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目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对原代人皮肤成纤维细胞凋亡的影响,以及二甲双胍(Metformin)对原代皮肤成
纤维细胞凋亡是否存在保护作用。方法取对数生长期的皮肤成纤维细胞,分为空白组,BSA对照组(300 μg/mL),AGEs刺激组
(100、200、300 μg/mL),药物组(AGEs 300 μg/mL+Metformin 1 mmol/L),采用CCK-8检测24、48、72 h细胞凋亡情况;Western
Blot检测细胞培养72 h后凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Bcl-2表达情况。结果CCK-8结果显示AGEs诱导皮肤成纤维细胞凋
亡呈浓度及时间依赖性,AGEs 300 μg/mL诱导72 h后可见细胞凋亡明显增多(0.72±0.02 vs 1±0.04,P<0.05),加入二甲双胍后可
对成纤维细胞起一定保护作用(0.98±0.02 vs 0.72±0.02,P<0.05)。Western Blot显示AGEs 300 μg/mL刺激成纤维细胞72 h后,
caspase-3、Bax 蛋白表达增加(P<0.05),而Bcl-2 蛋白表达下降(P<0.05),Bcl-2/Bax 比值下降(P<0.05),二甲双胍作用后
caspase-3、Bax蛋白表达水平较刺激组明显下降(P<0.05),而Bcl-2及Bcl-2/Bax比值则明显上升(P<0.05)。结论AGEs可诱导
人皮肤成纤维细胞凋亡增加,二甲双胍可以通过调控caspase-3、Bax及Bcl-2表达,从而起到抗凋亡作用。
相似文献
纤维细胞凋亡是否存在保护作用。方法取对数生长期的皮肤成纤维细胞,分为空白组,BSA对照组(300 μg/mL),AGEs刺激组
(100、200、300 μg/mL),药物组(AGEs 300 μg/mL+Metformin 1 mmol/L),采用CCK-8检测24、48、72 h细胞凋亡情况;Western
Blot检测细胞培养72 h后凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Bcl-2表达情况。结果CCK-8结果显示AGEs诱导皮肤成纤维细胞凋
亡呈浓度及时间依赖性,AGEs 300 μg/mL诱导72 h后可见细胞凋亡明显增多(0.72±0.02 vs 1±0.04,P<0.05),加入二甲双胍后可
对成纤维细胞起一定保护作用(0.98±0.02 vs 0.72±0.02,P<0.05)。Western Blot显示AGEs 300 μg/mL刺激成纤维细胞72 h后,
caspase-3、Bax 蛋白表达增加(P<0.05),而Bcl-2 蛋白表达下降(P<0.05),Bcl-2/Bax 比值下降(P<0.05),二甲双胍作用后
caspase-3、Bax蛋白表达水平较刺激组明显下降(P<0.05),而Bcl-2及Bcl-2/Bax比值则明显上升(P<0.05)。结论AGEs可诱导
人皮肤成纤维细胞凋亡增加,二甲双胍可以通过调控caspase-3、Bax及Bcl-2表达,从而起到抗凋亡作用。
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正1980年,Trams等在研究正常细胞和肿瘤细胞脱落小体时首次提出"胞外囊泡"的概念,随后的研究发现,除网织红胞外,体内绝大多数细胞在自发或在多种因素刺激下,能够释放直径在30~100 nm之间的胞外囊泡到胞外。存在于人体各种体液中,参与多种不同的细胞功能状态和疾病发生发展。胞外囊泡最大的研究价值[1,2],在于其内含有大量特异性蛋白质及功能性mRNAs、miRNAs以及一些非编码RNA,甚至DNA(目前观察 相似文献
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目的 观察DPP4抑制剂西格列汀对ApoE基因敲除小鼠肾脏组织中早期生长反应因子-1(Egr-1)及纤连蛋白(FN)表达的影响.方法 8周龄雄性ApoE基因敲除小鼠12只,按随机数字表法分为西格列汀干预组(sig+apoE-/-组)和实验组(apoE-/-组),每组6只,另取C57BL小鼠6只作为正常对照组(control组).高脂饮食结合药物饲养16周后,行腹腔耐量实验,观察血糖水平,后收集24 h尿标本,用ELISA法检测24 h尿蛋白,随后取血并处死各组小鼠,血清学检测血脂变化,取肾组织行实时荧光定量PCR及免疫印迹(Western blotting),检测肾组织中Egr-1及FN的mRNA和蛋白表达水平.结果 血脂检测显示,实验组和西格列汀干预组小鼠甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白均显著高于正常对照组(P<0.05),实验组和西格列汀干预组间上述指标无统计学差异(P>0.05),而高密度脂蛋白在西格列汀干预组显著高于实验组(P<0.001)和正常对照组(P<0.001).IPGTT结果显示,apoE-/-组、sig+apoE-/-组和对照组3组间空腹血糖水平均没有显著差异(P>0.05).24 h尿液检测结果显示:apoE-/-组24 h尿白蛋白排泄量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.01);西格列汀治疗后,sig+apoE-/-组小鼠24 h尿白蛋白较apoE-/-组显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01).Real-time PCR和Western blotting检测显示:实验组肾皮质中,Egr-1及FN的mRNA水平和蛋白水平均高于正常对照组,而与实验组相比,西格列汀能显著降低Egr-1及FN的mRNA和蛋白水平.结论西格列汀可能通过调控Egr-1的表达从而下调FN,从而达到肾脏保护作用. 相似文献
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糖尿病肾病(DN)是糖尿病患者最常见的微血管并发症.在欧美等发达国家,DN已成为终末期肾病(ESRD)的首要病因.在我国,因DN而最终导致ESRD的比例也在逐年上升.DN的早期诊断和合理的治疗可有效地延缓疾病进展.因此,深入认识DN的发病机制,并对其发病的关键环节进行干预,不仅可减轻疾病给患者带来的痛苦,对减轻国家在卫生经济费用方面的负担也有重要意义.目前DN的发病机制仍未完全明确,近年有研究发现microRNA(miRNA)在基因中的调控作用可能成为DN一个新的诊断标志及治疗靶点[1].本文就miRNA在DN中的作用及相关机制进行综述. 相似文献
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