人晶体上皮细胞的体外培养

目的:提供一种简单可行,易于掌握的体外培养人晶体上皮细胞的方法。方法:用无齿显微镊子将晶体囊膜分离出来,剪碎后直接移至细胞培养瓶中培养,当细胞长出融合后,用胰蛋白酶消化传代。结果:接种培养4天后,可见晶体上皮细胞开始长出,并以贴壁方式生长。结论:用此方法体外培养人晶体上皮细胞,具有简单、快捷、成功率高的优点。眼科学报1997;13:170—172。     

视网膜母细胞瘤SO－RB_（50）瘤细胞体外粘附晶体实验的初步报告

视网膜母细胞瘤ＳＯ－ＲＢ５０瘤细胞体外粘附晶体实验的初步报告李永平易玉珍冯官光郑健梁肿瘤细胞侵袭邻近的正常组织及转移是恶性肿瘤最基本的生物学特性之一，对肿瘤侵袭、转移的研究，多限于肺癌、肝癌、黑色素瘤、横纹肌肉瘤等［１～５］，有关视网膜母细胞瘤（ｒｅ...     

兔结膜基质诱导人骨髓间质干细胞分化的初步研究

 【目的】观察人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）在保存人羊膜及兔眼表结膜基质上分化的情况。【方法】24只新西兰兔随机分为2组。实验组：培养有人MSCs的羊膜移植组，将人MSCs接种在保存人羊膜上培养4d，用5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）标记后移植到兔眼表结膜缺损区；对照组，单纯羊膜移植组。分别于移植后1，2，3，4，6和8周，摘取各组实验眼行组织学和免疫组织化学检查，组织学检查移植到兔结膜基质的MSCs的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况；免疫组织化学检测移植到结膜基质的带有BrdU标记的细胞角蛋白3／12（CK3／CKl2）和角蛋白13（CK13）的表达。【结果】MSCs接种到羊膜后能在羊膜上生长，与羊膜共培养4d后，MSCs贴附羊膜生长迅速，组织学特征无明显改变。用羊膜负载MSCs移植到兔结膜缺损区，术后免疫组织化学检测结膜上皮层CK13表达阳性，CK3／CK12表达阴性，在重建的结膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞，未见异常增殖细胞。【结论】人羊膜可作为MSCs的载体，采用人羊膜负载MSCs行兔结膜移植，MSCs能在兔结膜上皮层存活并增殖。     

增殖性玻璃体视网膜病变视网膜前膜体外培养及免疫组化鉴定

目的 探讨视网膜前膜组织培养中存在的细胞迁出率低、传代困难等问题;观察培养细胞的成分及体外培养细胞迁出率和增殖力与PVR发病时间的相关性.方法 使用组织块培养法对手术中剥离的PVR患者视网膜前膜组织进行体外培养;双目倒置显微镜下观察细胞生长状况;DAB显色法对细胞进行免疫组化鉴定.结果 PVR在3个月内的细胞迁出率与3个月以上的细胞迁出率和细胞传代率都有统计学意义;共培养31例前膜组织其中23例有细胞迁出,14例成功进行了细胞传代,8例传至第四代;免疫组化鉴定见:s-100、CK为阳性,Vimt、GFAP仅少部分细胞呈阳性,CD34呈阴性反应.结论 PVR 3个月内的患者的视网膜前膜组织是进行视网膜前膜组织体外培养的最佳选材;培养的细胞视网膜色素上皮细胞为主,含有少部分成纤维细胞及神经胶质细胞.     

PCR扩增抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因

目的：获得抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因。方法：从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,逆转录形成cDNA,用扩增小鼠K轻链可变区基因的引物,通过RT－PCR方法,扩增基因,1．5％琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果：用轻链引物扩增获得340bp的基因片段。结论;从三株杂交瘤细胞中获得高纯度的总RNA;用RT－PCR方法从一株杂交瘤细胞成功克隆了抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因,为基因工程抗体研究奠定了良好基础。     

人视网膜色素上皮细胞的培养及鉴定

目的：进行人ＲＰＥ细胞的体外培养，为研究其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型。方法：用改良的眼杯缝线固定法，将其固定在眼球托上，通过消化获取人ＲＰＥ细胞，作细胞形态学、组织化学和电镜鉴定。结果：ＲＰＥ细胞培养早期生长活跃、胞核透明、胞浆含丰富黑色素颗粒，Ｇｉｅｍｓａ染色见染色体，ＤＯＰＡ氧化酶呈阳性反应，透射电镜见细胞微绒毛及紧密连接。结论：ＲＰＥ细胞经体外培养及短期传代后，仍具有与体内细胞相似形态特征。可为ＲＰＥ的深入研究提供丰富的实验研究材料。     

人视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50的建立及其生物学特性

从54例视网膜母细胞瘤(Rb)实体瘤体外培养研究中,在我国首先建成一个人类Rb连续细胞系:SO-Rb50,至今已连续传代32个余月,275代.形态学观察、免疫组化反应、染色体分析及裸小鼠皮下移植成瘤,均证实SO-Rb50细胞系是视网膜母细胞瘤细胞系.     

SO-Rb50人视网膜母细胞瘤株抗癌基因及癌基因的检测

以SO-Rb50第327代细胞,提取其基因组DNA,以正常人血细胞为对照,检测其Rb抗癌基因和c-myc癌基因。结果表明,该细胞株Rb基因完全缺失,c-myc原癌基因扩增3倍。此为以该细胞株在体外进一步研究肿瘤生长调控和逆转提供依据。     

颜色光对体外培养人视网膜色素上皮细胞的光损伤

目的　在体外培养人视网膜色素上皮细胞的基础上 ,比较蓝、绿、黄光对视网膜色素上皮的损伤。　方法　取第二代融合细胞作为光照射对象 ,用强度为 5 0mW /cm2 的蓝、绿、黄光进行不同时间的光照射 ,通过光镜、电镜检查以及细胞增殖抑制实验比较损伤的差异。　结果　三种颜色光均可引起体外培养的视网膜色素上皮细胞光损伤 ,蓝光的损伤作用最强 ,绿光和黄光的损伤作用近似。　结论　在蓝、绿、黄光所致的视网膜色素上皮光损伤中 ,蓝光的损伤作用最强。     

人眼Tenon氏囊成纤维细胞的体外培养

目的 探讨人眼Tenon氏囊成纤维细胞的体外培养方法,为防治眼部纤维增殖性疾病提供理想的细胞模型.方法 应用组织块和混合消化液培养法,取人角膜移植供体眼Tenon氏囊进行体外培养,并对培养的传代细胞进行液氮冻存复苏和形态学的鉴定.结果 人眼Tenon氏囊成纤维细胞体外生长良好,经HE染色和免疫组化观察证明该细胞为成纤维细胞.冻存复苏后的细胞能继续传代生长,其形态学特点与冻存前基本一致.结论 人眼Tenon氏囊成纤维细胞在体外生长良好,并可长期液氮冻存.