基于网络药理学探讨何首乌-丹参治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的应用网络药理学方法预测何首乌-丹参抗阿尔茨海默病(AD)的作用靶点及相关信号通路,挖掘其抗AD的作用机制。方法通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)网站检索何首乌-丹参的活性成分及对应的作用靶点,再通过Drugbank数据库、Dis Ge NET数据库和TTD数据库获得AD的主要致病靶点,采用Cytoscape 3.7.1软件构建药物活性成分-靶点网络图,利用STRING数据库构建蛋白与蛋白相互作用网络,然后运用生物信息学的方法对关键靶点进行基因功能分析和通路富集分析,最后采用MTT法、ELISA法、比色法和实时荧光定量PCR法对网络药理学主要预测的生物过程与信号通路进行验证。结果研究共筛选出何首乌-丹参药对的有效成分24个,对应靶点274个,与AD相关靶点共107个,相关信号通路前10条,GO分析相关度前20个靶点分子功能。细胞实验证实了何首乌-丹参能有效提高PC12细胞的细胞存活率及抑制PC12细胞的炎症反应和氧化应激反应,并促进Nrf2/HO-1信号通路的激活。结论何首乌-丹参主要是通过抗炎和抗氧化应激对AD产生重要的治疗作用,为后续临床治疗AD提供新的思路。     

二苯乙烯苷和远志总皂苷配伍对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的影响

目的探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glycoside,TSG)和远志总皂苷(Tenuigenin,TEN)配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响。方法PC12细胞除空白组外运用Aβ25-35诱导建立阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型,被随机分成模型组、TSG(200 mmol/L)组、TEN组(100 mg/L)、TSG-TEN配伍组(TSG200 mmol/L+TEN100 mg/L)、多奈哌齐组(10μmol/L)。采用MTT比色法检测各组细胞存活率;取细胞上清液分别测各组的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量及乙酰胆碱酯酶(AchE)、超氧化物歧化酶(SOD)活力;统计各组的细胞分化率。结果(1)细胞存活率的高低为:TSG-TEN组>TSG组>多奈哌齐组>TEN组(P<0.01);TSG组、TEN组、多奈哌齐组均低于TSG-TEN配伍组(P<0.01,P<0.05);(2)与模型组比较,TSG组、TEN组、TSG-TEN配伍组可降低LDH含量、MDA含量、抑制AchE活力及增强SOD活力(P<0.05)。且TSG-TEN配伍组对降低LDH含量、MDA含量、抑制AchE活力及增强SOD活力效应比TSG或TEN单用组效应更好(P<0.01);(3)PC12细胞的分化率高低为:TSG-TEN组>多奈哌齐组>TSG组>TEN组(P<0.01,P<0.05);TSG组、TEN组、多奈哌齐组均低于TSG-TEN配伍组(P<0.01,P<0.05)。结论TSG和TEN配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有显著的协同保护作用,其作用机制可能与改善胆碱能系统、抗氧化应激、降低突触可塑性损伤有关,且TSG优于TEN。     

何首乌-石菖蒲药对治疗阿尔茨海默病网络药理学研究及实验验证

目的 应用网络药理学方法预测何首乌-石菖蒲药对治疗阿尔茨海默病的作用靶点及相关信号通路,探讨其作用机制.方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索并筛选何首乌、石菖蒲的潜在活性成分,并查询活性成分作用靶点,采用DrugBank数据库和Pharmmapper服务器预测有效化学成分的作用靶点,采用Cytos...     

周小青教授临证辨证思路

介绍周小青教授基于多年临床、教学、科研实践经验对中医诊断临证运用的思考.以"中医主诉辨证诊断体系"为主体思路,支撑起其临证辨证思想体系中最具特色、最为核心的部分,向中医诊断辨证规范化、信息化研究方向更迈进一步;以"症对与症队"为简捷思路,发展中医"计量"诊断学,简化诊断分析过程;以"人体认识三分法、中西医诊察结合、病证...     

五首活血化瘀方对血瘀证新西兰兔血脂代谢、肝脏组织及ABCA1、PPARγ表达的影响

目的 观察5首活血化瘀方对血瘀证新西兰兔血脂代谢、肝脏组织及三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）、过氧化物酶体增殖物激活型受体γ（PPARγ）表达的影响,对比其作用差异,为临床选方用药提供实验室依据。方法 70只新西兰兔随机分为正常组（10只）和造模组（60只）,造模组采用“饥饿+高脂饲料+肾上腺素”方法建立血瘀证模型,造模成功后随机分为模型组、血府组（血府逐瘀汤3.55 g·kg^-1·d^-1）、丹参组（丹参饮1.962 g·kg^-1·d^-1）、失笑组（失笑散0.56 g·kg^-1·d^-1）、活络组（活络效灵汤2.80 g·kg^-1·d^-1）、桃红组（桃红四物汤2.66 g·kg^-1·d^-1）,各复方组灌胃相应复方,正常组和模型组灌胃同等剂量蒸馏水,连续灌胃30 d。治疗结束后腹主动脉取血,检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A1（ApoA1）含量;苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏组织病理形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝脏组织ABCA1、PPARγ mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测ABCA1、PPARγ蛋白质表达。结果 与正常组比较,模型组HDL-C、LDL-C、TG、TC水平、PPARγ mRNA及蛋白质水平升高（P<0.01）,ApoA1水平降低（P<0.05）,ABCA1 mRNA及蛋白质水平降低（P<0.01）;与模型组比较,5首活血化瘀方HDL-C水平均降低（P<0.05,P<0.01）,血府组与失笑组TG水平降低（P<0.05）,失笑组LDL-C、TC水平降低（P<0.05）,活络组、桃红组ApoA1水平升高（P<0.05,P<0.01）;血府组、失笑组、活络组、桃红组ABCA1 mRNA水平均升高（P<0.01）,5首活血化瘀方均可升高ABCA1蛋白质水平（P<0.05,P<0.01）;5首活血化瘀方PPARγ mRNA水平均降低（P<0.01）,血府组、失笑组、活络组、桃红组PPARγ蛋白质水平均降低（P<0.01）。结论 5首活血化瘀方对血脂异常有一定的调治作用,其可能是通过增加ApoA1、ABCA1的表达促进HDL-C的生成及加强功能异常HDL-C的排泄达到调治作用,其中降脂作用最强的是血府逐瘀汤。     

基于网络药理学的淫羊藿治疗阿尔茨海默病作用机制研究

目的 基于网络药理学,探讨淫羊藿治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的作用靶点及通路,明确其作用机制。方法 借助TCMSP数据库及Uniprot数据库筛选出淫羊藿有效成分及靶点基因。通过Drugbank、Dis Ge NET和TTD数据库筛选出AD的靶点基因;成分靶点与疾病靶点映射后使用Cytoscape 3.7.1软件构建药物有效成分-靶点蛋白相互作用网络,使用STRING数据库绘制靶点蛋白-靶点蛋白相互作用网络;对靶点蛋白利用Metascape数据库进行GO分析和KEGG分析,最后采用MTT试验和荧光实时定量PCR对网络药理学主要分析结果进行验证。结果 筛选得到23个淫羊藿活性成分,共预测获得239个淫羊藿药效靶点和2 156个AD的治疗靶点,取交集后得到152个淫羊藿治疗AD的靶点,蛋白互作分析提示GSK3β、AKT1、CDK5、CDK5R1、APP、MAPK1、MTOR为蛋白互作网络中的关键靶点。淫羊藿关键靶点主要关联AD、β-淀粉样蛋白聚集、tau蛋白异常磷酸化、炎症反应、氧化应激、细胞凋亡等;细胞实验提示,淫羊藿可显著提高Aβ_25-35诱导PC12细胞的细胞存活率,并参与调控GSK-3β、AKT1、CDK5介导的β-淀粉样蛋白聚集及tau蛋白磷酸化通路。结论 淫羊藿治疗AD具有多活性成分-多作用靶点-多联系通路的特点,本研究为系统阐明淫羊藿治疗AD作用机制提供了科学依据。     

血瘀证与血脂代谢关系研究进展

血瘀证是由血液运行不畅或血液停滞脉内或脉外导致的病变,为诸多疾病的主要证候。诸多学者对血瘀证开展了广泛研究,并发现血瘀证与血脂代谢有密切关系,即血脂代谢在血瘀证的形成过程中扮演着重要角色。结合现代医学对血瘀证与血脂代谢关系的研究,从炎症反应、血管内皮细胞功能、微循环、血液流变学和纤维-凝血系统等角度总结血脂代谢对血瘀证形成的影响,以期对从血瘀证角度研究血脂代谢紊乱的药物治疗提供新思路。     

基于网络药理学研究六味地黄丸治疗阿尔茨海默病作用机制

目的 基于网络药理学探讨六味地黄丸治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法 从TCMSP数据库筛选六味地黄丸治疗AD的活性成分,并构建药物-靶标网络、蛋白与蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,运用生物信息学分析方法进行GO分析、KEGG通路富集分析和PPI网络分析。采用荧光实时定量PCR对网络药理学主要分析结果进行验证。结果 分析结果表明,六味地黄丸主要关联AD的β淀粉样蛋白聚集、Tau蛋白的磷酸化、细胞凋亡、氧化应激反应、炎症反应、自噬、胰岛素代谢等;体外实验提示,六味地黄丸参与调控APP介导的β淀粉样蛋白聚集,GSK-3β介导的Tau蛋白磷酸化,GNB1介导的炎症反应,Caspase-3介导的细胞凋亡,MAOB介导的氧化应激反应,mTOR介导的自噬,以及INSR介导的胰岛素代谢等通路。结论 六味地黄丸治疗AD具有多成分、多靶点的特点,可为进一步研究其作用机制提供依据。     

精准医学影响下的中医计量诊断模型探讨

中医诊断自古就有"量"的概念,但多以描述为主,缺乏数据,从而增加其模糊性.为此诸多学者从宏观症状、体征的量化等方面着手,结合计算机及统计学方法对中医诊断的计量化发展进行了探索.但由于对体质因素、地理环境因素、时令因素等"三因"及西医微观诊断的忽略,中医计量诊断发展存在一些不足之处,影响其精准化进展.精准医学概念的提出契...