(72.2 ± 10.6)%;化合物1,3和4对H2O2诱导的PC12细胞损伤有明显的保护作用,且呈量效关系;化合物3对K562及其阿霉素耐药株(K562/ADR)体外增殖有抑制作用,其IC50分别为(34.9 ± 0.6),（50.6 ± 23.5） μmol•L-1。结论：生姜中的二苯庚烷类化合物1 ~ 5具有特异性的抗氧化作用,化合物3对K562和K562/ADR细胞均显示出显著的细胞毒作用。     

定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法

通过口腔滴注表皮生长因子（EGF），观察小鼠舌上能上能下细胞生长和表皮生长因子受体（EGF-R）的表达。研究EGF影响舌苔形成的分子机制。舌组织经HE染色，EGF-R SABC免疫组化染色和图像分析数据处理系统（CMIAS-98A多功能图象分析仪）进行分析。结果表明，EGF可能通过EGF-R机制进行信号传导促进小鼠舌上皮细胞增生，舌粘膜增厚，EGF-R表达增多。