用荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体方法的建立

用荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体方法的建立郑履康邓丽霞张桥本课题由国家自然科学基金３９４７０６０８与中华医学基金（ＣＭＢ）资助中山医科大学遗传毒理研究室（广州５１００８９）已知非整倍体与流产、畸形及肿瘤的发生均有关系。为此，我们在国外研究基础上...     

维生素B6（VitB6）对姐妹染色单体互换（SCE）频率的影响

本文研究了维生素Ｂ６体外体内试验对ＳＣＥ频率的影响，体外试验不同剂量ＶｉｔＢ６诱发中国仓鼠肺细胞株细胞及人周血淋巴细胞的ＳＣＥ频率显著升高，但体内试验ＶｉｔＢ６诱导的小鼠骨髓细胞ＳＣＥ频率与对照组比较无显著性差别。看来ＶｉｔＢ６在体内不是致突变剂。     

苯系混合物对作业工人口腔颊粘膜脱落上皮细胞微核率的影响

苯系混合物对作业工人口腔颊粘膜脱落上皮细胞微核率的影响郑履康，邓丽霞，刘力，冯坚持（广州中山医科大学遗传毒理研究室５１００８９）本研究选某鞋厂接触苯系混合物女工３５名年龄１７～３２岁，工龄半年以上为苯接触组，另选不接触工业有害毒物、年龄用当的职工、学...     

利用小鼠受精卵染色体分析系统监测环境化学物对生殖细胞的诱变作用

本试验用(C_57×CFA)F_1雄小鼠精子与NIH品系雌小鼠卵进行体外受精制备受精卵第1次卵裂中期相染色体标本,应用改良Tyrode’s T6培养液作为精子获能、受精和受精卵培养。受精卵在加有细胞分裂抑制剂硫酸长春花碱的培养液中培养后,在制备的染色体标本中可以清楚地区分为二簇,一簇来自精子另一簇来自卵。我们用甲磺酸甲酯     

苯诱导生殖细胞染色体非整倍体和DNA损伤的研究

[目的 ]研究苯对人生殖细胞染色体非整倍体和DNA的影响。 [方法 ]用地高辛标记 9号染色体着丝粒探针 (D9Z1)和生物素标记的 18号染色体着丝粒探针 (D18Z1)与接触工人间期精子核进行双色荧光原位杂交 ,测定精子染色体非整倍体率 ,并用改良的精子单细胞凝胶电泳 (SCGE)方法测定精子DNA损伤。 [结果 ]车间空气中苯平均几何浓度 86 49mg/m3 ,高于国家卫生标准 1倍 ;苯暴露工人尿粘糠酸显著高于对照组。对工人精子的分析 ,共计数 14名暴露工人 136 40 1条精子 ,16名对照工人15 6 95 5条精子。暴露组 9、18染色体双体精子率分别为 0 16 8%和 0 0 5 5 % ,二倍体精子率为 0 0 73% ,均高于对照组相应数值 (分别为 0 0 5 0 %、0 0 33%和 0 0 40 % )。其中 9号染色体双体率高于对照值 3倍 ,18号高于对照 1倍 ;暴露组 9、18号染色体缺体率分别为 0 2 0 6 %和 0 0 6 8% ,高于对照组值 ( 0 0 6 7%和 0 0 48% )。总数目畸变率 ( 0 5 70 % )亦高于对照组值 ( 0 2 18% )。 9、18号染色体双体率和缺体率接近 1∶1的比率 ,符合超倍体与亚倍体在减数分裂过程中同时产生 ,数目相同的遗传规律。SCGE检测结果 ,以精子DNA头部完整的百分比为检测参数 ,暴露组 (n =13)工人精子DNA头部完整的百分比为 70 18% ,明显低     

苯对人精子DNA损伤的影响

目的: 研究苯是否引起接触工人精子DNA损伤。　方法: 选择 2年以上苯系物作业工人 27例为暴露组,无苯系物接触史者 35例为对照组,采用高压液相色谱法测定空气苯系物浓度;研究对象尿中反式粘糠酸浓度。采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测部分工人 (暴露组 13例,对照组 16例 )精子DNA损伤。　结果: 作业点苯浓度为(86. 49±2. 83)mg/m3,高于国家标准(40mg/cm3 )1倍以上;暴露组尿中反式粘糠酸平均浓度为 (1. 40±0. 62)mg/L,对照组为(0. 82±0. 16 )mg/L,P<0. 01;以DNA头部百分比为检测参数,SCGE结果显示,暴露组为 ( 70. 18±7. 36)%,明显低于对照组(90. 62±2. 94)%,P<0. 001。　结论: 苯可以引起精子DNA断裂损伤。     

在高温球温度下服习的最高劳动强度

南非金矿有30多万班图族工人,大多是一年的合同工,每年几乎全部更换。矿井深3,000多米,工人在水蒸汽饱和的     

双色荧光原位杂交检测苯系物接触者精子7、8号染色体数目畸变

目的　检测苯系物接触者精子 7、8号染色体数目畸变率。方法　用生物素标记 7号染色体探针 (D7Z1)和地高辛标记 8号染色体探针 (D8Z1)与精子核进行双色荧光原位杂交 ,测定精子染色体畸变率。结果　车间空气中苯的时间加权浓度为 42 .2 9mg/m3 ,高于国家卫生标准 ( 6mg/m3 )。苯系物接触者尿粘康酸浓度 ( 0 .861mg/g肌酐 ) ,高于对照组 ( 0 .44 4mg/g肌酐 )。杂交效率 99.77%～ 99.97% ,共计数15例苯系物接触者 15 5 72 1条精子核和 12名对照组者 12 3 771条精子核型。接触组二倍体精子率 ,平均7、8号染色体双体精子率 (分别为 0 .12 9%、0 .170 %和 0 .0 78% )均高于对照组 (分别为 0 .0 5 5 %、0 .0 5 3 %、0 0 3 3 % )。接触组 7号、8号染色体缺体精子率 (分别为 0 .165 %和 0 .0 88% ) ,也分别高于对照组 ( 0 .0 5 6%、0 0 2 9% )。总数目畸变精子率接触组为 0 .745 % ,高于对照组的 0 .2 89%。结论　较高浓度的苯系物暴露可引起接触者精子 7、8号染色体非整倍体率和二倍体精子率增高。     

单细胞凝胶电泳技术的应用与进展

1　检测原理ＤＮＡ为紧密的四级超螺旋结构 ,一般情况下 ,部分ＤＮＡ的单链断裂对ＤＮＡ的结构影响不大 ,不容易释放。在单细胞凝胶电泳 (ＳＣＧＥ)实验中 ,由于细胞裂解液的作用 ,膜结构受到破坏 ,胞内成份扩散到裂解液中 ,ＤＮＡ由于相对分子质量大留在原位。在碱性条件下 ,ＤＮＡ解螺旋 ,ＤＮＡ的断链和亲碱性片段释放 ,在电场中移动 ,形成彗星样图像。通过测定ＤＮＡ迁移部分的光密度或迁移距离可以测定ＤＮＡ的损伤程度[1] 。2　实验方法目前多采用Ｓｉｎｇｈ等的“三明制”法制板[1] ,第一层为正常熔点琼脂糖(ＮＭＡ) ,第二层为含有细…     

苯诱导小鼠卵母细胞及1细胞合子雌原核染色体非整倍体的研究

目的：研究苯对卵母细胞和1细胞合子雌原核染色体非整倍体率的影响。方法：成年雌性NIH小鼠,1次灌胃（942、1881和3762mg/kg)与多次吸入（706、1992和4864mg/m^3)染毒,灌胃后雌雄鼠以1：1同笼过夜,收集卵母细胞和1细胞合子作细胞遗传学分析,测定非整倍体率。结果小鼠吸入染毒3个剂量组的每2次减数分裂中期（MⅡ）卵母细胞非整倍体率分别为7．06％、7．50％和9．76％,明显高于对照组（1．30％）,有剂量－效应关系,同时也观察到第1次减数分裂中期（MⅠ）卵母细胞减数分裂停滞,MⅠ卵母细胞频率分别为1．16％、3．61％和5．75％,高于对照组（0．00％）,有剂量－效应关系,在灌胃组仅见剂量组MⅡ卵母细胞非整倍体率增高,1细胞合子雌原核非整倍体率未见效应关系,在灌胃组仅见高剂量组MⅡ卵母细胞非整倍体率增高,1细胞合子雌原核非整倍体率未见增高。结论：吸入或灌胃给小鼠高剂量苯,可诱导MⅡ卵母细胞非整体倍率增高。