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龙牙楤木三萜皂苷合成途径关键酶AeFPS基因的克隆及原核表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的克隆龙牙楤木法呢二磷酸合成酶(AeFPS)基因并进行原核表达。方法以龙牙楤木为材料,采用RT-PCR方法,设计特异引物,克隆AeFPS基因,并将该基因定向插入Sca I/BamH I切开的原核表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21,于28℃,IPTG诱导5 h,经SDS-PAGE电泳分析,检测出明显的差异条带,Western blotting进一步检测其为目的基因。结果克隆到AeFPS基因cDNA全长为1 040 bp,含有1 029 bp的开放阅读框(ORF),编码342个氨基酸,GenBank登录号为HM219226.1。成功构建了原核表达质粒pET28a/AeFPS、AeFPS蛋白在BL21中高度表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定了目标蛋白。结论首次获得了AeFPS基因,并将其连入原核载体中成功表达,为研究AeFPS蛋白的活性及生化功能奠定了基础。 相似文献
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目的 克隆龙牙楤木法呢二磷酸合成酶(AeFPS)基因并进行原核表达。方法 以龙牙楤木为材料,采用RT-PCR方法,设计特异引物,克隆AeFPS基因,并将该基因定向插入Sca I/BamH I切开的原核表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21,于28 ℃,IPTG诱导5 h,经SDS-PAGE电泳分析,检测出明显的差异条带,Western blotting进一步检测其为目的基因。结果 克隆到AeFPS基因cDNA全长为1 040 bp,含有1 029 bp的开放阅读框(ORF),编码342个氨基酸,GenBank登录号为HM219226.1。成功构建了原核表达质粒pET28a/AeFPS、AeFPS蛋白在BL21中高度表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定了目标蛋白。结论 首次获得了AeFPS基因,并将其连入原核载体中成功表达,为研究AeFPS蛋白的活性及生化功能奠定了基础。 相似文献
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彩超在妊娠高血压综合征孕妇及其胎儿诊治中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的应用彩色多普勒超声检测妊娠高血压综合征(PIH)孕妇及其胎儿的肾动脉血流变化。方法应用彩色多普勒超声检测120例正常孕妇及其胎儿和49例PIH孕妇及其胎儿肾动脉收缩期血流峰值流速(Vmax)、舒张末期血流流速(Vmim)、阻力指数(RI)。结果轻、中、重度PIH孕妇的肾动脉RI、Vmax、Vmin明显高于正常妊娠组(P〈0.01),中、重度PIH孕妇的胎儿肾动脉RI、Vmax、Vmin明显高于正常妊娠组,且RI增高程度与病情轻重有关(P〈0.01)。结论彩色多普勒超声能动态追踪观察PIH孕妇及其胎儿的肾动脉血流变化,预测PIH孕妇状况及其胎儿宫内状态具有一定的临床应用价值。 相似文献
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