代谢组学技术在糖尿病视网膜病变中的研究进展

代谢组学是研究生物体系受外部刺激或扰动后所产生的内源性代谢物整体及其变化的新兴学科.糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)代谢组学共同特征表现在三大代谢途径及抗坏血酸途径的显著富集,其中d-葡萄糖、2-脱氧核糖酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、精氨酸、瓜氨酸、脯氨酸及肉碱含量升高,抗坏血酸、天冬氨酸及...     

基因治疗视网膜母细胞瘤的研究进展

基因治疗视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)是近年来新型的治疗方法。我们从自杀基因、抑癌基因、抗血管生成基因这三方面对RB的基因治疗现状、相关进展及存在问题作一综述。     

增强型绿色荧光蛋白与Rb94基因共表达载体的构建和表达

目的 构建增强型绿色荧光蛋白与Rb94基因的真核共表达载体并鉴定其在真核细胞中的表达.方法 用PCR技术对cDNA-Rb质粒中的目的基因片段进行扩增,使用BamHⅠ和SalⅠ进行双酶切,切胶回收DNA片段.将其连接入pEGFP-C1,构建pEGFP-C1/Rb94真核表达载体并再进行酶切鉴定.将重组质粒用脂质体转染法转染至人视网膜母细胞瘤细胞(HXO-Rb44)中,荧光显微镜下观察EGFP在细胞内的表达,Western blot检测Rb蛋白的表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 重组克隆载体内的目的片段序列与Rb94基因序列完全一致.pEGFP-C1/Rb94酶切鉴定结果与预期结果一致.荧光显微镜下观察可见转染后的细胞有荧光出现.Western blot检测结果表明Rb94基因得到了有效表达.流式细胞仪检测结果显示,含Rb94基因的细胞凋亡率为(21.17±0.45)%,明显高于其他组(P<0.05).结论 成功构建EGFP和Rb94真核共表达载体,并可在真核细胞中有效表达,Rb94对视网膜母细胞瘤细胞有明显抑制生长作用.     

Nd:YAG玻璃体消融激光治疗症状性玻璃体混浊的疗效观察

目的 探讨钕-钇铝石榴石(Nd:YAG,YAG)玻璃体消融激光相较于卵磷脂络合碘胶囊治疗症状性玻璃体混浊的临床有效性及安全性.方法 回顾性分析该院眼科门诊2018年6月至2020年6月收治的140例(219眼)症状性玻璃体混浊患者,其中68例(93眼)设为激光组,采取Y A G玻璃体消融激光治疗;72例(126眼)设为对照组,采用口服卵磷脂络合碘胶囊治疗.对比治疗前后两组患者的最佳矫正视力(BCVA)、非接触式眼压和疗效评分,评价两种治疗方法的效果.结果 治疗后激光组与对照组BCVA及非接触式眼压较各自治疗前均无明显差异(P>0.05),且两组组间亦无明显差异(P>0.05).治疗后,激光组患者主观感受评分总有效率明显高于对照组(78.5％v s.59.5％,P<0.05),且激光组主观感受疗效评分及玻璃体混浊评分情况明显优于对照组(P<0.05).两组均未发生严重的不良事件.结论 YAG玻璃体消融激光相较卵磷脂络合碘胶囊治疗症状性玻璃体混浊疗效更佳,操作简便,且安全性高.     

裸鼠视网膜下注射HXO-Rb_（44）细胞建立视网膜母细胞瘤动物模型

目的建立一种生物学行为更接近临床的视网膜母细胞瘤（Rb）动物模型。方法 Rb细胞取HXO-Rb44细胞系,培养于含质量分数10%胎牛血清的改良型RPMI-1640培养基内,细胞悬液密度调至（5.0～6.0）×106/mL备用。30只裸鼠,分为视网膜下组和玻璃体腔组,每组各15只鼠30只眼。2组注射HXO-Rb44细胞悬液后每天裂隙灯下观察裸鼠眼内Rb肿物生长情况,并于注射后21、28、35、42d,根据组织病理学检查统计成瘤情况,比较2组成瘤率。行Rb特异性标志神经元特异性烯醇酶（NSE）及酸性钙结合蛋白（S100）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫组织化学检测。结果视网膜下组和玻璃体腔组在注射后均观察到肿瘤在裸鼠眼内生长并逐渐增大。注射后21、28、35、42d,视网膜下组成瘤率高于玻璃体腔组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。免疫组织化学染色提示,Rb细胞质NSE表达较强,S100表达较弱,GFAP表达最弱。结论在同等条件下建立Rb动物模型,视网膜下注射的成瘤率高于玻璃体腔内注射者,且视网膜下注射建立的是原位肿瘤模型,生物学行为更接近临床。     

网络智能教学联合PBL教学法在全科医师眼科教学中的应用

目的 探讨眼科学的全科住院医师规范化培训（简称住培）轮转教学中,融入“雨课堂”联合以问题为基础的教学法（problem-based learning,PBL）的教学效果。方法 选定100名来自重庆医科大学附属第二医院眼科学习的全科住培学员为研究对象,时间为2017年9月至2022年11月。采用随机分组方法将其平均分为研究组和对照组,各50名。研究组采用“雨课堂”联合PBL教学法,对照组采用传统的以授课为基础的教学法（lecture-based learning,LBL）。最后对两组教学效果和学员的满意程度进行分析比较。结果 相较于对照组,研究组学员对教学方式满意度更高,对学习兴趣、学习主动性、课堂参与度、临床诊疗思维以及学习效率均有更高的评价,差异有统计学意义（P <0.05）。此外,研究组学员的实习成绩得分显著优于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 “雨课堂”联合PBL教学法为优化眼科阶段的全科住院医师规范化培训提供了新的思路和方向。