谷丙转氨酶37℃参考方法的建立及其应用研究

目的通过建立37℃谷丙转氨酶（ALT）参考方法，对酶校准品定值，探讨血清ALT测定结果的准确性与可比性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立ALT酶催化活性参考方法，用参考方法测定ERM-AD 454 ALT参考品，验证参考方法的准确度，并对其精密度、线性范围和干扰因素进行方法学评价，同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值，按照NCCLS EP9-A方案比较40份人血清用酶校准品校正的常规方法和参考方法ALT结果。结果用参考方法测定ERM-AD454 ALT参考品结果186．4U／L，在其给定的186±4U／L范围内。初步建立的37℃ALT参考方法总CV0．89％～1．12％，线性范围1．3～300U／L。ALT测定结果在32U／L左右偏差超过5％的干扰物浓度分另4为游离胆红素205．2μmol／L、结合胆红素136．8μmol／L；ALT在123U／L左右测定结果偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素256．5μmol／L、结合胆红素273．6μmol／L。血红蛋白在2g／L和三酰甘油在10mmol／L以下时对两种浓度的ALT干扰分别均大于5％和仍然小于5％。用制备的酶校准品校准的常规方法和参考方法进行比较，相关良好（r^2=0．9992）。前者结果与后者相对偏倚在±10％之内。结论ALT参考方法基本建立，采用参考方法为酶校准品定值，可以提高血清ALT测定结果的准确度和可比性。     

CardioChek PA床旁血脂检测仪的准确性验证

  目的  验证CardioChek PA床旁血脂检测仪测定全血总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)的准确度及其与全自动生化分析仪结果的可比性。  方法  使用同一批号试纸条分别在3台CardioChek PA血脂检测仪上连续检测低、中、高三个浓度水平全血20次, 评价TC、TG和HDL-C各项目的批内不精密度和仪器间总不精密度; 在同一台仪器上使用三个批号的试纸条检测全血各10次, 计算批内不精密度和总不精密度。筛选血脂浓度覆盖高、中、低三个水平的54名志愿者, 清晨空腹采集末梢全血, 在3台床旁血脂仪上测定血脂; 同时采集静脉血, 在4种不同的全自动生化分析仪检测血清TC、TG及HDL-C。绘制Bland-Altman图, 比较CardioChek PA与各生化分析仪测定结果的离散趋势; 将CardioChek PA检测结果与不同生化分析系统及参考方法检测结果进行线性回归; 计算CardioChek PA与不同生化分析系统的偏差及百分偏差, 同时判定在医学决定水平处偏差是否符合相关要求。  结果  3台CardioChek PA仪器低、中、高水平的总不精密度TC分别为:2.69%、4.88%、3.51%, TG分别为5.51%、5.27%、4.96%, HDL-C分别为7.27%、6.84%、6.79%;相同仪器、不同批号试纸间总不精密度TC为4.70%, TG为7.66%, HDL-C为8.61%。CardioChek PA检测系统与4种全自动生化仪分析比对结果显示:TC与各系统的偏差最小, 在-2.21%~2.56%之间, HDL-C在-1.12%~5.57%之间, TG除与BeckmanDxC 800偏差较大外(25.85%), 与其他3个系统的平均百分偏差在-4.55%~13.34%之间。医学决定水平偏差分析显示:TC在不同医学决定水平处的偏差在-3.27%~1.96%之间, TG在-11.05%~13.06%之间, HDL-C在-5.86%~11.56%之间, 均满足美国国家胆固醇教育计划总允许误差标准(15%)。进一步的正确度验证结果显示:与参考方法比对, TC在医学决定水平处偏倚分别为1.96%和0.77%;HDL-C分别为2.34%和4.87%。  结论  CardioChek PA床旁血脂检测仪准确度满足临床需求, 适用于临床血脂异常筛查及治疗检测。     

五种血脂检测系统测定结果的可比性调查

目的 通过比较5个常用的不同血脂检测系统在使用参考方法赋值新鲜血清校准前后的结果可比性,探讨实现血脂检测一致化的方法。方法采用室内质控总变异(CV%)评价5个血脂检测系统的不精密度。参考美国临床及实验室标准化委员会(CLSI)EP 9A2方案,比对54份新鲜患者血清在5个临床常用的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)检测系统上的结果,并将不同检测系统结果与均值进行偏倚评估。其中8份样本采用参考方法定值,并评估不同系统的偏倚。尝试采用参考方法赋值的新鲜冰冻血清校准以上检测系统,并使用相同的54份患者新鲜血清再次进行比对及偏倚评估。比对校准前后54份样本在不同检测系统测定的变异。结果 5个检测系统TG总不精密度在3.76%～23.65%之间,TC在2.19%～23.43%之间。各系统结果相关良好,TG和TC的r值分别在0.996 7～0.999 6和0.956 2～0.996 7之间,但系统间结果存在较明显的偏差,各系统最大百分偏差TG在14.72%～34.21%,TC在3.11%～14.57%。用参考方法赋值的血清对不同系统进行校准之后系统间偏差和变异均明显降低。结论用参考方法赋值的新鲜血清校准不同的血脂检测系统,可以有效地提高测定结果的一致性。     

天门冬氨酸氨基转移酶37℃参考方法的建立及其应用研究

目的通过建立37℃天门冬氨酸氨基转移酶（AST）参考方法,对酶校准品定值,探讨血清AST测定结果的准确性与可比性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立AST酶催化活性参考方法,并对其精密度、线性范围和干扰因素进行方法学评价,用参考方法测定c．f．a．s多项校准液,并建立本室的参考范围。同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLSEP9-A方案比较40份人血清用酶校准品校准的常规方法和参考方法AST结果。结果我室初步建立的37℃ AST参考方法相应方法学参数,如下：总CV0．89％-1．12％、线性范围1．3—300U／L。AST测定结果在48U／L左右偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素256．5μmol／L、结合胆红素205．2μmol／L;AST在165U／L左右测定结果偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素307．8μmol／L、结合胆红素342μmol／L。血红蛋白在1g／L时对两种浓度的AST干扰均大于5％。而甘油三酯在10mmoL／L以下对两种浓度的AST的干扰仍然小于5％。用参考方法测定c．f．a．s多项校准液AST结果128．5U／L,比靶值高0．5U／L。本室参考范围AST：男性10—40U／L;女性7—40U／L。健康男女AST有显著差别（P〈0．05）。用制备的酶校准品校准的常规方法和参考方法进行比较,相关良好（r^w=0．9992）。前者结果与后者相对偏倚在±10％之内。结论我室的参考方法基本建立,采用参考方法为酶校准品定值,可以提高血清AST测定结果的准确性和可比性。     

乳酸脱氢酶(LDH) 37℃参考方法的建立及其临床应用

目的通过建立37℃乳酸脱氢酶（LDH）参考方法．对酶校准品定值,探讨血清LDH测定结果的准确度与一致性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立LDH酶催化活性参考方法,用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品．验证参考方法的准确性,并对其精密度进行方法学评价。同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLS EP9-A方案分别比较40份人血清用酶校准品校正的非配套常规方法、配套常规方法以及理论K值常规方法和参考方法LDH结果,计算前三种常规方法与参考方法的相对偏倚及相关系数。结果用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品结果500．1U／L,在其给定的502±7U／L范围内。初步建立的37℃LDH参考方法CV〈1％。用制备的酶校准品校准的非配套常规方法、配套常规方法、理论K值常规方法和参考方法比较,相关均良好,分别为0.9867,0.9872和0．9878,而与配套常规方法和理论K值常规方法相比较,酶校准品校准的非配套常规方法与参考方法的相对偏倚明显阵低,在10％以下。结论LDH的参考方法基本建立,采用参考方法定值酶校准品,可以提高临床血清LDH测定结果的准确度和一致性。     

丙氨酸氨基转移酶37℃参考方法评价临床常用方法探讨

目的通过建立37℃丙氨酸氨基转移酶(ALT)参考方法,评价干化学和湿化学五种检测组合的临床常用方法 ,探讨ALT测定结果的准确性与可比性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推荐的参考测量程序建立ALT参考方法,测定ERMR○-AD 454 ALT参考品,验证参考方法的准确性。并对其精密度进行评估。同时用参考方法为冰冻新鲜血清定值,校准非配套湿化学常用方法。干化学采用Vitros配套系统。按照NCCLS EP9-A方案分别比较40份人血清干湿化学五种检测组合的常用方法和参考方法ALT结果。结果用参考方法测定ERMR○-AD 454ALT参考品结果186.4 U/L,在其给定的186±4 U/L范围内。建立的37℃ALT参考方法总CV0.89%-1.12%。Vit-ros干化学配套系统;Olympus仪器和Roche试剂及校准品组成的湿化学非配套系统;Olympus仪器和Roche试剂及参考方法定值的冰冻血清作校准品组成的湿化学非配套系统;Olympus湿化学配套系统以及Olympus仪器试剂和Roche校准品组成的湿化学非配套系统ALT 5种检测结果和参考方法进行比较,相关均良好(r2分别为0.994,0.998 6,1,0.997,0.99。)。前3种检测系统ALT检测结果与参考方法相对偏倚均在±20%之内,符合CLIA’88的20%的判定标准。后两种检测系统结果与参考方法相对偏倚在ALT低水平高达60%。结论通过ALT参考方法可以评价加入磷酸吡哆醛的临床常用方法,提高血清ALT测定结果的准确性和可比性。不适合评价不加磷酸吡哆醛的临床常用方法。     

胶乳增强免疫比浊法测定血清胱抑素C方法学评价及临床意义

目的应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的标准化评价方案对胶乳增强免疫比浊法测定血清胱抑素C（Cystatin C,CySC）进行初步评价。并探讨血清CysC在肾小球滤过功能中的应用价值。方法测定92例表观健康人、41例肾脏疾病患者血清CysC浓度。分析胶乳增强免疫比浊法测定血清CysC的精密度、准确性、线性范围和干扰因素。结果胶乳增强免疫比浊法测定血清CysC批内变异系数为1．52％（低值）、1．25％（高值）;日间变异系数为2．73％（低值）、1．77％（高值）;总变异系数为3．27％（低值）、2．06％（高值）。平均回收率为97．3％。检测线性范围为0．1～6．00mg／L,线性范围内偏差〈5％。总胆红素（正干扰）在573μmol／L、血红蛋白（负干扰）6g／L、甘油三酯（负干扰）12mmol／L以下对CysC偏差〈5％。基本不受溶血、黄疸和脂血干扰。肾脏疾病患者血清CysC与肌酐清除率（Ccr）相关系数r=-0．9031,肌酐（Or）与Ccr的相关系数r=-0．8433,在评价肾小球滤过功能方面。CysC优于Cr。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清CvsC快速、准确、精密度高,可用于肾小球滤过功能的评价。     

1例先天性乏清蛋白血症及文献复习

<正>本院1例患者因“皮肤变黑，反复腹水，右下肢肿胀”就诊，实验室检查发现极低清蛋白（Alb）血症。该患者在外院和本院多次常规检测血清Alb均低于实验室常规检测方法下限，且除外常见导致低Alb血症的原因，包括如营养不良、肝脏疾病、肾脏疾病、肠蛋白丢失等。本实验室采用血清蛋白电泳、染料结合比色法（溴甲酚绿法、溴甲酚紫法）、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法等检测方法确认该患者的Alb水平确实极低，结合其他实验室结果、患者临床表现与检查结果，综合文献分析，拟诊断为先天性乏Alb血症（congenital analbuminemia,CAA）。     

乳酸脱氢酶（LDH）37℃参考方法的建立及其临床应用

目的通过建立37℃乳酸脱氢酶（LDH）参考方法．对酶校准品定值,探讨血清LDH测定结果的准确度与一致性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立LDH酶催化活性参考方法,用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品．验证参考方法的准确性,并对其精密度进行方法学评价。同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLS EP9-A方案分别比较40份人血清用酶校准品校正的非配套常规方法、配套常规方法以及理论K值常规方法和参考方法LDH结果,计算前三种常规方法与参考方法的相对偏倚及相关系数。结果用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品结果500．1U／L,在其给定的502±7U／L范围内。初步建立的37℃LDH参考方法CV〈1％。用制备的酶校准品校准的非配套常规方法、配套常规方法、理论K值常规方法和参考方法比较,相关均良好,分别为0.9867,0.9872和0．9878,而与配套常规方法和理论K值常规方法相比较,酶校准品校准的非配套常规方法与参考方法的相对偏倚明显阵低,在10％以下。结论LDH的参考方法基本建立,采用参考方法定值酶校准品,可以提高临床血清LDH测定结果的准确度和一致性。