致肾盂肾炎大肠埃希菌黏附素表达载体构建及表达产物抗原性检测

目的 构建致肾盂肾炎大肠埃希菌(UPEC)P菌毛黏附素PapG重组融合蛋白表达载体．检测该重组蛋白的免疫原性。方法 设计并合成一对P菌毛PapG黏附素结构基因的PCR扩增引物；筛选、鉴定重组质粒。以IPTG诱导PapG与GST重组融合蛋白表达．表达产物经亲和层析纯化后用Western blot分析。结果 成功地构建papG结构基因重组表达载体．所表达的重组蛋白相对分子质量约63kD．可为UPECP菌毛多克隆抗体所识别。结论 所获得的PapG-GST重组融合蛋白纯化产物保持了天然抗原性．可用于疫苗研制及其他免疫学研究。     

泌尿道致病性大肠埃希菌Ⅰ型PapG黏附素基因的扩增与分析

目的获得Ⅰ型黏附素代表菌株-泌尿道致病性大肠埃希菌（UPEC）J96 PapG全基因扩增片段并进行克隆子分析.方法设计合成一对可扩增Ⅰ型papG全长基因的PCR引物,采用长片段PCR扩增法获得该基因的扩增片段,以限制性内切酶酶解后克隆pUC18质粒载体.结果限制性酶谱、PCR和序列分析表明,所获得重组质粒pJG29中已带有Ⅰ型papG全长基因片段的克隆.结论所设计合成的引物和建立的PCR扩增法可用于大量获取并分析UPECⅠ型黏附素基因.