电针对脑梗塞大鼠缺血半影区星形胶质细胞形态的影响

目的： 观察电针对脑梗塞大鼠缺血半影区星形胶质细胞形态学的影响，为探讨针刺治病疗效和机制提供实验依据。方法： 线栓法建立大鼠脑梗塞动物模型，用免疫组织化学方法显示胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫阳性细胞，对比观察电针对模型大鼠脑皮质缺血半影区星形胶质细胞的形态影响。结果： 免疫组织化学方法显示电针对脑梗塞缺血半影区星形胶质细胞的数量、细胞面积比与对照组相比差异无显著意义。结论： 频率5-10 Hz和强度2 mA的电针穴位刺激没有影响缺血半影区内星形胶质细胞的形态,但是对GFAP的表达有上调的影响。     

电针刺激"曲池"和"足三里"对大鼠脑梗死影响的形态学观察

目的观察电针刺激对脑缺血大鼠脑梗死面积和梗死边缘区神经细胞形态学的影响,为探讨针刺治病疗效和机理提供实验依据。方法线栓法建立大鼠脑梗死模型,用MRI、光学和透射电子显微镜观察电针后,模型大鼠脑梗死面积及梗死边缘区神经细胞及超微结构的变化。结果MRI显示电针组大鼠的梗死区面积比对照组的明显缩小（P〈0．01）;光学显微镜下,电针1d组梗死边缘区神经细胞形态的缺血性损伤与对照组ld相比无显著性差异（P〉0．05）,电针组7d与对照组7d相比,细胞损伤程度和受损细胞数量,均有显著性差异（P〈0．01）;电子显微镜下,电针组缺血边缘区的神经细胞超微结构,如腺粒体的肿胀、嵴的破坏及核蛋白体变性程度均比对照组轻。结论电针穴位刺激能减小脑梗死面积并对梗死边缘区神经细胞提供一定的保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血动物模型的脑MRI研究

目的采用MRI检测神经功能缺失评分判定线栓法制作大鼠局灶性脑缺血动物模型的可靠性。方法用线栓栓塞大脑中动脉,制作大鼠局灶性脑缺血模型。缺血达到24h后,对神经功能缺失评分在1～4分的动物采用MRI检测梗死面积。结果MRI检测发现2只神经功能缺失评分在4分的大鼠梗死面积达到60mm2以上,而2只评分为1分的大鼠未观察到梗死区,10只大鼠梗死面积则集中在30～40mm2之间。结论评价大鼠局灶性脑缺血模型制作是否成功时,神经功能缺失评分法与MRI具有显著相关性(r=0.898,P<0.01)。由于评分为1分的大鼠有时MRI观察不到梗死区,所以为得到可靠的模型,最好剔除评分为1分的大鼠。     

电针对脑梗塞大鼠皮质缺血半影区内TGF-β1免疫阳性细胞的形态学影响

目的观察电针对脑梗塞大鼠皮质缺血半影区内转化生长因子免疫阳性细胞形态学的影响,为探讨胶质细胞参与针刺治病机理提供实验依据。方法线栓法建立大鼠脑梗塞模型,用免疫细胞化学方法显示针刺对大鼠皮质缺血半影区内转化生长因子阳性细胞的形态、分布及数量与非针刺组、假手术组和对照组的比较,寻找电针对TGF-β1阳性细胞的形态学影响。结果①大鼠脑皮质内转化生长因子阳性细胞的形态学观察对照组大鼠脑额叶皮质内可见散在圆形和椭圆形的转化生长因子阳性细胞。呈棕色TGF-β1免疫反应产物沉积在细胞膜。假手术组大鼠额叶皮质内TGF-β1免疫反应阳性细胞的分布和形态与对照组的未见明显组间差异。非电针组大鼠缺血半影区内可见大量肿胀、免疫反应增强的TGF-β1免疫阳性神经元。但其分布与对照组的比未见明显差异。电针组大鼠缺血半影区内TGF-β1免疫阳性细胞的肿胀程度比非电针组的明显减轻,细胞体积变小。在免疫反应程度上比非电针组得明显增强,免疫产物除沉积在细胞膜外,细胞质内亦可见。②大鼠皮质区内转化生长因子阳性细胞的数量统计对照组大鼠额叶皮质TGF-β1阳性细胞数量与假手术组的差异无统计学意义。非电针组的比对照组的明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。电针组大鼠缺血半影区内TGF-β1阳性神经元的数量比非电针组的明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论1～2mA强度的电刺激"曲池"和"足三里"穴位能上调大鼠额叶皮质缺血半影区内TGF-β1的表达,上调的TGF-β1可能参与对缺血性神经元损伤的保护过程。     

栓塞大鼠大脑中动脉对海马结构内星形胶质细胞的形态学影响

目的:探讨栓塞大鼠大脑中动脉是否可以引致海马结构内星形胶质细胞的形态学改变。方法:用免疫组织化学方法显示栓塞大脑中动脉大鼠、假手术大鼠和对照大鼠海马结构内的GFAP阳性的星形胶质细胞的形态和数量以及GFAP表达,对比组间差异,寻找梗塞对远离缺血中心区的海马结构内星形胶质细胞的影响。结果:栓塞大鼠大脑中动脉可以引致远离缺血中心区的海马结构内星形胶质细胞数量增多、体积增大和GFAP表达增加。结论:脑缺血损伤引起的胶质细胞激活不仅限于缺血中心区和边缘区,远离缺血中心区的脑区也可以出现神经胶质细胞形态学改变,即胶质细胞激活现象。     

短期双眼视觉剥夺对大鼠视网膜影响的蛋白组学研究

目的：探讨短期视觉剥夺对视网膜蛋白表达的影响。方法在大鼠出生后14 d,行双眼睑缝合14d,建立视觉剥夺模型。通过二维凝胶电泳分离视网膜蛋白,用PDQuest软件选择差异表达的蛋白,用质谱仪鉴定表达差异的蛋白,并用Western blot和免疫组织化学法进一步确定差异蛋白的变化,用HE染色观察视网膜细胞的变化。结果视觉剥夺后,视网膜中4个蛋白的表达量下降超过（2.5±0.5）倍。它们分别是热休克蛋白70、糖酵解蛋白α-烯醇化酶、转运蛋白血清铁传递蛋白和钙离子结合蛋白恢复蛋白。然而未发现视网膜细胞数量的减少。结论短期视觉剥夺可以引起视网膜中蛋白的变化,可能与弱视的产生有密切关系。