维甲酸诱导大肠癌细胞分化与抑制端粒酶活性

肿瘤的恶性转化与端粒酶(Telomerase)的激活有关,而正常体细胞与绝大部分良性肿瘤缺乏端粒酶活性.研究证实端粒酶表达与大肠癌的发生有密切关系.目前,端粒及端粒酶已被广泛认为是新的肿瘤标记物以及抗肿瘤治疗的靶点.端粒酶抑制剂的研究受到人们的关注,而针对端粒酶的治疗有着潜在的临床应用前景.全反式维甲酸(all-transretinoic acid,RA)是迄今研究最多的分化诱导剂之一,可以诱导多种肿瘤细胞分化逆转其恶性表型.为了了解实体瘤细胞恶性表型逆转是否与端粒酶活性抑制相关,本文观察了     

三氧化二砷注射剂诱导乳癌细胞凋亡

恶性肿瘤的成因与增殖失控,凋亡受阻有关.促进凋亡治疗开创了肿瘤治疗新模式.我国学者最近报道砷剂(主要成分三氧化二砷,As_2O_3)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL),无论对初治还复发及难治病例均有明显疗效,并证实As_2O_3可诱导APL细胞凋亡,为促凋亡治疗提供了成功的范例.为了解As_2O_3对乳癌的影响及作用机制,本文观察了三氧化二砷注射剂诱导乳癌细胞凋亡的作用.采用MTT法检测药物半数抑制剂量(IC50),三氧化二砷注射剂处理人乳癌细胞     

咖啡因在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的实验研究

目的探讨咖啡因在骨肉瘤细胞株(OS-732)顺铂化疗中的增效作用.方法骨肉瘤细胞株分别经咖啡因、顺铂、咖啡因 顺铂作用72h,采用MTT法体外细胞毒性试验观察三者的细胞毒性;应用流式细胞仪分析咖啡因、顺铂及两者配伍对骨肉瘤细胞株细胞周期的影响.结果骨肉瘤细胞株与浓度分别为0.2、2.0、5.0、10.0、20.0mmol/L的咖啡因作用时,细胞毒性指数(CI)分别为12.50%、27.88%、30.77%、56.73%、84.62%;与浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μg/ml的顺铂作用时,CI分别为24.04%、54.80%、65.38%、88.46%;而与低浓度咖啡因与顺铂联合作用,其CI明显增加,随着各自浓度的升高,CI明显增加.流式细胞仪分析显示咖啡因对细胞周期也有明显的影响,使G0与G1期细胞比例明显增加,G2与M期细胞比例明显减少,S期细胞比例无明显改变.结论咖啡因在骨肉瘤细胞株顺铂化疗中有显著的增效作用,并能改变骨肉瘤细胞的细胞周期.     

单抗和超抗原的融合蛋白与5-氟尿嘧啶对人大肠癌细胞的协同抑制作用

机体存在着能识别肿瘤抗原的特异性T细胞,但由于种种因素使得抗肿瘤T细胞的质和量均不足放不能引起有效的免疫应答来抑制肿瘤生长.T细胞在肿瘤局部大量激活,可激发强烈的抗肿瘤免疫应答,这有可能成为恶性肿瘤免疫治疗的有效手段.在寻找这样有效的T细胞激活剂中,超抗原开始倍受人们关注.超抗原主要为一些细菌的毒素(如SEA、SEB),是目前已知最强的淋巴细胞激活剂之一,可通过MHCⅡ类分子的辅助,激活所有携带待殊TCR Vβ片段的T细胞,对表达MHCⅡ类的靶细胞产生细胞毒作用.为使超抗原能在肿瘤细胞靶向定位,并避免杀伤表达MHCⅡ类的抗原递呈细胞,近年来Kalland等用基因工程的方法构建了抗人大肠癌的单克隆抗体C215和C242的Fab段与SEA的融合蛋白,以增强超抗原对肿瘤细胞的靶向性.这种融合蛋白对MHCⅡ类分子的结合力大大减低而对肿瘤细胞的亲和力明显增强,使超抗原能在肿瘤局部激活T细胞,释放大量细胞因子,引起一系列抗肿瘤免疫反应,有望成为新的肿瘤生物治疗剂.本文目的在于观察融合蛋白C215 Fab-SEA和     

四氮唑盐法测定K562细胞化疗敏感的最适条件

MTT法用于10种抗癌药物对K562细胞的体外微培养药敏试验，其中Hom,Met,F-Deo和Dau自2d起对K562细胞的抑制作用稳定，其它药物随着作用的延长抑制作用相应增强，在按临床用药所达体内药物理论最高浓度的10％药浓度时，K562细胞与Dau,Hom接触2 d，与Epi，5－FU，Cyt，Dox则需接触5d获70％以上抑瘤。     

人工神经网络肿瘤标志物模型的建立及应用研究

目的 建立8种血清肿瘤标志物(TM)人工神经网络(ANN)诊断模型，以验证其在鉴别恶性肿瘤和提示原发灶不明肿瘤的原发部位中的应用价值。方法 用酶联免疫吸附法及时间分辨荧光分析法分别测定73例肺癌、60例肝癌、76例肠癌、78例胃癌和51例乳腺癌患者，4例原发灶不明恶性肿瘤患者血清标本中，癌胚抗原(CEA)、α-甲胎蛋白(AFP)、糖抗原19-9(CAl99)、糖抗原242(CA242)、癌抗原724(CA724)、细胞角蛋白19片段(CA211)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和组织多肽抗原(TPA)的含量，结合ANN进行数据建模分析，并用盲法验证模型，对原发灶不明肿瘤的鉴别准确率进行评价。结果 肺癌和肝癌ANN模型，对肺癌和肝癌的鉴别准确率达90．9％；肠癌和肝癌ANN模型，对肠癌和肝癌的鉴别准确率为88．9％；肝癌和胃癌ANN模型，对肝癌和胃癌的鉴别准确率为93．5％；乳腺癌和肺癌ANN模型，对乳腺癌和肺癌的鉴别准确率为80．5％；用肠癌和肝癌ANN模型鉴别2例原发灶不明肿瘤(术后病理诊断为肠癌)为肠癌；用肝癌和胃癌ANN模型鉴别2例原发灶不明肿瘤(术后病理诊断为肠癌)为胃癌。结论 ANN结合8种TM建立的诊断模型分析法可有效鉴别肺癌等5种肿瘤，并且可能提示原发灶不明的恶性肿瘤的原发部位。     

裸鼠人大肠癌模型的建立及其特征

本文报告用NC裸小鼠建立的人大肠癌移植瘤模型、定名为HCANZ-901。来源于病人的原代大肠癌块,接种成功率100％(6/6),现已传至19代,传代成功率为97％。移植瘤生长无潜伏期,倍增期6～7d,对移植瘤的光镜、电镜、CEA组化等检查表明该肿瘤模型保持了人大肠癌的恶性特征。     

pcDNA3.1(+)-Hsp70144-517As重组质粒构建及其转染Bcap-37细胞后细胞凋亡的研究

目的构建人反义Hsp70重组质粒[pcDNA3．1（＋）-Hsp70^144-517As]并观察其对乳腺癌Bcap-37细胞凋亡特性的影响。方法依照人hsp70mRNA全长序列，通过计算机分析，设计一对引物，在上游引物中带有1个BamHⅠ位点，经RT—PCR扩增、电泳、回收和纯化hsp70144—517片段，通过T—A克隆到pGEM—TEasy原核表达质粒中，经DNA测序和EcoRⅠ酶切图谱鉴定；EcoRⅠ酶切产物回收后亚克隆到pcDNA3．1（＋）质粒中EcoRⅠ位点之间，利用BamHⅠ酶切图谱筛选反向插入重组质粒，经DNA测序得到pcDNA3．1（＋）-Hsp70^144-517As重组质粒。以脂质体介导法将pcDNA3．1（＋）-Hsp70^144-517As转染列乳腺癌Bcap-37细胞中并克隆培养建株得到AsHsp—Bcap细胞。以DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞周期分析观察转染细胞的凋亡特性。结果本研究成功构建人反义hsp70重组质粒[pcDNA3．1（＋）-Hsp70^144-517As]；转染到乳腺癌Bcap-37细胞后在DNA琼脂糖凝胶电泳上观察到细胞凋亡特征性DNA Ladder及流式细胞周期分析发现G1峰前有1个特征性Ap峰（亚二倍体峰）。结论构建人反义重组质粒pcDNA3．1（＋）-Hsp70^144-517As对乳腺癌Bcap-37细胞有促进细胞凋亡的作用。     

支持向量机软件在胰腺癌早期诊断中的应用研究

目前应用于临床的血清标志物大多为肿瘤相关标志物，即一种标志物可在不同肿瘤中都可能有表达，特异性较低。我们应用统计学和生物信息学的支持向量机软件建立胰腺癌的肿瘤标志物的组合模式识别系统，用以判断正常，胰腺良性疾病及胰腺恶性肿瘤三种人群，并评价其临床意义，进而为其他肿瘤的诊断提供可行的判断方法。     

HR-8348直肠癌细胞系自分泌现象的初步观察

肿瘤细胞的自主性生长一般被认为与其自分泌现象有关。本研究利用HR-8348细胞系的培养上清经离心、透析、浓缩等步骤,制成肠癌细胞条件培养基(CM),并对CM与不同浓度小牛血清(NCS)的生长支持作用作比较。结果发现,CM对HR-8348细胞有一定的生长支持和促进作用,可明显促进其DNA合成,但其促贴壁效应较NCS为差。作者认为,HR-8348直肠癌细胞系具有一定的自分泌能力,其自分泌的生长因子为一种透析不能除去的大分子物质,但其性质及生物学效应尚需进一步研究。